背景:糖尿病視網(wǎng)膜病變（diabetic retinopathy,DR）是臨床常見(jiàn)的糖尿病并發(fā)癥,也是世界衛(wèi)生組織公布的視力損害、致盲的7大原因病因之一。DR以微血管病變作為最常見(jiàn)病理特點(diǎn),以視網(wǎng)膜新生血管的形成作為發(fā)病的節(jié)點(diǎn)。DR嚴(yán)重時(shí),臨床可見(jiàn)玻璃體出血、視網(wǎng)膜脫離以及嚴(yán)重的視力損害,病程繼續(xù)進(jìn)展,甚至導(dǎo)致患者的視力完全喪失。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因（vascular endothelial growth factor,VEGF）是參與DR發(fā)病節(jié)點(diǎn)的重要因子,參與新生血管的形成,而Akt又是維持VEGF長(zhǎng)期上調(diào)的重要上游因子。所以在臨床上抑制Akt/VEGF通路蛋白的表達(dá)為治療糖尿病新生血管的重要思路。臨床DR發(fā)病隱匿,當(dāng)患者發(fā)生明顯視力障礙時(shí),才會(huì)選擇就醫(yī),失去治療疾病的最佳時(shí)機(jī),故本病重在預(yù)防和及時(shí)治療,運(yùn)動(dòng)作為預(yù)防和治療糖尿病的有效的輔助手段,可以有效降低糖耐量的受損程度,表明運(yùn)動(dòng)可以改善胰島素抵抗。目的:探究游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)糖尿病模型鼠的糖耐量血糖變化曲線(xiàn)及視網(wǎng)膜Akt/VEGF信號(hào)通路各蛋白表達(dá)水平的影響,旨在研究游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)抑制DR的相關(guān)機(jī)制,為臨床預(yù)防及治療DR提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將o... 

【文章來(lái)源】：成都體育學(xué)院四川省

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

PI3K/Akt/VEGF通路示意圖

16小鼠分籠飼養(yǎng)，5只一籠，共同飼養(yǎng)于成都體育學(xué)院SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房獨(dú)立通氣鼠箱中，溫度23-25℃，濕度40～70%，不限制飲食和飲水，晝夜循環(huán)（12/12h），每周更換兩次墊料。剪掉趾標(biāo)記，如圖1所示，分別將BTBRob/ob小鼠、C57BL/6J小鼠進(jìn)行隨機(jī)編號(hào)，編號(hào)為1，2，3……10。小鼠自購(gòu)買(mǎi)至實(shí)驗(yàn)室后，記錄原始體重及血糖，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周。圖2小鼠剪掉趾標(biāo)記示意圖3.4.2實(shí)驗(yàn)試劑、儀器及耗材3.4.2.1主要試劑水合氯醛山東西亞化學(xué)工業(yè)有限公司多聚甲醛，RIPA裂解液(強(qiáng))，SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)，30%Acr-Bis(29:1)，1.5MTris-HCl,pH8.8，SDS北京蘭杰柯科技有限公司氯化鈉福晨（天津）化學(xué)試劑有限公司鹽酸四川西隴科學(xué)有限公司脫脂奶粉安佳甲醇成都科隆化學(xué)品有限公司TEMED，過(guò)硫酸銨合肥博美生物科技有限責(zé)任公司甘氨酸，Tris，Tween20德國(guó)BioFROXX公司PMSF(100mM)上海碧云天生物技術(shù)有限公司PageRulerPrestainedProteinLadder(26616)美國(guó)ThermoFisherScientific公司兔抗鼠多克隆抗體PI3K、Akt1、VEGF內(nèi)參鼠抗、兔抗上海三愛(ài)思試劑有限公司SuperLumiaECLPlusHRPSubstrateKitSolutionA，SuperLumiaECLPlusHRPSubstrateKitSolutionB美國(guó)Abbkine公司3.4.2.2主要儀器恒溫器創(chuàng)寧（ChuangNing）MILLI-Q密理博超純水儀德國(guó)MILLI-Q公司-80℃低溫冰箱青島海爾股份有限公司4℃/-20℃冰箱青島海爾股份有限公司

22注：*表示與前一組之間P<0.05，△表示與第一組之間P<0.05，▲表示與第二組之間P<0.05。小鼠IGTT血糖變化曲線(xiàn)特征見(jiàn)圖3，正式游泳運(yùn)動(dòng)17周后，游泳組小鼠（包括糖尿病ob/ob小鼠和非糖尿病C57小鼠）的葡萄糖峰值為15min；非游泳組小鼠（包括糖尿病ob/ob小鼠和非糖尿病C57小鼠）的葡萄糖峰值為30min。圖3游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)小鼠IGTT葡萄糖曲線(xiàn)特征的影響4.1.2游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)體重的影響游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)各組體重的影響見(jiàn)表4，正式運(yùn)動(dòng)第17周，糖尿病ob/ob小鼠和非糖尿病C57小鼠兩組之間的體重差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。表3正式運(yùn)動(dòng)第17周各組小鼠體重分組體重（g）第2周第17周C57（非游泳）13.12±0.4326.83±1.96C57（游泳）13.3±0.5426.04±2.14ob（非游泳）16.74±1.26△▲52.34±1.14△▲ob（游泳）16.60±0.61△▲51.96±1.83△▲注：*表示與前一組之間P<0.05，△表示與第一組之間P<0.05，▲表示與第二組之間P<0.05。4.1.3游泳運(yùn)動(dòng)對(duì)VEGF、Akt蛋白表達(dá)的影響各小鼠視網(wǎng)膜Akt蛋白表達(dá)量如圖4，小鼠視網(wǎng)膜Akt、VEGF蛋白相對(duì)表達(dá)量如圖5，結(jié)果表明ob非游泳組視網(wǎng)膜Akt、VEGF蛋白表達(dá)量明顯高于ob游泳組。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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本文編號(hào)：3432849