本文關鍵詞：跑臺運動對老齡大鼠腓腸肌線粒體Sirt3的影響

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【摘要】：衰老會導致骨骼肌結構與功能的退化,大多數(shù)研究認為這是與骨骼肌細胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的增齡性聚積密切相關。而去乙�；�3(Sirtuin3,Sirt3)則是定位于細胞線粒體中的與細胞能量代謝、氧化應激都息息相關的去乙�；饔妹�,且被證明與長壽相關。近期研究發(fā)現(xiàn),Sirt3作為過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔助活化因子1α(peroxisome proliferators activated receptor-gamma coactivator 1α,PGC-1α)的下游靶基因,可通過介導后者對細胞活性氧ROS的生成與線粒體生物合成產(chǎn)生影響。運動作為重要的緩解增齡性骨骼肌萎縮的干預手段,近年來研究很多,對其具體的作用機制也是眾說紛紜,本研究旨在通過實驗測定運動對衰老大鼠腓腸肌Sirt3和PGC-1α蛋白含量的影響,探討運動緩解骨骼肌增齡性萎縮的分子機制。研究方法:20只12月齡雄性SD大鼠隨機分為對照組(CG)和運動組(EG),每組10只。運動組大鼠進行為期4周的跑臺運動,每周訓練6天,跑臺速度為15m/min,正式實驗第一周每天訓練30min,此后每周遞增5min,跑臺坡度為5。四周跑臺運動結束24h后取大鼠腓腸肌外側頭相同位置。采用光學顯微鏡觀察大鼠腓腸肌橫切片并測量腓腸肌細胞橫截面積百分比;紫外分光光度計法檢測大鼠腓腸肌細胞內錳超氧化物歧化酶(Mn SOD)、丙二醛(MDA)含量;ELISA法測定8羥基脫氧鳥苷(8OHd G)含量;Western Blot法檢測大鼠腓腸肌細胞內Sirt3和PGC-1α蛋白含量變化。研究結果:(1)腓腸肌橫切切片觀察:可觀察到對照組大鼠腓腸肌細胞呈現(xiàn)松散、不規(guī)則排列等特點,細胞核明顯增多、變大且有內移趨勢;而運動組大鼠腓腸肌細胞排列較為整齊、規(guī)則,細胞核皆位于細胞邊緣,且能觀察到骨骼肌細胞由多角形向圓形變化的趨勢;腓腸肌細胞橫截面積所占切片面積百分比對照組低于運動組。(2)腓腸肌細胞氧化應激指標:運動組大鼠腓腸肌細胞Mn-SOD活性高于對照組大鼠腓腸肌細胞的Mn-SOD活性(P0.01);運動組大鼠腓腸肌細胞MDA含量低于對照組大鼠腓腸肌細胞的MDA含量(P0.05);運動組大鼠腓腸肌細胞8-OHd G含量低于對照組大鼠腓腸肌細胞的8-OHd G含量(P0.01)。(3)腓腸肌細胞Sirt3和PGC-1α蛋白含量:運動組大鼠腓腸肌細胞Sirt3蛋白含量高IV于對照組大鼠腓腸肌細胞的Sirt3蛋白含量(P0.01);運動組大鼠腓腸肌細胞PGC1-α蛋白含量高于對照組大鼠腓腸肌細胞的PGC1-α蛋白含量(P0.01)。結論:(1)跑臺運動使大鼠腓腸肌Sirt3蛋白表達提高。(2)跑臺運動使大鼠腓腸肌Mn-SOD活性提高,降低了MDA和8-OHd G含量,說明運動干預降低了大鼠腓腸肌細胞的氧化損傷。(3)跑臺運動使大鼠腓腸肌PGC-1α蛋白表達提高。
【關鍵詞】：Sirt3 骨骼肌 運動 衰老 ROS
【學位授予單位】：河北師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：G804.2
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-11
• 1 文獻綜述11-19
• 1.1 骨骼肌增齡性萎縮11-13
• 1.1.1 衰老線粒體理論11
• 1.1.2 骨骼肌增齡性萎縮11-12
• 1.1.3 影響骨骼肌增齡性萎縮的因素12-13
• 1.2 去乙�；� 313-16
• 1.2.1 去乙�；� 313-14
• 1.2.2 Sirt 3 的作用14
• 1.2.3 Sirt3 的影響因素14-15
• 1.2.4 Sirt3 與PGC-1α15-16
• 1.3 運動與骨骼肌增齡性萎縮16-18
• 1.3.1 運動延緩骨骼肌增齡性萎縮的機制16-17
• 1.3.2 運動通過PGC-1α—Sirt3 通路延緩骨骼肌增齡性萎縮的相關研究17-18
• 1.4 運動—Sirt3 調控通路18-19
• 2 對象與方法19-21
• 2.1 實驗動物與分組19
• 2.1.1 實驗動物19
• 2.1.2 實驗動物飼養(yǎng)19
• 2.1.3 實驗動物分組19
• 2.2 動物實驗19-20
• 2.3 取材20
• 2.4 指標測定20
• 2.4.1 腓腸肌切片20
• 2.4.2 大鼠腓腸肌細胞橫截面積百分比20
• 2.4.3 氧化應激指標的測定20
• 2.4.4 Sirt3 與PGC-1α 蛋白含量的測定20
• 2.5 數(shù)據(jù)分析20-21
• 3 研究結果21-24
• 3.1 大鼠體重變化情況21
• 3.2 大鼠腓腸肌切片21-22
• 3.3 大鼠腓腸肌細胞橫截面積統(tǒng)計22
• 3.4 腓腸肌細胞Mn-SOD、MDA、8-OHdG結果統(tǒng)計22-23
• 3.5 Sirt3 與PGC-1α 蛋白結果23-24
• 4 討論24-29
• 4.1 運動對老年大鼠腓腸肌細胞形態(tài)學的影響24-25
• 4.1.1 老年大鼠腓腸肌細胞形態(tài)學的變化24
• 4.1.2 老年大鼠腓腸肌細胞橫截面積的變化24-25
• 4.2 運動對大鼠腓腸肌細胞Sirt3 和PGC-1α 蛋白含量的影響25-26
• 4.3 運動對腓腸肌細胞氧化應激指標的影響26-29
• 4.3.1 運動對腓腸肌細胞Mn-SOD活性的影響26
• 4.3.2 運動對腓腸肌細胞MDA含量的影響26-27
• 4.3.3 運動對腓腸肌細胞 8-OHdG含量的影響27-29
• 結論29-30
• 參考文獻30-37
• 縮略詞表37-38
• 致謝38-39
• 攻讀學位期間取得的科研成果清單39

【參考文獻】

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本文編號：704250