本文選題：G-四鏈體 + 銀納米簇　； 參考：《化學(xué)學(xué)報(bào)》2017年11期

【摘要】：以DNA為模板合成的熒光銀納米簇(DNA-Ag NC)是一類性能優(yōu)秀的發(fā)光探針,已被廣泛應(yīng)用于傳感與成像領(lǐng)域.目前大多數(shù)定量方法都是基于目標(biāo)物結(jié)合帶來的直接的銀納米簇發(fā)光強(qiáng)度的變化,因此,分析方法的重現(xiàn)性將不可避免地受實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地或測(cè)定條件變化的影響.本工作中,采用以G-四鏈體為模板的銀納米簇(GQ-AgNC)與菁染料Cyanine5(Cy5)為能量供-受體對(duì),發(fā)展了基于熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)機(jī)理的mi RNA比率測(cè)定方法.其中,Cy5標(biāo)簽具有通用性,簡(jiǎn)化了實(shí)際應(yīng)用中的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),降低了試劑成本.針對(duì)mi RNA let-7a的方法,檢測(cè)動(dòng)態(tài)范圍為12~300nmol/L,檢測(cè)限為6.9 nmol/L,且可以將let-7a與let-7家族中的其他mi RNA區(qū)分.HepG2細(xì)胞的總RNA提取物加標(biāo)回收結(jié)果表明該方法具有應(yīng)用于臨床樣本測(cè)試的潛力.本研究工作拓展了DNA-Ag NC的應(yīng)用,并有助于加深在FRET設(shè)計(jì)中以DNA-Ag NC為供體進(jìn)行分析應(yīng)用的進(jìn)一步理解.
[Abstract]:The fluorescent silver nanoclusters DNA-Ag NCs synthesized by using DNA as template are a kind of excellent luminescent probes and have been widely used in sensing and imaging fields. At present, most quantitative methods are based on the direct changes in luminescence intensity of silver nanoclusters caused by the combination of target materials. Therefore, the reproducibility of analytical methods will inevitably be affected by the changes of experimental sites or determination conditions. In this work, the GQ-AgNC-based silver nanoclusters (GQ-AgNC) and cyanine dye Cyanine (Cyanine 5C5) were used as energy donor / acceptor pairs to develop a method for the determination of mi RNA ratio based on the fluorescence resonance energy transfer (FRET) mechanism. The tag of Cy5 is universal, which simplifies the experimental design in practical application and reduces the cost of reagents. For the method of mi RNA let-7a, the dynamic range of detection was 123nmol / L, the detection limit was 6.9 nmol / L, and the total RNA extract of let-7a differentiated from other mi RNA in the let-7 family could be labeled and recovered. The results showed that the method had the potential to be applied to clinical sample testing. This work extends the application of DNA-Ag NC and helps to further understand the application of DNA-Ag NC in FRET design.
【作者單位】： 北京分子科學(xué)國(guó)家實(shí)驗(yàn)室生物有機(jī)與分子工程教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室北京大學(xué)化學(xué)與分子工程學(xué)院分析化學(xué)所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(Nos.21475004和21535006)資助~~
【分類號(hào)】：O629.7;O657.3

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