本文關(guān)鍵詞：PGC-1α在有氧運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)增齡大鼠骨骼肌纖維轉(zhuǎn)化中的作用研究

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【摘要】：研究目的:建立增齡大鼠有氧運(yùn)動(dòng)模型,對(duì)運(yùn)動(dòng)后增齡大鼠比目魚肌和腓腸肌Ⅰ型和Ⅱ型肌纖維的分布進(jìn)行檢測(cè),測(cè)定骨骼肌中的PGC-1α蛋白和mRNA表達(dá)水平,以及MEF-2 mRNA表達(dá)水平,分析有氧運(yùn)動(dòng)對(duì)增齡大鼠骨骼肌Ⅰ型和Ⅱ型肌纖維分布的影響,探究PGC-1α在運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)肌纖維轉(zhuǎn)化中的作用,及其相關(guān)因子MEF-2之間的關(guān)系。研究方法:健康雄性SD大鼠(Sprague-Dawley Rat)4月齡16只(408.65±48.63g)、12月齡16只(504.09±40.79g)和16月齡16只(561.77±28.56g),SPF級(jí)動(dòng)物,分籠飼養(yǎng)。適應(yīng)性訓(xùn)練5天后,按體重隨機(jī)分組,分為青年對(duì)照組(YC,n=6)、青年運(yùn)動(dòng)組(YE,n=10)、中青年對(duì)照組(MC,n=6)和中青年運(yùn)動(dòng)組(ME,n=10)、中年對(duì)照組(OC,n=6)和中年運(yùn)動(dòng)組(OE,n=10)。運(yùn)動(dòng)組大鼠采用跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)方式,建立遞增運(yùn)動(dòng)負(fù)荷實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型(坡度為0°,遞增強(qiáng)度到19m/min×60min,運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度相當(dāng)于70%VO2max),每周持續(xù)訓(xùn)練6天,共訓(xùn)練8周。訓(xùn)練末次結(jié)束后20小時(shí)取比目魚肌和腓腸肌,采用ATP酶染色法鑒定肌纖維類型,用Western Blotting檢測(cè)PGC-1α蛋白表達(dá)水平、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)PGC-1α和MEF-2mRNA表達(dá)水平。研究結(jié)果:(1)8周運(yùn)動(dòng)后,除oe組外,其他各組大鼠體重均有所增加。其中yc組體重明顯高于對(duì)照組,差異顯著(p0.01),而其他組別實(shí)驗(yàn)前后的增加幅度無顯著性(p0.05)。實(shí)驗(yàn)前mc組和oc組大鼠體重明顯高于yc組,具有顯著性差異(p0.01)。(2)8周運(yùn)動(dòng)后,與對(duì)照組相比,ye組比目魚�、裥图±w維數(shù)密度增加,Ⅱ型肌纖維數(shù)密度減少,無顯著性差異;me組比目魚肌Ⅰ型肌纖維數(shù)密度減少,Ⅱ型肌纖維數(shù)密度顯著增加(p0.05);oe組比目魚�、裥图±w維數(shù)密度顯著減少(p0.05),Ⅱ型肌纖維數(shù)密度增加。(3)8周運(yùn)動(dòng)后,與對(duì)照組相比,除me組腓腸�、蛐图±w維數(shù)密度顯著減少(p0.01)外,其他各運(yùn)動(dòng)組腓腸肌Ⅰ型、Ⅱ型肌纖維數(shù)密度差異不顯著。(4)各對(duì)照組間比較,mc組腓腸肌中pgc-1α蛋白表達(dá)水平明顯高于yc組,具有顯著性差異(p0.01)。8周運(yùn)動(dòng)后,與各對(duì)照組相比,ye組和oe組腓腸肌中pgc-1α蛋白表達(dá)水平均減少,且ye組差異顯著,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。me組腓腸肌中pgc-1α蛋白表達(dá)水平高于mc組,但差異不顯著(p0.05)。(5)各對(duì)照組間比較,mc組比目魚肌、腓腸肌中pgc-1αmrna表達(dá)水平最高。其中,yc組明顯低于mc組,又高于oc組。8周運(yùn)動(dòng)后,與各對(duì)照組相比,各年齡運(yùn)動(dòng)組比目魚肌、腓腸肌中pgc-1αmrna表達(dá)水平均顯著增加(p0.01)。