【摘要】：目的:觀察一次大負荷運動對大鼠骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的影響,以及運動后GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4的蛋白表達變化,同時施予特異性抑制劑,觀察GRP78和PERK通路蛋白的表達,研究運動對骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的影響,以及PERK通路在其中的作用。方法:選取8周齡雄性SPF級SD大鼠168只,將所有大鼠進行隨機分組,分為安靜對照組(C組,n=8)、單純運動組(E組,n=40)、安慰劑組(A組,n=40)、單純阻斷組(Z組,n=40)和運動阻斷組(ZE組,n=40)五個大組,其中,單純運動組、安慰劑組、單純阻斷組和運動阻斷組又根據(jù)運動或灌胃后0h、12h、24h、48h、72h各分為五個小組,共計21小組,每小組8只。運動組采取的方案為一次性下坡跑,跑臺坡度為-16°,時長90min。安慰劑組灌胃給予大鼠溶于生理鹽水的濃度為0.5%的DMSO溶液,灌胃后30min開始計時為即刻。阻斷劑組和運動阻斷組需灌胃給予特異性抑制劑GSK2606414(1.0mg/kg),灌胃后30min開始計時為即刻。配液時,先將定量的該特異性抑制劑溶于對應的終濃度為0.5%的DMSO原溶液,后加生理鹽水稀釋至目標濃度。在運動或灌胃后對應時相取大鼠比目魚肌待測。檢測GRP78蛋白以及通路相關蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4的表達,使用Gel-pro軟件來進行相應條帶灰度值解析,使用spss One Way ANOVA處理數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.一次大負荷運動后大鼠骨骼肌中GRP78蛋白顯著升高,在運動后0h、12h、24h持續(xù)保持在較高水平,各時相與對照組相比均有顯著性差異(p0.05);p-PERK、p-eIF2α、ATF4蛋白表達均有顯著升高(p0.05),在12h、24h持續(xù)保持在較高水平;2.施加特異性抑制劑后,GRP78蛋白表達相比于運動組出現(xiàn)顯著下調(diào)(p0.05);p-PERK、p-eIF2α、ATF4蛋白表達也相應下調(diào)。結(jié)論:1.一次大負荷運動可致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激,并激活PERK通路;2.給予特異性抑制劑后,PERK通路被阻斷,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激下降,提示PERK通路是運動導致骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的機制之一。
【學位授予單位】：北京體育大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：G804.2
【圖文】：

不同時相蛋白表達的變化不同時相 GRP78 的蛋白表達變化顯示，單純運動組的大鼠在運動后各時相的 GRP7上升的趨勢。與對照組（C 組）相比，單純運動組24h、48h、72h 蛋白表達均明顯上升，并均有非中，在運動后 0h、12h、24h，蛋白表達持續(xù)在較高動后 48h 和 72hGRP78 蛋白表達有所回落。（見表表 5 運動后不同時相 GRP78 蛋白表達的變化（%C groupE0 E12 E24 E482.275±0.167**2.220±0.121**2.279±0.107**1.971±0<0.05,**:P<0.01;

PERK通路在一次大負荷運動后骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激中的作用后不同時相 p-PERK 的蛋白表達變化果顯示，運動后各時相的 p-PERK 蛋白表達，在總體上呈與 C 組相比，單純運動組在運動后 0h、12h、24h、48h有非常顯著性差異（P<0.01），在運動后 0h、12h 蛋白表之后有所回落。（見表 6，圖 2）表 6 運動后不同時相 p-PERK 蛋白表達的變化0h 12h 24h 48h 1.689±0.176**1.637±0.225**1.479±0.095**1.410±0.091**1,*:P<0.05,**:P<0.01。

PERK通路在一次大負荷運動后骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激中的作用著性差異（P<0.05）。在運動后即刻蛋白表達達到最高見表 7，圖 3）表 7 運動后不同時相 p-eIF2α 蛋白表達的變化0h 12h 24h 48h 1.445±0.271*1.327±0.206*1.370±0.208*1.262±0.219 *:P<0.05,**:P<0.01。

【參考文獻】

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本文編號：2746991