研究目的肌衛(wèi)星細(xì)胞和成肌細(xì)胞增殖與分化在骨骼肌肥大中發(fā)揮重要作用,對(duì)肌衛(wèi)星細(xì)胞/成肌細(xì)胞體外施加周期性機(jī)械牽拉常被用于模擬運(yùn)動(dòng)對(duì)骨骼肌肥大的研究。我們前期的研究發(fā)現(xiàn),雄激素受體（androgen receptor,AR）在15%牽拉促進(jìn)、20%牽拉抑制C2C12成肌細(xì)胞增殖中可能起重要作用。本文在前期研究的基礎(chǔ)上,先用AR特異性拮抗劑氟他胺證實(shí)AR在牽拉調(diào)控C2C12細(xì)胞增殖中的作用。然后比較15%和20%牽拉對(duì)L6（無(wú)AR表達(dá)）和C2C12（有AR表達(dá)）成肌細(xì)胞增殖調(diào)控的差異,并用AR過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染L6細(xì)胞來(lái)證實(shí)AR在15%和20%牽拉調(diào)控成肌細(xì)胞增殖中的作用。已證實(shí)AR對(duì)肌肉蛋白質(zhì)合成的促進(jìn)作用與其激活胰島素樣生長(zhǎng)因子-1（IGF-1）/IGF-1受體（IGF-1R）-磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）和絲裂原活化蛋白激酶（MAPKs）密切相關(guān),但AR在運(yùn)動(dòng)或牽拉調(diào)控成肌細(xì)胞增殖中的作用是否也與上述信號(hào)通路有關(guān)仍不明確。因此,本研究利用IGF-1中和性抗體、IGF-1重組多肽,以及PI3K/Akt和MAPKs（p38和ERK1/2）抑制劑,研究AR在牽拉調(diào)控成肌細(xì)胞增... 

【文章來(lái)源】：上海體育學(xué)院上海市

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

PCR擴(kuò)增結(jié)果

圖 1-2 PCR 鑒定結(jié)果Figure 1-2 The result of PCR identifica3.7 AR 過表達(dá)質(zhì)粒小量抽提將測(cè)序正確的菌液轉(zhuǎn)接于 10 ml 含細(xì)菌搖床培養(yǎng)過夜，用天根無(wú)內(nèi)毒素質(zhì)粒提，詳細(xì)操作步驟如下：（1）向吸附柱（吸附柱放入收集管內(nèi)）心 1 min，倒掉收集管內(nèi)液體，吸（2） 收集過夜培養(yǎng)的菌液至 1.5 ml 離min，盡量吸除上清（菌液較多時(shí)離心管內(nèi)）；（3）加入 250 μl 溶液 P1（預(yù)先加入 R細(xì)菌沉淀懸浮均勻；

受體在周期性機(jī)械牽拉調(diào)控成肌細(xì)胞增殖與分化中的作用和機(jī)M）的 AR 特異性拮抗劑氟他胺 Flutamide 阻斷 AR 的作機(jī)械牽拉對(duì) C2C12 成肌細(xì)胞增殖的影響，以期證實(shí) AR果發(fā)現(xiàn)，氟他胺以劑量依賴的方式阻斷 15%周期性機(jī)械胞的促增殖作用（圖 1-3），證實(shí)了 AR 在 15%周期性機(jī)細(xì)胞增殖中的重要作用。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雄激素受體在抗阻和耐力訓(xùn)練提高大鼠運(yùn)動(dòng)能力中的作用[J]. 林小晶,魯林,王曉慧.  中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志. 2018(07)
[2]AR阻斷劑對(duì)運(yùn)動(dòng)骨骼肌mTOR信號(hào)通路的影響[J]. 李荀,李俊濤,曾凡星.  中國(guó)運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志. 2015(02)
[3]AR阻斷劑對(duì)運(yùn)動(dòng)骨骼肌ERK1/2信號(hào)通路的影響[J]. 李荀,曾凡星,吳迎.  北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2015(02)
[4]不同強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠骨骼肌蛋白合成信號(hào)影響的研究[J]. 趙華,曾凡星,王寧琦.  北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2014(12)
[5]干擾Sirt2促進(jìn)C2C12成肌細(xì)胞分化[J]. 吳國(guó)芳,路宏朝,賈龍,宋成創(chuàng),史新娥,楊公社,孫世鐸.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2014(07)
[6]PI3K/AKT信號(hào)通路調(diào)控Myogenin和MCK基因的表達(dá)[J]. 李晶,張?jiān)粕?李寧,胡曉湘,石國(guó)慶,劉守仁,柳楠.  遺傳. 2013(05)
[7]胰島素通過PI3K/Akt和MEK/ERK信號(hào)通路增強(qiáng)大鼠骨骼肌成肌細(xì)胞的增殖[J]. 于歡,張敏,趙勇,吳萍,陳培良,李衛(wèi)東.  生理學(xué)報(bào). 2013(01)
[8]p38絲裂素活化蛋白激酶信號(hào)通路在應(yīng)力調(diào)控成肌細(xì)胞分化中的作用[J]. 李菲菲,閻瀟,王慶,曲竹麗,袁曉,郭杰.  華西口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2012(06)
[9]運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠肝、比目魚肌和腓腸肌雄激素受體表達(dá)的影響[J]. 王曉慧,曲靜,MABOUNDA KOUNGA P.R..  上海體育學(xué)院學(xué)報(bào). 2012(02)
[10]耐力訓(xùn)練與中藥干預(yù)對(duì)大鼠骨骼肌雄激素受體表達(dá)的影響[J]. 王啟榮,喬莉,周麗麗,高紅,許葆華,楊則宜.  北京體育大學(xué)學(xué)報(bào). 2009(12)

碩士論文
[1]雄激素受體在抗阻和耐力訓(xùn)練提高大鼠運(yùn)動(dòng)能力中的作用及機(jī)制[D]. 魯林.上海體育學(xué)院 2017



本文編號(hào)：3262837