煙堿降解細菌的篩選及應用研究
發(fā)布時間:2024-05-09 06:13
煙堿即尼古丁,在煙草生物堿中占據很大比例。我國煙草種植面積及產量均在世界前列,在煙草加工過程中會產生大量的廢水,廢水中存在的煙堿由于其不易降解的特性,嚴重危害人們的生存環(huán)境。國內外很多學者通過長期的試驗研究,陸續(xù)發(fā)現一些降解煙堿的微生物,利用微生物及其產物降解煙堿具有很高的應用價值,其在降解煙堿含量帶來的有益影響讓更多的研究者投身其中。本研究以煙草廠污染的土壤為試驗材料,經過初篩、復篩得到了21株降解煙堿的菌株,篩選出降解效果最優(yōu)菌株對其進行鑒定并確定其最佳的生長條件,探索其在煙草加工廢水處理的應用。主要結論如下:(1)在以煙堿為唯一碳氮源的富集培養(yǎng)基上對菌株進行初篩,通過紫外分光光度法,確定菌株降解能力,實現對菌株的復篩,得到高效降解菌株,編號為E3。(2)對菌株E3進行形態(tài)學、生理生化試驗,并通過分子學試驗提取DNA片段,經過PCR擴增,凝膠電泳試驗,DNA測序等試驗獲取菌株序列。通過Blast對比,明確其在細菌分類中的地位,構建系統發(fā)育樹,確定菌株為中間蒼白桿菌(Ochrobactrum intermedium),命名為中間蒼白桿菌E3(O.intermedium E3)。(3)...
【文章頁數】:66 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:3968431
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圖2.1煙堿紫外吸收標準曲線
圖2.1煙堿紫外吸收標準曲線Fig.2.1TheUVabsorptioncurveofnicotine堿降解菌株的復篩初篩得到的21株菌株接種到已知煙堿含量的煙堿培養(yǎng)液中進一蕩培養(yǎng),振蕩器的搖動速度為200r/min,溫度設定為30℃,培酵液中煙堿的濃度....
圖3.1菌株在LB煙堿培養(yǎng)基生長情況
圖3.1菌株在LB煙堿培養(yǎng)基生長情況Fig3.1GrowthofstraininLBnicotinemedium形態(tài)學觀察,發(fā)現菌株E3在LB培養(yǎng)基平板上生長1-2mm,白色,邊緣整齊,光滑,半透明,凸起。圖3.2菌株E3革蘭氏染色結果F....
圖3.2菌株E3革蘭氏染色結果
態(tài)學和生理生化特征圖3.1菌株在LB煙堿培養(yǎng)基生長情況Fig3.1GrowthofstraininLBnicotinemedium形態(tài)學觀察,發(fā)現菌株E3在LB培養(yǎng)基平板上1-2mm,白色,邊緣整齊,光滑,半透明,凸
圖3.4菌株E316SrDNA核苷酸序列
圖3.3菌株E3的16SrDNA序列PCR擴增電泳圖。1:DL2000Marker;2、3均為PCR產物Figure3.316SrDNAsequenceofstrainE3amplifiedbyPCRandelectropHores....
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