【摘要】：隨著經(jīng)濟的迅速發(fā)展,重金屬和擬除蟲菊酯類藥物對水體造成了極大的危害。重金屬不需要耗能就可以被有機體攝入,重金屬進入生物體后不會被排出體外,有機體會顯現(xiàn)出毒性累積的效應(yīng)。擬除蟲菊酯類藥物與有機磷、有機氯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥相比,具有高效、低毒、低殘留、易降解等特點而被廣泛應(yīng)用于害蟲防治及糧食貯藏等。溴氰菊酯是菊酯類藥物中毒性最強的一種,在水生生物魚的體內(nèi)缺乏擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的水解酶系統(tǒng),因此溴氰菊酯不能在魚體內(nèi)被水解。乙酰膽堿酯酶(AChE)在神經(jīng)傳導(dǎo)過程中有著關(guān)鍵的作用,且AChE活性作為生物標志物在水污染監(jiān)測中已被廣泛應(yīng)用。當(dāng)外界環(huán)境對有機體的生存產(chǎn)生危害時,生物的行為會發(fā)生改變,乙酰膽堿酯酶的變化和生物的行為之間可能存在著某種對應(yīng)的關(guān)系。此外,膽堿能受體在整個中樞神經(jīng)系統(tǒng)中存在著差異性表達。本文分別測定了氯化鎘和溴氰菊酯對受試生物斑馬魚的48h半數(shù)致死濃度,并以此作為一個毒性單位,即1.0 TU,以對兩種污染物對斑馬魚產(chǎn)生的毒性效應(yīng)進行統(tǒng)一。設(shè)置濃度梯度,連續(xù)藥物暴露下檢測了氯化鎘和溴氰菊酯對斑馬魚肝臟AChE變化的影響。對不同組織(肌肉、肝臟、鰓、和腦)中AChE受抑制的時間差異進行了相關(guān)的分析,對污染物暴露下毒蕈堿受體(M3a受體)表達量的變化進行了研究,旨在從多方面對斑馬魚外在行為響應(yīng)的內(nèi)在作用機制進行多方面合理的解釋,研究結(jié)果表明:(1)CdCl_2和DM對斑馬魚的48 h半數(shù)致死濃度(LC_(50)-48h)分別為42.60 mg/L和5.20μg/L,DM對斑馬魚是劇毒類藥物,CdCl_2對斑馬魚來說是高毒類藥物,由此可以看出不同污染物對斑馬魚的毒性效應(yīng)有所不同。斑馬魚在CdCl_2和DM環(huán)境中的耐受程度也有所差異,這可能是由作用機制不同而導(dǎo)致的。(2)各濃度組DM、CdCl_2,48 h各濃度組連續(xù)暴露下,肝臟AChE活性整體呈現(xiàn)出control0.1 TU1.0 TU2.0 TU的變化,實驗組肝臟的AChE活性相對于對照組均存在極顯著的差異,顯示了良好的劑量--效應(yīng)關(guān)系。在48 h,DM連續(xù)暴露下,1.0 TU和2.0 TU組肝臟AChE活性都于0.5 h處迅速下降,說明了DM在暴露開始階段就對斑馬魚產(chǎn)生了毒性效應(yīng)。1 h后不同濃度組開始有了不同的變化。0.1 TU和2.0 TU組肝臟的AChE在DM暴露4 h后出現(xiàn)了極值點,隨后出現(xiàn)逐漸下降的趨勢,1.0 TU濃度組的相對酶活極值點于暴露后8 h左右出現(xiàn)。在CdCl_2,48h連續(xù)暴露下,0.1 TU、1.0 TU和2.0 TU組肝臟AChE酶活都在1 h內(nèi)迅速下降且在1 h左右出現(xiàn)了下降再上升的拐點,說明了CdCl_2在暴露早期階段就對斑馬魚產(chǎn)生了毒性效應(yīng)。1 h后開始有了不同的變化,0.1 TU在暴露8h左右上升到一個極值點而1.0 TU和2.0 TU的極值點則出現(xiàn)在2 h左右。這可能是由于在外界環(huán)境對斑馬魚產(chǎn)生毒性效應(yīng)時,生物體為適應(yīng)脅迫所作出的調(diào)整和適應(yīng)。兩種藥物暴露下,斑馬魚肝臟AChE活性的變化總體都呈現(xiàn)出大致的下降-上升-再下降的趨勢,這與SBRM是吻合的。(3)在DM暴露下,肝臟和肌肉的AChE較晚受到抑制。斑馬魚不同組織AChE受抑制的時間差異性在0.1 TU組中表明:在CdCl_2和DM暴露下,腦組織AChE首先被藥物抑制,其次是鰓,肌肉和肝臟(腦鰓肌肉肝臟),高濃度組(1.0 TU、2.0 TU)中斑馬魚不同組織AChE活性的抑制順序幾乎同步,同時,較高的環(huán)境壓力會引起更快的AChE活性受到抑制。(4)在所有時間點中,腦組織M3a的相對表達量都最高,鰓組織M3a的相對表達量都最低。在0.1 TU-DM暴露下,有5個時間點M3a的相對表達量順序依次為腦肌肉肝臟鰓,肌肉比肝臟M3a的相對表達量高;有11個時間點M3a的相對表達量順序為腦肝臟肌肉鰓,肝臟比肌肉M3a的相對表達量高;在10%地表水-DM暴露下,有7個時間點M3a的相對表達量順序依次為腦肌肉肝臟鰓,肌肉比肝臟M3a的相對表達量高;有9個時間點M3a的相對表達量順序為腦肝臟肌肉鰓,肝臟比肌肉M3a的相對表達量高。
【圖文】：

