全氟辛烷磺酸鹽（PFOS）和全氟辛烷磺酸（PFOA）是全氟污染物（PFcs）中的代表，具有疏水防塵作用，自上世紀(jì)50年代，在汽車涂料、紡織、不粘鍋涂層等產(chǎn)品中廣泛使用。全氟化合物毒性被逐漸發(fā)現(xiàn)，PFOS和PFOA也被禁用，但它們的毒性作用機制仍未明確。東亞三角渦蟲（Dugesia japonica）為原始三胚層動物，具有強大的再生能力，對環(huán)境刺激非常敏感，可用于檢測水體質(zhì)量。本論文以PFOS和PFOA處理渦蟲，探究壓力相關(guān)蛋白的基因表達(dá)量與藥品處理濃度及時長的關(guān)系，并對渦蟲經(jīng)藥物處理后細(xì)胞核DNA損傷情況進(jìn)行初步檢測。 實驗以6個濃度的PFOS和PFOA溶液分別處理完整渦蟲和再生渦蟲，選擇的壓力相關(guān)蛋白基因功能涉及細(xì)胞抗逆性，神經(jīng)發(fā)育，凋亡，信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等，采用RT-PCR技術(shù)檢測它們mRNA表達(dá)量的相對變化。結(jié)果表明，低濃度PFOS和PFOA短時間處理渦蟲，hsp70和hsp90mRNA表達(dá)量受到抑制，隨著處理時間的延長，表達(dá)量上升，可能為毒性壓力下產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)；在高濃度長時間處理組，渦蟲p53基因表達(dá)量上升，渦蟲無法承受藥物毒性進(jìn)入凋亡階段；另外，兩種藥物對神經(jīng)相關(guān)基因Xnp影響不大，...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1. PFOS 和 PFOA
        1.1 簡介
        1.2 PFOS 和 PFOA 毒性
            1.2.1 基因毒性
            1.2.2 細(xì)胞毒性
            1.2.3 組織器官毒性
            1.2.4 致死性
            1.2.5 PFOS 和 PFOA 與其它毒性物質(zhì)的作用
            1.2.6 PFOS 與 PFOA 研究現(xiàn)狀與前景
        1.3 PFOS 和 PFOA 污染
    2.渦蟲
        2.1 渦蟲概述
        2.2 渦蟲在毒理學(xué)研究中的應(yīng)用
    3. 本文研究的主要內(nèi)容及思路
第二章 RT-PCR 法檢測 PFOS 和 PFOA 處理后渦蟲壓力相關(guān)基因表達(dá)量的變化
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 實驗材料和儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 渦蟲的處理
            2.2.2 渦蟲總 RNA 的提取
            2.2.3 RNA 電泳檢測
            2.2.4 cDNA的合成
            2.2.5 PCR 及電泳
        2.3 方差分析
    3. 結(jié)果
        3.1 RNA 電泳
        3.2 PFOS 處理渦蟲各基因 mRNA 表達(dá)變化趨勢
        3.3 PFOA 處理渦蟲各基因 mRNA 表達(dá)變化趨勢
    4. 討論
第三章 Western Blot 法檢測 PFOS 和 PFOA 對渦蟲 HSP70 蛋白表達(dá)的影響
    1. 前言
    2. 材料和方法
        2.1 實驗材料和儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 渦蟲的處理
            2.2.2 蛋白提取
            2.2.3 蛋白電泳
            2.2.4 Western blot
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 蛋白電泳照片
        3.2 PFOS 對渦蟲 HSP70 蛋白表達(dá)量變化的影響
        3.3 PFOA 對渦蟲中 HSP70 蛋白表達(dá)量變化影響
    4. 討論
第四章 單細(xì)胞凝膠電泳檢測 PFOS 和 PFOA 對渦蟲細(xì)胞核 DNA 的損傷作用
    1. 前言
    2. 實驗材料和方法
        2.1 實驗材料和試劑
        2.2 實驗方法
            2.2.1 渦蟲的處理
            2.2.2 單細(xì)胞凝膠電泳
            2.2.3 大腸桿菌 DNA 提取
            2.2.4 大腸桿菌 DNA 處理及電泳
    3. 實驗結(jié)果
        3.1 單細(xì)胞凝膠電泳
        3.2 PFOS 和 PFOA 對大腸桿菌 DNA 作用
    4. 討論
總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
論文發(fā)表



本文編號：3785301