煙堿即尼古丁,在煙草生物堿中占據(jù)很大比例。我國煙草種植面積及產(chǎn)量均在世界前列,在煙草加工過程中會產(chǎn)生大量的廢水,廢水中存在的煙堿由于其不易降解的特性,嚴(yán)重危害人們的生存環(huán)境。國內(nèi)外很多學(xué)者通過長期的試驗研究,陸續(xù)發(fā)現(xiàn)一些降解煙堿的微生物,利用微生物及其產(chǎn)物降解煙堿具有很高的應(yīng)用價值,其在降解煙堿含量帶來的有益影響讓更多的研究者投身其中。本研究以煙草廠污染的土壤為試驗材料,經(jīng)過初篩、復(fù)篩得到了21株降解煙堿的菌株,篩選出降解效果最優(yōu)菌株對其進(jìn)行鑒定并確定其最佳的生長條件,探索其在煙草加工廢水處理的應(yīng)用。主要結(jié)論如下:(1)在以煙堿為唯一碳氮源的富集培養(yǎng)基上對菌株進(jìn)行初篩,通過紫外分光光度法,確定菌株降解能力,實現(xiàn)對菌株的復(fù)篩,得到高效降解菌株,編號為E3。(2)對菌株E3進(jìn)行形態(tài)學(xué)、生理生化試驗,并通過分子學(xué)試驗提取DNA片段,經(jīng)過PCR擴(kuò)增,凝膠電泳試驗,DNA測序等試驗獲取菌株序列。通過Blast對比,明確其在細(xì)菌分類中的地位,構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,確定菌株為中間蒼白桿菌(Ochrobactrum intermedium),命名為中間蒼白桿菌E3(O.intermedium E3)。(3)...

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【學(xué)位級別】：碩士

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圖2.1煙堿紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2.1煙堿紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.2.1TheUVabsorptioncurveofnicotine堿降解菌株的復(fù)篩初篩得到的21株菌株接種到已知煙堿含量的煙堿培養(yǎng)液中進(jìn)一蕩培養(yǎng)，振蕩器的搖動速度為200r/min，溫度設(shè)定為30℃，培酵液中煙堿的濃度....

圖3.1菌株在LB煙堿培養(yǎng)基生長情況

圖3.1菌株在LB煙堿培養(yǎng)基生長情況Fig3.1GrowthofstraininLBnicotinemedium形態(tài)學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)菌株E3在LB培養(yǎng)基平板上生長1-2mm，白色，邊緣整齊，光滑，半透明，凸起。圖3.2菌株E3革蘭氏染色結(jié)果F....

圖3.2菌株E3革蘭氏染色結(jié)果

態(tài)學(xué)和生理生化特征圖3.1菌株在LB煙堿培養(yǎng)基生長情況Fig3.1GrowthofstraininLBnicotinemedium形態(tài)學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)菌株E3在LB培養(yǎng)基平板上1-2mm，白色，邊緣整齊，光滑，半透明，凸

圖3.4菌株E316SrDNA核苷酸序列

圖3.3菌株E3的16SrDNA序列PCR擴(kuò)增電泳圖。1：DL2000Marker；2、3均為PCR產(chǎn)物Figure3.316SrDNAsequenceofstrainE3amplifiedbyPCRandelectropHores....

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