山東師范大學(xué)碩士學(xué)位論文嚴重。劉曉宇等人[45]發(fā)現(xiàn)不僅不同藥物對鯽魚 AChE 的影響不hE 的活性也不相同。受體中主要包括囊泡狀乙酰膽堿轉(zhuǎn)運體、乙酰膽堿、高親和力膽堿膽堿、膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶、煙堿型乙酰膽堿受體和膽堿能受體等神經(jīng)遞質(zhì)，廣泛分布于動物的外周神經(jīng)系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、統(tǒng)等。膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶以膽堿和乙酰輔酶 A 為底物合成乙酰膽會通過乙酰膽堿酯酶水解成乙酸和膽堿，，保證神經(jīng)沖動正常傳

圖 1-2 成年斑馬魚（左上角為雌性，右下角為雄性）1-2 Adult zebra fish (Top left corner is female, lower right corner is 養(yǎng)條件由武漢中國斑馬魚資源中心提供，實驗室斑馬魚養(yǎng)殖系統(tǒng)由實驗室飼養(yǎng) 3 代以上，溫度設(shè)定在 26 ± 2℃，光照設(shè)定璃缸上方約 30 cm 處設(shè)定 3000--4500 lx 照明，于每天上魚代謝產(chǎn)物及排泄物每天兩次定期清理。實驗過程中隨喂食。成年斑馬魚的體重為 0.30±0.05 g，長度為隨機
【學(xué)位授予單位】：山東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：X171.5

【參考文獻】

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1 熊江紅;張影;黃振玉;鄒華鋒;呂為群;;斑馬魚M3受體基因克隆、序列分析及表達分布[J];生物技術(shù);2014年03期

2 閆海燕;曾令兵;羅宇良;潘鏡;張婷;;氰戊菊酯對鯉SOD活性和MDA含量以及肝腎細胞形態(tài)的影響[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2012年04期

3 武煥陽;OSCAR Ortegon;許莉佳;靳濤;彭開琴;丁詩華;李云;;硫丹對草魚乙酰膽堿酯酶及抗氧化酶活性的影響[J];生態(tài)環(huán)境學(xué)報;2011年10期

4 王凱;;生命科學(xué)研究中常用模式生物[J];生命科學(xué)研究;2010年02期

5 王孝平;邢樹禮;;考馬斯亮藍法測定蛋白含量的研究[J];天津化工;2009年03期

6 李志偉;梁丹;張建夫;;氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留分析方法的研究進展[J];華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報;2008年05期

7 韓耀宗;朱國念;廖曉蘭;陸小磊;金紹強;;擬除蟲菊酯農(nóng)藥的毒性研究綜述[J];世界農(nóng)藥;2008年03期

8 任宗明;饒凱鋒;王子健;;水質(zhì)安全在線生物預(yù)警技術(shù)及研究進展[J];供水技術(shù);2008年01期

9 劉曉宇;王斌;吳謀成;楊健;徐盈;;鯽魚肝臟AChE的提取及有機磷農(nóng)藥對AChE的抑制效應(yīng)研究[J];食品科學(xué);2007年04期

10 劉廷鳳;楊敏娜;劉亞子;顧穎;孫成;;菊酯類農(nóng)藥酶聯(lián)免疫吸附測定研究進展[J];環(huán)境科學(xué)與技術(shù);2006年04期

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3 曾陽;神經(jīng)抑制污染物連續(xù)暴露下大型n灒―aphnia magna）外在行為響應(yīng)及內(nèi)在機制研究[D];山東師范大學(xué);2012年

4 劉香江;重金屬銅和鎘(Cu和Cd)及乙酰甲胺磷對矛尾復(fù)蝦虎魚毒性效應(yīng)的研究[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

5 柴菁;敵敵畏和氟氯氰菊酯對草魚的毒性效應(yīng)的研究[D];西南大學(xué);2009年

6 王彥美;殺蟲劑對魚生理活性的影響[D];山東師范大學(xué);2008年

7 胡瓊予;溴氰菊酯對鯽的毒性作用研究及殘留檢測[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

8 王媛;氯氰菊酯對魚類的分子毒理效應(yīng)研究[D];華中師范大學(xué);2006年

本文編號：2670805