目的:探究自由轉(zhuǎn)輪運動對miR-130a介導(dǎo)的細胞自噬在大鼠腦衰老進程中的調(diào)控作用。方法:1.動物實驗:采用體重為160±20g的SPF級雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只。其中選取10周齡大鼠20只,隨機分為衰老對照組（OC）和衰老自由轉(zhuǎn)輪組（OVR）,每組10只。實驗進行前,所有大鼠進行2周的適應(yīng)性喂養(yǎng)后,將OC組與OVR組飼養(yǎng)至21月齡構(gòu)建自然衰老模型。然后將OVR組大鼠放入自由轉(zhuǎn)輪籠內(nèi)飼養(yǎng)8周至23月齡,OC組大鼠自然飼養(yǎng)至23月齡,不做干預(yù)處理。自由轉(zhuǎn)輪運動干預(yù)后,另取10只3月齡大鼠作為年輕對照組（YC）,并將所有大鼠眼球取血后斷頸處死,冰上分離其海馬與大腦皮層組織并立即放入-80℃冰箱保存。采用Real-time-PCR檢測海馬組織內(nèi)miRNA的變化;TUNEL染色評價海馬內(nèi)細胞凋亡水平;透射電鏡觀察海馬中自噬小體變化;Western blot檢測海馬內(nèi)衰老相關(guān)蛋白的表達來驗證其衰老程度,檢測自噬與凋亡相關(guān)蛋白的變化來評估自噬與凋亡的水平。2.細胞實驗:培養(yǎng)神經(jīng)母細胞瘤細胞（SH-SY5Y）細胞,在細胞融合度達到70%左右接種6孔板。分為對照組（Con）、... 

【文章來源】：武漢體育學(xué)院湖北省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
1.前言
2.文獻綜述
    2.1 衰老及其相關(guān)疾病
        2.1.1 衰老的概念
        2.1.2 衰老與神經(jīng)退行性疾病
    2.2 細胞自噬與衰老
        2.2.1 細胞自噬
        2.2.2 自噬的通路調(diào)控
        2.2.3 自噬與衰老的關(guān)系
    2.3 細胞凋亡與衰老
    2.4 miRNA與衰老
    2.5 運動與衰老
    2.6 小結(jié)
3.實驗對象以及實驗方法
    3.1 自由轉(zhuǎn)輪運動對自然衰老大鼠腦衰老的影響
        3.1.1 實驗對象
        3.1.2 實驗方法與材料
    3.2 體外實驗驗證miR-130a的作用
        3.2.1 培養(yǎng)SH-SY5Y細胞
        3.2.2 細胞轉(zhuǎn)染
        3.2.3 細胞樣品收集
        3.2.4 Real-time-PCR及Western blot步驟
        3.2.5 實驗數(shù)據(jù)分析
    附表1：主要儀器
    附表2：主要試劑
4.實驗結(jié)果
    4.1 自由轉(zhuǎn)輪運動對衰老大鼠海馬內(nèi)miRNA表達的影響
    4.2 自由轉(zhuǎn)輪運動抑制衰老大鼠海馬內(nèi)衰老相關(guān)蛋白的表達
    4.3 自由轉(zhuǎn)輪運動降低衰老大鼠海馬的細胞凋亡
    4.4 自由轉(zhuǎn)輪運動激活衰老大鼠海馬內(nèi)的細胞自噬
    4.5 自由轉(zhuǎn)輪運動調(diào)控衰老大鼠海馬自噬的信號通路
    4.6 過表達miR-130mimic在SH-SY5Y細胞衰老中的調(diào)控作用
5.分析與討論
結(jié)論
創(chuàng)新點
展望
致謝
參考文獻
附錄


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3173035