發(fā)布時間：2017-10-26 08:36

  本文關(guān)鍵詞：快速檢測巰基化合物的新方法研究

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【摘要】：由于巰基化合物在醫(yī)療健康和科學(xué)研究中所起的不可或缺的作用,巰基化合物的檢測方法逐漸成為分析化學(xué)中的一個熱點。在諸多方法當(dāng)中,熒光方法由于其低成本、高選擇性、高靈敏度度以及各種各樣的熒光探針等優(yōu)勢而逐漸成為巰基化合物的主要檢測方法之一。但是熒光法檢測巰基化合物普遍存在耗時較長這個問題。這主要是因為有機熒光探針的合成和分離往往需要較多的步驟和較長的時間,并且這些探針和巰基化合物的作用也發(fā)生得比較慢。這個問題極大的阻礙了熒光方法在巰基化合物的檢測領(lǐng)域的實際應(yīng)用。本文準(zhǔn)備從減少熒光方法檢測巰基化合物所需時間的角度入手來建立快速檢測巰基化合物的新方法,主要包括如下兩種思路。第一種思路是尋找直接能夠與巰基化合物作用且響應(yīng)速度快的商品化熒光探針。在實驗中發(fā)現(xiàn)了巰基化合物能使異硫氰酸熒光素?zé)晒鈴姸瓤焖亠@著降低這一有趣現(xiàn)象,以此為出發(fā)點探究了影響該現(xiàn)象的pH,時間等條件,并且在此基礎(chǔ)上提出了一種快速檢測巰基化合物的新方法。本方法的用時非常短,在最佳條件下5分鐘之內(nèi)完成對巰基化合物的檢測。在最佳條件下對實際樣品的測試取得了很好的效果,且具有良好的選擇性。對谷胱甘肽(GSH),高半胱氨酸(Hcy),半胱氨酸(Cys),二硫蘇糖醇(DTT)的檢測限分別達(dá)到3.08μM,2.66μM, 1.28μM,1.92μM。第二種思路是選擇一種能快速合成并快速響應(yīng)巰基化合物的熒光探針�；诒菊n題組前期的工作和文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn),銅納米簇是一種能夠快速合成且對巰基化合物快速響應(yīng)的優(yōu)良熒光探針。而且跟金納米簇和銀納米簇相比還具有成本低的優(yōu)點。以單鏈DNA為模板在10分鐘內(nèi)成功合成出銅納米簇,并將其應(yīng)用于巰基化合物的快速檢測。檢測的原理是巰基化合物和銅納米簇形成一種沒有熒光的配位化合物。對銅納米簇的合成條件進(jìn)行了優(yōu)化,包括DNA的堿基數(shù)、溶液的pH、合成時間、銅離子和抗壞血酸鈉的比例、銅離子和DNA的比例等。在最佳條件下合成的銅納米簇對巰基化合物具有較高的靈敏度和選擇性,對半光氨酸、高半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫蘇糖醇的檢測范圍分別是0.50μM-30.00μM、 1.5μM-32.5μM、0.50μM-30.00μM、0.50μM-25.00μM。最終利用該方法成功實現(xiàn)了對谷胱甘肽膠囊中的谷胱甘肽的含量的檢測,達(dá)到了理想的效果。
【關(guān)鍵詞】：巰基化合物 異硫氰酸熒光素 銅納米簇
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：O657.3
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 第一章 緒論11-30
• 1.1 巰基化合物11-14
• 1.1.1 半胱氨酸12-13
• 1.1.2 高半胱氨酸13
• 1.1.3 谷胱甘肽13-14
• 1.1.4 二硫蘇糖醇14
• 1.2 巰基化合物的檢測14-22
• 1.2.1 高效液相色譜法14-15
• 1.2.2 電化學(xué)方法15-18
• 1.2.3 熒光方法18-22
• 1.3 論文選題思路22-23
• 參考文獻(xiàn)23-30
• 第二章 快速檢測巰基化合物的新方法30-40
• 2.1 引言30-31
• 2.2 實驗部分31
• 2.2.1 實驗藥品與儀器31
• 2.2.2 實驗方法31
• 2.3 結(jié)果與討論31-38
• 2.3.1 巰基化合物對FITC的熒光淬滅31-32
• 2.3.2 最佳pH的選擇32-33
• 2.3.3 反應(yīng)時間的確定33-34
• 2.3.4 FITC檢測巰基化合物的靈敏度34-37
• 2.3.5 FITC檢測巰基化合物的選擇性37
• 2.3.6 實際樣品檢測37-38
• 2.4 結(jié)論38
• 參考文獻(xiàn)38-40
• 第三章 以單鏈DNA為模板的銅納米簇的合成及其在巰基化合物檢測中的應(yīng)用40-58
• 3.1 引言40-42
• 3.2 實驗部分42-43
• 3.2.1 試劑和藥品42
• 3.2.2 實驗儀器42-43
• 3.2.3 銅納米簇的合成和熒光研究43
• 3.2.4 谷胱甘肽膠囊中谷胱甘肽含量的測量43
• 3.3 結(jié)果與討論43-54
• 3.3.1 合成條件的優(yōu)化43-47
• 3.3.2 銅納米簇的性質(zhì)的表征47-48
• 3.3.3 巰基化合物淬滅銅納米簇?zé)晒獾臋C理48-49
• 3.3.4 銅納米簇檢測巰基化合物的靈敏度49-53
• 3.3.5 銅納米簇檢測巰基化合物的選擇性53-54
• 3.3.6 實際樣品檢測54
• 3.4 結(jié)論54-55
• 參考文獻(xiàn)55-58
• 附錄58-59
• 致謝59-60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 黃家淦;陽小靈;劉先發(fā);曾書琴;周麗程;張瓊;黃勤;黃琦;;還原型谷胱甘肽對急性百草枯中毒治療作用的實驗研究[J];贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2015年04期

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本文編號：1097902