有氧運(yùn)動對大鼠腦衰老和學(xué)習(xí)記憶能力及額葉GAP-43表達(dá)的影響
發(fā)布時(shí)間:2018-01-30 22:52
本文關(guān)鍵詞: 有氧運(yùn)動 衰老 學(xué)習(xí)記憶 額葉 GAP-43 出處:《成都體育學(xué)院》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
【摘要】:目的:通過對D-半乳糖致腦衰老的SD大鼠在不同時(shí)期的有氧運(yùn)動干預(yù),探討不同時(shí)期有氧運(yùn)動對大鼠腦衰老和空間學(xué)習(xí)記憶能力及額葉GAP-43表達(dá)的影響。方法:選用3月齡雄性SD大鼠72只,體重400±20g,適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后隨機(jī)分成6大組:衰老前運(yùn)動預(yù)處理組(S1)、衰老組(N1)、生理鹽水對照組(Na)、衰老過程中運(yùn)動組(S2)、衰老后運(yùn)動組(S3)及衰老后自然喂養(yǎng)組(N2)。每個(gè)大組造模結(jié)束后隨機(jī)分為2小組:M組和N組。M組進(jìn)行7天的Morris行為學(xué)實(shí)驗(yàn),即S1M組、N1M組、NaM組、S2M組、S3M組和N2M組;N組進(jìn)行7天的自然喂養(yǎng),即S1N組、N1N組、NaN組、S2N組、S3N組和N2N組。共12組(n=6)。衰老造模方法選用對大鼠進(jìn)行持續(xù)6周的D-半乳糖(100mg/kg/d),注射部位為腹腔;選用Morris水迷宮系統(tǒng)測定不同時(shí)期有氧運(yùn)動對大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力的影響;大鼠分兩批取材后,測定其大腦皮質(zhì)的SOD、GSH-Px活性和MDA含量,評定各組大鼠腦衰老程度;應(yīng)用real-time PCR、western blot和免疫組化技術(shù)檢測各組大鼠額葉GAP-43的表達(dá)。結(jié)果:(1)大鼠狀態(tài)觀察:與Na組大鼠相比,N1組組大鼠精神狀態(tài)不佳,出現(xiàn)精神萎靡,嗜睡,飲食量減少,皮毛彈性差且脫毛等衰老特征;(2)自由基檢測結(jié)果:M組與相對應(yīng)的N組間MDA含量及SOD、GSH-Px的活性無顯著性差異(P0.05),且趨勢相似。Na組大鼠大腦皮質(zhì)的MDA含量顯著低于N1組(P0.05),SOD、GSH-Px活性顯著高于N1組(P0.05);S1組大鼠大腦皮質(zhì)的MDA含量及SOD、GSH-Px活性較N1組相比,無顯著性變化(P0.05);S2組大鼠大腦皮質(zhì)的MDA含量顯著低于N1組(P0.01),SOD、GSH-Px活性顯著高于N1組(P0.01);S3組大鼠大腦皮質(zhì)的MDA含量顯著低于N2組(P0.01),SOD、GSH-Px活性顯著高于N2組(P0.01)。(3)Morris水迷宮定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)果:在進(jìn)行定位航行實(shí)驗(yàn)的過程中,各組大鼠的平均逃避潛伏期時(shí)間隨著訓(xùn)練次數(shù)的增加逐漸減少且趨于穩(wěn)定,但不同組別之間的平均潛逃避伏期時(shí)間具有一定的差異。全部組別大鼠第2天的平均逃避潛伏期時(shí)間均顯著少于第1天(P0.01);除S3M組外,其余各組大鼠第3天的平均逃避潛伏期時(shí)間顯著少于第2天(P0.01);NaM組、S2M組大鼠的平均逃避潛伏期時(shí)間從第3天開始趨于穩(wěn)定(P0.01),而S1M組、N1M組、S3M組、N2M組則是在第4天大鼠的平均逃避潛伏期時(shí)間才趨于穩(wěn)定(P0.05)。在進(jìn)行第1天定位航行實(shí)驗(yàn)時(shí),NaM組大鼠的平均潛逃避伏期時(shí)間顯著低于N1M組大鼠(P0.01);S3M組和N2M組大鼠的平均潛逃避伏期時(shí)間顯著高于N1M組(P0.01,P0.05)。第6天定位航行實(shí)驗(yàn),S1M組和N1M組平均潛逃避伏期時(shí)間無顯著性差異(P0.05);S2M組大鼠的平均潛逃避伏期顯著低于N1M組(P0.01);S3M組大鼠的平均潛逃避伏期顯著低于N2M組(P0.01)。第7天空間探索實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:NaM組大鼠平均穿越原站臺的次數(shù)顯著高于N1M組大鼠(P0.01);S1M組大鼠的平均穿越原站臺的次數(shù)與N1M無顯著性差異(P0.05);S2M組大鼠的平均穿越原站臺的次數(shù)顯著高于N1M組(P0.05);S3M組大鼠的平均穿越原站臺的次數(shù)顯著高于N2M組(P0.05)。(4)免疫組化染色結(jié)果:額葉GAP-43的免疫產(chǎn)物呈棕褐色,陽性表達(dá)主要位于額葉顆粒細(xì)胞周緣的神經(jīng)元胞漿中。大鼠額葉GAP-43蛋白表達(dá)免疫組化染色結(jié)果顯示:M組和N組大鼠間額葉GAP-43的免疫產(chǎn)物IOD值無顯著性差異(P0.05;見表16,圖1);Na組大鼠額葉GAP-4的免疫產(chǎn)物IOD值顯著高于N1組(P0.01);S1組大鼠額葉GAP-43的免疫產(chǎn)物IOD值與N1組相比,無顯著性變化(P0.05);S2組大鼠額葉GAP-43的免疫產(chǎn)物IOD值顯著高于N1組(P0.01);S3組大鼠額葉GAP-43的免疫產(chǎn)物IOD值顯著高于N2組(P0.01)。(5)額葉GAP-43表達(dá)檢測結(jié)果:M組與相對應(yīng)的N組間額葉GAP-43的mRNA和蛋白的表達(dá)量無顯著性差異(P0.05),且表達(dá)量趨勢相似。Na組大鼠額葉GAP-43mRNA和蛋白的表達(dá)量顯著高于N1組(P0.01);S2組大鼠額葉GAP-43 mRNA和蛋白的表達(dá)量顯著高于N1組(P0.01);S3組大鼠額葉GAP-43 mRNA和蛋白的表達(dá)量顯著高與N1組(P0.01)。結(jié)論:(1)注射D-半乳糖致大鼠出現(xiàn)大腦皮質(zhì)MDA含量顯著升高,SOD、GSH-Px活性顯著降低及空間學(xué)習(xí)能力下降等衰老特征,證明D-半乳糖致大鼠腦衰老模型造模成功。(2)衰老中或衰老后進(jìn)行有氧運(yùn)動,能上調(diào)額葉GAP-43表達(dá),延緩大鼠的腦衰老及學(xué)習(xí)記憶能力下降。(3)提示大鼠額葉GAP-43的表達(dá)增加是有氧運(yùn)動延緩大鼠腦衰老及空間學(xué)習(xí)記憶能力下降的機(jī)制之一。
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本文編號:1477451
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