【摘要】：目的:觀察一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對大鼠骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響,以及運(yùn)動(dòng)后GRP78、p-PERK、p-eIF2α、ATF4的蛋白表達(dá)變化,同時(shí)施予特異性抑制劑,觀察GRP78和PERK通路蛋白的表達(dá),研究運(yùn)動(dòng)對骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響,以及PERK通路在其中的作用。方法:選取8周齡雄性SPF級(jí)SD大鼠168只,將所有大鼠進(jìn)行隨機(jī)分組,分為安靜對照組(C組,n=8)、單純運(yùn)動(dòng)組(E組,n=40)、安慰劑組(A組,n=40)、單純阻斷組(Z組,n=40)和運(yùn)動(dòng)阻斷組(ZE組,n=40)五個(gè)大組,其中,單純運(yùn)動(dòng)組、安慰劑組、單純阻斷組和運(yùn)動(dòng)阻斷組又根據(jù)運(yùn)動(dòng)或灌胃后0h、12h、24h、48h、72h各分為五個(gè)小組,共計(jì)21小組,每小組8只。運(yùn)動(dòng)組采取的方案為一次性下坡跑,跑臺(tái)坡度為-16°,時(shí)長90min。安慰劑組灌胃給予大鼠溶于生理鹽水的濃度為0.5%的DMSO溶液,灌胃后30min開始計(jì)時(shí)為即刻。阻斷劑組和運(yùn)動(dòng)阻斷組需灌胃給予特異性抑制劑GSK2606414(1.0mg/kg),灌胃后30min開始計(jì)時(shí)為即刻。配液時(shí),先將定量的該特異性抑制劑溶于對應(yīng)的終濃度為0.5%的DMSO原溶液,后加生理鹽水稀釋至目標(biāo)濃度。在運(yùn)動(dòng)或灌胃后對應(yīng)時(shí)相取大鼠比目魚肌待測。檢測GRP78蛋白以及通路相關(guān)蛋白p-PERK、p-eIF2α、ATF4的表達(dá),使用Gel-pro軟件來進(jìn)行相應(yīng)條帶灰度值解析,使用spss One Way ANOVA處理數(shù)據(jù)。結(jié)果:1.一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后大鼠骨骼肌中GRP78蛋白顯著升高,在運(yùn)動(dòng)后0h、12h、24h持續(xù)保持在較高水平,各時(shí)相與對照組相比均有顯著性差異(p0.05);p-PERK、p-eIF2α、ATF4蛋白表達(dá)均有顯著升高(p0.05),在12h、24h持續(xù)保持在較高水平;2.施加特異性抑制劑后,GRP78蛋白表達(dá)相比于運(yùn)動(dòng)組出現(xiàn)顯著下調(diào)(p0.05);p-PERK、p-eIF2α、ATF4蛋白表達(dá)也相應(yīng)下調(diào)。結(jié)論:1.一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)可致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,并激活PERK通路;2.給予特異性抑制劑后,PERK通路被阻斷,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激下降,提示PERK通路是運(yùn)動(dòng)導(dǎo)致骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的機(jī)制之一。
【學(xué)位授予單位】：北京體育大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：G804.2
【圖文】：

不同時(shí)相蛋白表達(dá)的變化不同時(shí)相 GRP78 的蛋白表達(dá)變化顯示，單純運(yùn)動(dòng)組的大鼠在運(yùn)動(dòng)后各時(shí)相的 GRP7上升的趨勢。與對照組（C 組）相比，單純運(yùn)動(dòng)組24h、48h、72h 蛋白表達(dá)均明顯上升，并均有非中，在運(yùn)動(dòng)后 0h、12h、24h，蛋白表達(dá)持續(xù)在較高動(dòng)后 48h 和 72hGRP78 蛋白表達(dá)有所回落。（見表表 5 運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)相 GRP78 蛋白表達(dá)的變化（%C groupE0 E12 E24 E482.275±0.167**2.220±0.121**2.279±0.107**1.971±0<0.05,**:P<0.01;

PERK通路在一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用后不同時(shí)相 p-PERK 的蛋白表達(dá)變化果顯示，運(yùn)動(dòng)后各時(shí)相的 p-PERK 蛋白表達(dá)，在總體上呈與 C 組相比，單純運(yùn)動(dòng)組在運(yùn)動(dòng)后 0h、12h、24h、48h有非常顯著性差異（P<0.01），在運(yùn)動(dòng)后 0h、12h 蛋白表之后有所回落。（見表 6，圖 2）表 6 運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)相 p-PERK 蛋白表達(dá)的變化0h 12h 24h 48h 1.689±0.176**1.637±0.225**1.479±0.095**1.410±0.091**1,*:P<0.05,**:P<0.01。

PERK通路在一次大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)后骨骼肌內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用著性差異（P<0.05）。在運(yùn)動(dòng)后即刻蛋白表達(dá)達(dá)到最高見表 7，圖 3）表 7 運(yùn)動(dòng)后不同時(shí)相 p-eIF2α 蛋白表達(dá)的變化0h 12h 24h 48h 1.445±0.271*1.327±0.206*1.370±0.208*1.262±0.219 *:P<0.05,**:P<0.01。

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2746991