本文關(guān)鍵詞：耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠海馬自噬信號(hào)通路的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究目的：觀察長(zhǎng)期耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及海馬自噬信號(hào)通路的影響,探討自噬激活與運(yùn)動(dòng)改善老齡腦學(xué)習(xí)記憶能力之間的關(guān)系,為實(shí)現(xiàn)健康衰老和成功腦衰老提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法：40只18月齡健康雄性Sprague Dawley (SD)大鼠,隨機(jī)分為老齡對(duì)照(OC)組,老齡運(yùn)動(dòng)(OS)組,老齡運(yùn)動(dòng)+生理鹽水(OS+saline)組,老齡運(yùn)動(dòng)+氯喹(OS+CQ)組；另有3月齡SD大鼠作為青年對(duì)照(YC)組。OS、OS+saline、OS+CQ組大鼠進(jìn)行為期9周的耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練。末次訓(xùn)練結(jié)束后48h,所有大鼠進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn),檢測(cè)學(xué)習(xí)記憶能力。蛋白免疫印跡(Western blot)法測(cè)定海馬組織中自噬相關(guān)蛋白LC3、p62、Atg5、Atg7的表達(dá)；免疫組織化學(xué)法觀察LC3、p62在海馬組織中的定位和分布。研究結(jié)果：1、Morris水迷宮顯示：(1)各組大鼠定位航行實(shí)驗(yàn)中逃避潛伏期時(shí)間結(jié)果對(duì)比經(jīng)過(guò)3天的定位航行實(shí)驗(yàn),各組大鼠逃避潛伏期時(shí)間逐漸減少。在水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)中,與YC組大鼠相比,OC組大鼠逃避潛伏期時(shí)間顯著高于YC組大鼠(P0.05)；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組、OS+CQ組大鼠逃避潛伏期時(shí)間顯著減少,(P0.01)；與OS+saline組相比,OS+CQ組大鼠逃避潛伏期時(shí)間顯著增多(P0.05)。(2)各組大鼠在定位航行實(shí)驗(yàn)中路程結(jié)果對(duì)比各組大鼠經(jīng)過(guò)3天的定向航行實(shí)驗(yàn)后,總路程呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)。在定位航行實(shí)驗(yàn)的第1天,各組大鼠總路程無(wú)顯著性差異。第2、3天,與YC組相比,OC組、OS+CQ組大鼠在定位航行實(shí)驗(yàn)中總路程顯著增多(P0.01,P0.01)；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組和OS+CQ組大鼠總路程出現(xiàn)顯著減少(P0.01)；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠總路程在第3天顯著增多(P0.01)(3)空間探索實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)象限率結(jié)果對(duì)比定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后24h進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn),結(jié)果顯示,與YC組相比,OC組與OS+CQ組大鼠經(jīng)過(guò)目標(biāo)象限的正確率下降(P0.01)；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組和OS+CQ組大鼠經(jīng)過(guò)目標(biāo)象限的正確率顯著增加(P0.01)；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠經(jīng)過(guò)目標(biāo)象限的正確率顯著下降(P0.01)。2、Western blot顯示：(1)各組大鼠海馬LC3的表達(dá)與YC組相比,OC組與OS+CQ組大鼠海馬中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值顯著增加(P0.01)；與OC組大鼠相比,OS組與OS+saline組大鼠LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值顯著降低(P0.01)；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值顯著升高(P0.01)。(2)各組大鼠海馬p62的表達(dá)與YC組大鼠相比,OC組、OS組、OS+saline組、OS+CQ組大鼠海馬中p62的表達(dá)顯著升高(P0.01)；與OC組大鼠相比,OS組與OS+saline組大鼠海馬中p62的表達(dá)顯著下降(P0.01)；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠海馬中p62的表達(dá)顯著升高P0.01)。(3)各組大鼠海馬Atg5的表達(dá)與YC組大鼠相比,OC組、OS組、OS+saline組大鼠海馬中Atg5的表達(dá)顯著下降(P0.01)；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組、OS+CQ組大鼠海馬中Atg5的表達(dá)顯著升(P0.01)；與OS +saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠海馬中Atg5的表達(dá)顯著升高(P0.01)(4)各組大鼠海馬Atg7的表達(dá)與YC組大鼠相比,OC組、OS組、OS+saline組大鼠海馬中Atg7的表達(dá)顯著下降(P0.01,P0.05,P0.05)；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組、OS+CQ組大鼠海馬中Atg7的表達(dá)顯著升高(P0.05,P0.05,P0.01)；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠海馬中Atg7的表達(dá)顯著升高(P0.01)。3免疫組化結(jié)果(1)各組大鼠海馬LC3免疫熒光表達(dá)通過(guò)與NeuN共染,共聚焦顯微鏡結(jié)果顯示,LC3與NeuN存在共定位,提示在大鼠神經(jīng)元內(nèi)存在LC3陽(yáng)性顆粒表達(dá)。