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毛細(xì)管電泳—仿生免疫分析檢測敵百蟲方法研究

發(fā)布時(shí)間:2018-03-07 20:44

  本文選題:敵百蟲 切入點(diǎn):毛細(xì)管電泳技術(shù) 出處:《山東農(nóng)業(yè)大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:敵百蟲是一種廣泛應(yīng)用于田間農(nóng)作物的有機(jī)磷殺蟲劑,具有低毒、高效、水溶性好等優(yōu)點(diǎn),被廣泛地應(yīng)用于園藝、農(nóng)林、畜牧等領(lǐng)域。但是,敵百蟲容易經(jīng)呼吸道及皮膚進(jìn)入人體,近年來,其潛在地致突變和致癌性引起人們的高度重視。因此,建立一種快速、準(zhǔn)確、低成本的敵百蟲檢測方法迫在眉睫。本課題研究基于毛細(xì)管電泳分析技術(shù)和仿生免疫分析技術(shù),建立了一種快速檢測蔬菜中敵百蟲的新方法。研究的主要結(jié)果如下:(1)制備合成敵百蟲酶標(biāo)半抗原。敵百蟲和琥珀酸酐在無水吡啶中避光反應(yīng)后,經(jīng)過萃取、減壓蒸餾等步驟得到敵百蟲半抗原。采用一步合成法,將辣根過氧化物酶(HRP)與敵百蟲半抗原直接連接制備酶標(biāo)半抗原。(2)敵百蟲仿生抗體的制備。敵百蟲為模板分子,甲基丙烯酸(MAA)為功能單體,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)為交聯(lián)劑,偶氮二異丁腈(AIBN)為引發(fā)劑,采用本體聚合法合成仿生抗體,并通過熱重分析實(shí)驗(yàn)和電鏡掃描實(shí)驗(yàn)對其進(jìn)行表征。(3)建立毛細(xì)管電泳-仿生免疫分析檢測敵百蟲新方法。對實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行了系統(tǒng)的優(yōu)化,結(jié)果顯示,敵百蟲在pH值為7.6的PBS緩沖液中,與酶標(biāo)敵百蟲半抗原競爭反應(yīng)60 min的條件下,該方法的最低檢測限(LOD,IC15)和靈敏度(IC50)分別為和0.13μg/L和0.16 mg/L。本方法對0.65μg/L,0.16 mg/L兩個(gè)濃度水平的菜豆與黃瓜樣品敵百蟲添加回收率為78.8%~103%。
[Abstract]:Trichlorfon is a kind of organophosphorus insecticide widely used in field crops. It has the advantages of low toxicity, high efficiency and good water solubility. It is widely used in horticulture, agriculture and forestry, animal husbandry and other fields. Trichlorfon is easy to enter human body through respiratory tract and skin. In recent years, the potential mutagenicity and carcinogenicity of trichlorfon have attracted great attention. Low cost detection of trichlorfon is urgent. This study is based on capillary electrophoresis and bionic immunoassay. A new method for rapid detection of trichlorfon in vegetables was established. The main results are as follows: 1) Synthesis of trichlorfon labeled hapten. Trichlorfon and succinic anhydride were extracted by light avoidance reaction in anhydrous pyridine. The hapten of trichlorfon was obtained by decompression distillation. By means of one-step synthesis, horseradish peroxidase (HRP) was directly linked with trichlorfon hapten to prepare an enzyme-labeled hapten. 2) the bionic antibody of trichlorfon was prepared. Trichlorfon was used as template molecule. Bionic antibody was synthesized by bulk polymerization with MAA as functional monomer, ethylene glycol dimethacrylate (EGDMA) as crosslinking agent and azodiisobutyronitrile (AIBN) as initiator. A new method for the detection of trichlorfon by capillary electrophoresis and bionic immunoassay was established by thermogravimetric analysis and scanning electron microscopy. Trichlorfon reacted with the enzyme labeled trichlorfon hapten in PBS buffer with pH 7.6 for 60 min. The minimum detection limit and sensitivity of this method were 0.13 渭 g / L and 0.16 mg / L, respectively. The recoveries of trichlorfon in two concentrations of 0.65 渭 g / L and 0.16 mg/L were 78.8% and 103%, respectively.
【學(xué)位授予單位】:山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:TS255.7;O657.8

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