【摘要】：隨著工業(yè)化進程速度的加快,海洋污染問題日益突出,赤潮問題更是嚴峻。中肋骨條藻作為赤潮優(yōu)勢藻之一,廣泛分布于我國近海海域,曾多次引發(fā)赤潮,對海洋生態(tài)、魚類養(yǎng)殖造成嚴重危害,尋找環(huán)保高效的赤潮治理方法刻不容緩。本課題組篩選得到一株對中肋骨條藻具有高效抑藻活性的菌株Chitinimonas prasina LY03,為了探究其抑藻機理,本研究以從LY03中提取的殺藻活性物質(zhì)為研究對象,探究中肋骨條藻在殺藻物質(zhì)脅迫下形態(tài)變化以及生理生化響應(yīng),主要研究結(jié)果如下:(1)LY03殺藻活性物質(zhì)作用時間短,且效果穩(wěn)定。殺藻活性物質(zhì)添加濃度為0.2μg/mL即可對藻細胞造成嚴重破壞,48h內(nèi)細胞密度為106/mL的中肋骨條藻幾乎全部死亡,這種低劑量、短時間達到明顯的溶藻效果,暗示其為一種具有潛在開發(fā)價值的溶藻物質(zhì)。(2)用掃描電子顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn),處理組藻細胞3h內(nèi)連接刺斷裂,分成單個細胞,之后細胞膜破裂,硅質(zhì)殼打開,內(nèi)容物流出。透射電子顯微鏡則可以看到葉綠體片層結(jié)構(gòu)遭到破壞,線粒體膜結(jié)構(gòu)逐漸破裂,最終只剩一個空殼。說明殺藻活性物質(zhì)對藻細胞損傷嚴重。(3)檢測藻細胞的葉綠素含量,發(fā)現(xiàn)在溶藻物質(zhì)加入期間,藻細胞的葉綠素含量一直下降。檢測藻細胞的最大光合效率和電子傳遞速率,相比對照組,處理組的含量都顯著下降。由此可見LY03殺藻活性物質(zhì)對藻細胞的光合系統(tǒng)造成嚴重影響,導(dǎo)致其無法進行光合作用。(4)在殺藻活性物質(zhì)脅迫下,藻細胞內(nèi)大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、糖類均顯著下降,脂肪酸種類變少,飽和脂肪酸含量升高。抗氧化系統(tǒng)反應(yīng)迅速,但是由于長期的氧化壓力,抗氧化系統(tǒng)崩潰無法清除過多的ROS,導(dǎo)致細胞內(nèi)物質(zhì)被氧化,MDA含量升高,細胞膜系統(tǒng)損傷,最后死亡。(5)用實時定量PCR檢測細胞內(nèi)光合基因的表達狀況,結(jié)果顯示,光合系統(tǒng)相關(guān)基因psbD和rcbS在3h時出現(xiàn)上調(diào),來以此抵御外界環(huán)境對藻細胞造成的影響。但是由于藻細胞受到的損傷太嚴重,已經(jīng)無法修復(fù)。最后藻細胞光合基因幾乎不表達,說明藻細胞光合系統(tǒng)崩潰,藻細胞已無法進行光合作用。
【學(xué)位授予單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：X55
【圖文】：

邐第三章結(jié)果與分析邐逡逑第三章結(jié)果與分析逡逑１．中肋骨條藻生長周期的測定逡逑對中肋骨條藻的生長周期進行測定，接種量為５％。如圖３．１所示，接種的逡逑第１天藻細胞就進入指數(shù)生長期，到１８天達到生長的穩(wěn)定期，細胞呈現(xiàn)下降的逡逑趨勢，細胞死亡數(shù)大于新生數(shù)。綜合考慮藻細胞的生長活性，選擇培養(yǎng)ｌ0ｄ的藻逡逑細胞作為研究對象。逡逑２逡逑

逡逑殺藻活性物質(zhì)的殺藻率。如圖３．３所示，殺藻活性物質(zhì)剛剛加入的時侯，就對藻逡逑細胞有抑制作用，但是低濃度處理組（０．１邋ｇｇ／ｍＬ）在１２邋ｈ后對藻的抑制較低，逡逑最終殺藻率在３０％左右，經(jīng)ＳＰＳＳ軟件計算得出殺藻活性物質(zhì)的半致死濃度為逡逑０．１２３邋ｇｇ／ｍＬ。高濃度處理組對藻細胞抑制強烈，４８邋ｈ殺藻率即可達到９０％以上。逡逑因０．２呢／ｍＬ終濃度就可以達到９０％以上殺藻率，以投放成木最低為原則，選擇逡逑０．２邋ｐｇ／ｍＬ作為本研究的活性物質(zhì)終濃度。逡逑ＣＫ邐０．１邋ｎｇ／ｍＬ邐０．２邋ｎｇ／ｍＬ邐０．４邋ｎｇ／ｍＬ逡逑圖３．２不同濃度殺藻活性物質(zhì)對

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本文編號：2737679