納米銀(AgNPs)是應(yīng)用最為廣泛的納米金屬材料之一,已有研究表明,AgNPs對生物體有明顯的毒性效應(yīng)。然而AgNPs對生殖系統(tǒng)的影響研究并不多見,且AgNPs對人類胚胎尤其是對胚胎的直接毒性效目前還不清楚。在本研究中,以小鼠胚胎作為研究金屬納米材料AgNPs對體外培養(yǎng)小鼠植入前胚胎的發(fā)育影響。為了闡明AgNPs對哺乳動物胚胎及相關(guān)通路的直接作用,本研究采用小鼠植入前胚胎作為材料,利用IVF技術(shù)建立AgNPs胚胎毒性研究體外模型,分析在不同粒徑和濃度的AgNPs培養(yǎng)液中小鼠植入前胚胎的發(fā)育模式,以及AgNPs對植入前胚胎發(fā)育毒性的時間效應(yīng),以確定胚胎發(fā)育毒性與AgNPs之間的聯(lián)系。本研究采用免疫熒光技術(shù),DCFH-DA,DiBAC_4(3),JC-1等檢測不同環(huán)境條件下,胚胎細胞ROS水平和線粒體損傷及膜電位變化,并研究了早期胚胎中Casepase-3的活性變化。結(jié)果表明,AgNPs對胚胎發(fā)育的毒性作用呈現(xiàn)出粒徑-濃度-時間依賴性;植入前胚胎的AgNPs處理破壞囊胚細胞譜系的正常形成,譜系標(biāo)記物Cdx2和Oct4的表達平衡發(fā)生改變,對胚胎發(fā)育命運造成異常;培養(yǎng)體系中AgNPs會導(dǎo)致胚胎內(nèi)ROS水平升高,線粒體受損;AgNPs導(dǎo)致胚胎細胞膜電位改變;AgNPs導(dǎo)致早期胚胎中Caspase-3活性的改變。AgNPs在很大程度上損害小鼠胚胎發(fā)育,對胚胎發(fā)育有誘導(dǎo)損傷作用。分析AgNPs對胚胎的作用途徑,總之,AgNPs引起導(dǎo)致細胞死亡有兩個途徑,途徑一:AgNPs導(dǎo)致胚胎內(nèi)ROS水平升高對胚胎發(fā)育產(chǎn)生毒性效應(yīng);途徑二:AgNPs改變胚胎膜電位及提高胚胎內(nèi)Casepase-3活性,誘發(fā)胚胎細胞異常發(fā)育與凋亡。
【學(xué)位單位】：阜陽師范學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：X171.5;TB383.1
【部分圖文】：

納米銀對著床前胚胎發(fā)育影響的可能機制Fig.1.1PossiblemechanismofeffectsofAgNPsonpreimplantationembryo

納米銀懸浮液制備流程

體外培養(yǎng)模式圖
【參考文獻】

本文編號：2856239