本文關(guān)鍵詞：基于核酸適配體的熒光法檢測(cè)水胺硫磷和丙溴磷

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【摘要】：建立了基于適配體的農(nóng)藥水胺硫磷和丙溴磷的熒光檢測(cè)方法。采用可特異性識(shí)別水胺硫磷和丙溴磷、且5'端標(biāo)記熒光基團(tuán)FAM的核酸適配體(F-ss DNA),與3'末端標(biāo)記猝滅基團(tuán)DABCYL的短鏈序列(Q-ss DNA)互補(bǔ)雜交形成雙鏈結(jié)構(gòu),熒光基團(tuán)的熒光被淬滅,熒光信號(hào)很弱;此時(shí)加入靶分子,特異性結(jié)合核酸適配體,引起互補(bǔ)短鏈序列從雙鏈結(jié)構(gòu)中解離,使適配體熒光信號(hào)增強(qiáng),基于此可實(shí)現(xiàn)水胺硫磷、丙溴磷的定量檢測(cè)。優(yōu)化后的檢測(cè)條件為:將終濃度為25 nmol/L F-ss DNA與50 nmol/L Q-ss DNA在25℃孵育20 min,使二者雜交形成雙鏈適配體探針復(fù)合物,加入等體積的農(nóng)藥樣品孵育60 min,然后檢測(cè)體系的熒光信號(hào)變化值ΔI。在最佳條件下,ΔI與水胺硫磷和丙溴磷的濃度均在50~500μmol/L范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。水胺硫磷的檢出限(LOD,3σ)為11.4μmol/L,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為5.8%(n=10);丙溴磷的檢出限為14.0μmol/L,RSD為4.9%(n=10)。用于實(shí)際水樣中兩種農(nóng)藥的檢測(cè),加標(biāo)回收率為85.8%~95.3%
【作者單位】： 安徽科技學(xué)院食品藥品學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 核酸適配體 熒光 水胺硫磷 丙溴磷
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.31201369) 安徽省高校優(yōu)秀人才支持計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(No.gxyq ZD2016219) 安徽科技學(xué)院自然科學(xué)研究項(xiàng)目(No.ZRC2014395)資助~~
【分類號(hào)】：X832;O657.3
【正文快照】： 1引言水胺硫磷(Isocarbophos)是一種速效廣譜的有機(jī)磷殺蟲劑,主要用于防治果樹、水稻和棉花害蟲,禁止用于果、茶、煙、菜、中草藥植物,屬于高毒農(nóng)藥,對(duì)人畜的危害很大,主要通過食道、皮膚和呼吸道引起中毒[1,2]。丙溴磷(Profenofos)是一種中等毒性的非內(nèi)吸性廣譜有機(jī)磷殺蟲劑,

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