本文關(guān)鍵詞：光譜法聯(lián)合德拜休克爾理論研究食品添加劑與BSA的相互作用

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【摘要】：納他霉素(natamycin)、乳酸鏈球菌素(nisin)、固綠FCF(FCF)、專利藍(lán)V(PBV)、酸性藍(lán)1(AB1)、酸性紅1(AR1)和酸性綠50(AG50)均為常用食品添加劑。其中,natamycin和nisin是常用食品防腐劑,而其它五種則是食品著色劑。為深入理解上述食品添加劑在人體血液中的化學(xué)吸收、分布和轉(zhuǎn)移,故本文采用多種光譜方法(熒光、UV-vis吸收和FT-IR光譜)研究這七種食品添加劑與牛血清白蛋白(BSA)間相互作用。研究表明在模擬生理?xiàng)l件下(pH 7.4),natamycin和nisin對(duì)BSA內(nèi)源熒光的猝滅類(lèi)型分別為靜態(tài)猝滅和聯(lián)合(靜態(tài)和動(dòng)態(tài))猝滅;相互作用過(guò)程中有BSA-natamycin/nisin復(fù)合物形成;并推算這兩個(gè)體系的結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)和結(jié)合距離。同時(shí),位點(diǎn)標(biāo)記競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)表明這兩種食品防腐劑主要與BSA中的Trp-212殘基結(jié)合。熱力學(xué)參數(shù)表明這兩個(gè)結(jié)合反應(yīng)均為自發(fā)過(guò)程,且BSA與natamycin的結(jié)合主要依靠疏水性相互作用,而B(niǎo)SA與nisin的結(jié)合主要依靠范德華力和氫鍵。另外,共存離子對(duì)BSA-natamycin/nisin體系猝滅常數(shù)的影響也被探討。在不同pH值(4.8、5.5、6.3或7.4)和鹽濃度(0.05、0.10或0.15)下,五種食品著色劑(FCF、PBV、AB1、AR1和AG50)對(duì)BSA的內(nèi)源熒光猝滅類(lèi)型均為靜態(tài)猝滅過(guò)程。熱力學(xué)研究和鹽對(duì)BSA與食品著色劑間相互作用的影響表明BSA與食品著色劑間通過(guò)靜電力自發(fā)結(jié)合形成BSA-食品著色劑復(fù)合物。在不同研究條件下,AR1/AG50與BSA中的Trp-212殘基結(jié)合;然而,對(duì)FCF/PBV/AB1體系,在pH 5.5-7.4范圍內(nèi),它們均與BSA中的Trp-212殘基結(jié)合,在pH 4.8時(shí),它們能與BSA中的Trp-212和Trp-134殘基結(jié)合。同一條件下的結(jié)合常數(shù)(K)表明上述食品著色劑與BSA的結(jié)合能力順序?yàn)?FCFPBVAB1和AR1AG50。同時(shí),UV-vis吸收、同步熒光、3D熒光和FT-IR光譜表明這七種食品添加劑與BSA的結(jié)合反應(yīng)導(dǎo)致BSA的構(gòu)象發(fā)生改變。此外,運(yùn)用德拜休克爾理論研究BSA與AR1/AG50間的相互作用,推算了結(jié)合過(guò)程中真實(shí)的熱力學(xué)結(jié)合常數(shù)(Keq)、真實(shí)的自由能變(ΔG0I→0)和BSA陰離子腔中的有效電荷(ZP),結(jié)果發(fā)現(xiàn)在測(cè)定BSA與AR1/AG50間相互作用強(qiáng)度的過(guò)程中,扮演重要角色的是BSA的本體電荷,并不是BSA的整體電荷或表面電荷。并且通過(guò)計(jì)算這兩個(gè)體系的Tm和Hurea值分別討論BSA的熱力學(xué)穩(wěn)定性和結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性。
【學(xué)位授予單位】：西華師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：TS202.3;O657.3

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本文編號(hào)：1229130