與YC組大鼠相比,OC組、OS組、OS+saline組和OS+CQ組大鼠海馬LC3陽(yáng)性自噬顆粒聚集數(shù)量顯著升高；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組、OS+CQ組大鼠海馬LC3陽(yáng)性自噬顆粒聚集數(shù)量顯著下降；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠海馬LC3陽(yáng)性自噬顆粒聚集數(shù)量顯著下降。(2)各組大鼠海馬p62免疫熒光表達(dá)共聚焦顯微鏡觀察顯示：p62蛋白在海馬中呈點(diǎn)狀聚集,且p62和NeuN存在共定位。與YC組大鼠相比,OC組、OS組、OS+saline組和OS+CQ組大鼠海馬p62蛋白表達(dá)數(shù)量顯著升高；與OC組大鼠相比,OS組、OS+saline組、OS+CQ組大鼠海馬p62蛋白表達(dá)數(shù)量顯著下降；與OS+saline組大鼠相比,OS+CQ組大鼠海馬p62蛋白表達(dá)數(shù)量顯著下降。研究結(jié)論：1、長(zhǎng)期耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練改善了老齡大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。2、自噬(溶酶體)抑制劑部分取消了運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡大鼠認(rèn)知功能的改善作用。3、長(zhǎng)期耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練激活了老齡大鼠海馬自噬信號(hào)通路,自噬(溶酶體)抑制劑部分取消了運(yùn)動(dòng)對(duì)自噬的激活效應(yīng)。4、運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的改善可能與自噬激活有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：老齡 學(xué)習(xí)記憶 耐力運(yùn)動(dòng) 自噬
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：G808.1
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-14
• 1 序言14-26
• 1.1 選題依據(jù)和意義14-16
• 1.2 文獻(xiàn)綜述16-24
• 1.2.1 運(yùn)動(dòng)對(duì)老齡腦的神經(jīng)保護(hù)作用和機(jī)制16-20
• 1.2.2 自噬與衰老20-24
• 1.2.3 運(yùn)動(dòng)能增強(qiáng)自噬活性,延緩衰老24
• 1.3 本研究關(guān)注的問(wèn)題和研究設(shè)想24-26
• 2 實(shí)驗(yàn)材料與方法26-30
• 2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組26
• 2.2 動(dòng)物訓(xùn)練方案26
• 2.3 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)26-27
• 2.4 免疫組織化學(xué)法27
• 2.4.1 灌流切片27
• 2.4.2 免疫組化27
• 2.5 免疫蛋白印跡實(shí)驗(yàn)27-28
• 2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析28
• 2.7 實(shí)驗(yàn)主要儀器和試劑28-30
• 2.7.1 主要儀器28-29
• 2.7.2 主要試劑29-30
• 3 結(jié)果30-43
• 3.1 各組大鼠體重變化情況30
• 3.2 各組大鼠力竭時(shí)間結(jié)果比較30-31
• 3.3 各組大鼠心臟重量指數(shù)的對(duì)比31-32
• 3.4 各組大鼠肌肉重量指數(shù)的對(duì)比32
• 3.5 各組大鼠Morris水迷宮測(cè)試結(jié)果32-37
• 3.5.1 各組大鼠定位航行實(shí)驗(yàn)中逃避潛伏期時(shí)間結(jié)果對(duì)比32-34
• 3.5.2 各組大鼠在定位航行實(shí)驗(yàn)中路程結(jié)果對(duì)比34-36
• 3.5.3 空間探索實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)象限率結(jié)果對(duì)比36-37
• 3.6 Western blot檢測(cè)海馬區(qū)自噬相關(guān)蛋白表達(dá)37-40
• 3.6.1 Western blot檢測(cè)各組大鼠海馬LC3的表達(dá)37-38
• 3.6.2 Western blot檢測(cè)各組大鼠海馬p62的表達(dá)38-39
• 3.6.3 Western blot檢測(cè)各組大鼠海馬Atg5的表達(dá)39
• 3.6.4 Western blot檢測(cè)各組大鼠海馬Atg7的表達(dá)39-40
• 3.7 免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組大鼠海馬區(qū)LC3、P62表達(dá)40-43
• 3.7.1 各組大鼠海馬區(qū)LC3免疫熒光表達(dá)40-41
• 3.7.2 各組大鼠海馬區(qū)P62免疫熒光表達(dá)41-43
• 4 分析與討論43-48
• 4.1 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠耐力的影響43-44
• 4.1.1 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練延長(zhǎng)了老齡大鼠力竭時(shí)間43
• 4.1.2 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練提高老年大鼠心臟/體重指數(shù)43-44
• 4.1.3 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練提高衰老大鼠肌肉重量指數(shù)44
• 4.2 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響44-45
• 4.3 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠海馬自噬信號(hào)通路的影響45-46
• 4.4 耐力運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)老齡大鼠學(xué)習(xí)記憶的改善與自噬激活有關(guān)46-48
• 5 結(jié)論48-49
• 6 參考文獻(xiàn)49-62
• 7 攻讀碩士期間完成的論文和參加的學(xué)術(shù)會(huì)議62-63
• 8 致謝63

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