(6)各對(duì)照組間比較,mc組比目魚肌、腓腸肌中mef-2mrna表達(dá)水平最高,且mc組比目魚肌中mef-2mrna表達(dá)水平顯著高于oc組(p0.01)。yc組腓腸肌中mef-2mrna表達(dá)水平明顯低于mc組(p0.01),又顯著高于OC組。8周運(yùn)動(dòng)后,與各對(duì)照組相比,各運(yùn)動(dòng)組比目魚肌、腓腸肌中MEF-2 mRNA表達(dá)水平均顯著增加。研究結(jié)論:(1)大鼠自然增齡條件下,比目魚�、裥汀ⅱ蛐图±w維數(shù)密度整體呈現(xiàn)先增加后減少的趨勢(shì),腓腸肌中Ⅰ型、Ⅱ型肌纖維數(shù)密度整體呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。(2)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激條件下,PGC-1α可能促進(jìn)青年組大鼠比目魚肌纖維發(fā)生轉(zhuǎn)化,其方向?yàn)棰蛐汀裥?中青年組比目魚肌纖維轉(zhuǎn)化方向?yàn)棰裥汀蛐?且Ⅰ型肌纖維數(shù)密度的變化與PGC-1α蛋白表達(dá)呈正相關(guān);中年組比目魚肌纖維轉(zhuǎn)化方向?yàn)棰裥汀蛐?PGC-1α蛋白表達(dá)的增加可以促進(jìn)轉(zhuǎn)化。(3)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激條件下,PGC-1α可能促進(jìn)大鼠腓腸肌纖維轉(zhuǎn)化,且方向?yàn)棰蛐汀裥汀?4)安靜狀態(tài)下,青年組PGC-1α蛋白表達(dá)主要集中在慢肌;中青年組和中年組運(yùn)動(dòng)后,PGC-1α蛋白表達(dá)主要集中在快肌。(5)運(yùn)動(dòng)應(yīng)激條件下,增齡大鼠骨骼肌PGC-1α和MEF-2mRNA表達(dá)水平呈正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：有氧運(yùn)動(dòng) 肌纖維 PGC-1α
【學(xué)位授予單位】：湖南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：G804.2
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-13
• 1 前言13-16
• 2 材料與方法16-29
• 2.1 研究對(duì)象與分組16-17
• 2.2 運(yùn)動(dòng)實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒?/span>17
• 2.3 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑17-19
• 2.4 樣品制備19-20
• 2.5 指標(biāo)檢測(cè)20-28
• 2.6 質(zhì)量控制28
• 2.7 數(shù)據(jù)處理28-29
• 3 研究結(jié)果29-40
• 3.1 增齡大鼠實(shí)驗(yàn)前后體重變化情況29-30
• 3.2 增齡大鼠比目魚肌和腓腸肌ATP酶染色結(jié)果30-35
• 3.3 增齡大鼠骨骼肌PGC-1α 蛋白表達(dá)變化35-37
• 3.4 增齡大鼠骨骼肌PGC-1α、MEF-2 mRNA表達(dá)變化37-40
• 4 分析與討論40-45
• 4.1 增齡大鼠骨骼肌纖維數(shù)密度的變化40
• 4.2 PGC-1α 在運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)增齡大鼠比目魚肌纖維轉(zhuǎn)化中的作用40-42
• 4.3 PGC-1α 在運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)增齡大鼠腓腸肌纖維轉(zhuǎn)化中的作用42-43
• 4.4 運(yùn)動(dòng)誘導(dǎo)下增齡大鼠骨骼肌中PGC-1α、MEF-2mRNA表達(dá)水平的差異43-45
• 5 研究結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-49
• 文獻(xiàn)綜述49-57
• 參考文獻(xiàn)54-57
• 縮略詞表57-58
• 致謝58

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