本文關(guān)鍵詞：一種快速測(cè)定牦牛皮膠和牛皮膠中18種氨基酸的PITC柱前衍生HPLC法

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【摘要】：建立一種有效測(cè)定牦牛皮膠與牛皮明膠中18種氨基酸含量的異硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生-高效液相色譜法。對(duì)PITC衍生方法進(jìn)行了優(yōu)化,方法無需干燥和有機(jī)溶劑萃取過量PITC的步驟。牦牛皮使用胃蛋白酶在37℃下酶解72 h,酶解物冷凍干燥保存。樣品用6.0 mol/L鹽酸,110℃水解后,以PITC為衍生試劑進(jìn)行衍生處理。采用Shiseido Capcell Pak C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色譜柱,流動(dòng)相為0.14 mol/L乙酸鈉-0.5 m L/L三乙胺水溶液(p H 6.08)和60%乙腈,梯度洗脫,流速為1 m L/min,檢測(cè)波長(zhǎng)為254 nm。18種氨基酸在0.2~80 mg/L濃度范圍內(nèi)與峰面積間的線性關(guān)系良好(r2≥0.999 2),檢出限為0.01~0.39 mg/kg,平均回收率為78.7%~121.0%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.05%~12.0%。結(jié)果表明,該方法衍生化步驟簡(jiǎn)單、靈敏度高、前處理時(shí)間短,可用于牛科動(dòng)物皮膠中多種氨基酸成分和含量的測(cè)定。
【作者單位】： 中國(guó)科學(xué)院西北高原生物研究所青海省藏藥藥理學(xué)和安全性評(píng)價(jià)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)科學(xué)院藏藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)科學(xué)院大學(xué);
【關(guān)鍵詞】： 牦牛皮明膠 牛皮明膠 氨基酸 柱前衍生 異硫氰酸苯酯 高效液相色譜法
【基金】：青海省自然科學(xué)基金青年項(xiàng)目(2015-ZJ-924Q) 中國(guó)科學(xué)院“西部之光”人才培養(yǎng)引進(jìn)計(jì)劃
【分類號(hào)】：R284.1;O657.72
【正文快照】： 牦牛(Bos grunniens)是世界上除了人類之外生活在海拔最高處的哺乳動(dòng)物,是高原畜牧業(yè)最重要的優(yōu)勢(shì)畜種[1-3]。牦牛皮膠由牦牛皮經(jīng)科學(xué)方法提煉而成,可益氣生血、健脾補(bǔ)腎,主要用于營(yíng)養(yǎng)性貧血、久病氣虛無力等癥[4]。新鮮牛皮中蛋白質(zhì)高達(dá)30%~35%,氨基酸是蛋白質(zhì)的基本組成單位，

本文編號(hào)：1009049