長(zhǎng)期不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠空間記憶能力及小腦Orexin-A、OX1R表達(dá)的影響
本文關(guān)鍵詞:長(zhǎng)期不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠空間記憶能力及小腦Orexin-A、OX1R表達(dá)的影響
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【摘要】:目的:通過(guò)建立長(zhǎng)期不同負(fù)荷游泳運(yùn)動(dòng)模型,探討運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠空間記憶提取能力及小腦Orexin-A、OX1R表達(dá)的影響,為揭示長(zhǎng)期不同負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)干預(yù)對(duì)小腦空間記憶提取能力的影響機(jī)制提供神經(jīng)生物學(xué)資料。方法:選用2月齡雄性Sprague Dawley(SD)大鼠36只,隨機(jī)分為3個(gè)組:對(duì)照組(C組,10只)、中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組(M組,13只)、過(guò)度負(fù)荷運(yùn)動(dòng)組(O組,13只)。首先,對(duì)各組大鼠進(jìn)行8天的Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)(7天定位航行實(shí)驗(yàn)+1天空間探索實(shí)驗(yàn));之后C組自然喂養(yǎng)8周,M組中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)8周,O組大負(fù)荷運(yùn)動(dòng)8周;然后再對(duì)各組大鼠進(jìn)行1天的空間探索測(cè)試,探討不同負(fù)荷的運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠空間記憶提取能力的影響。在設(shè)定時(shí)間內(nèi)取材,然后進(jìn)行各項(xiàng)生化指標(biāo)的檢測(cè)。應(yīng)用ELISA技術(shù)測(cè)定血清血睪酮含量;Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)大鼠小腦Orexin-A、OX1R的mRNA表達(dá)水平;Western blot技術(shù)檢測(cè)大鼠小腦OX1R蛋白的表達(dá)水平;免疫熒光技術(shù)確定Orexin-A、OX1R在小腦的分布。結(jié)果:1、體重監(jiān)測(cè)結(jié)果:前兩周,各組大鼠的平均體重?zé)o組間差異(P0.05);第3-8周,M組與O組平均體重顯著性低于C組(P0.01);第5-8周,O組平均體重顯著性低于M組(P0.05,P0.01)。2、血睪酮檢測(cè)結(jié)果:M組血睪酮濃度顯著低于C組(P0.01),O組血睪酮濃度顯著低于C組、M組(P0.01)。3、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果:定位航行實(shí)驗(yàn)中,各組大鼠的平均逃避潛伏期,第2天比第1天顯著性縮短(P0.05,P0.01),第3-7天比第2天顯著性縮短(P0.05,P0.01),第3-7天之間無(wú)顯著性差異(P0.05);同一天內(nèi),各組大鼠之間的平均逃避潛伏期無(wú)顯著性差異(P0.05)?臻g探索實(shí)驗(yàn)中,各組大鼠在運(yùn)動(dòng)干預(yù)前的穿越原站臺(tái)次數(shù)無(wú)組間差異(P0.05);運(yùn)動(dòng)干預(yù)前、后相比,各組大鼠在運(yùn)動(dòng)干預(yù)后的穿越原站臺(tái)次數(shù)均顯著少于干預(yù)前(P0.05,P0.01);而運(yùn)動(dòng)干預(yù)后穿越原站臺(tái)次數(shù),M組顯著多于C組(P0.05),O組顯著少于C組(P0.05)。4、Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果:M組小腦Orexin-A mRNA表達(dá)量顯著性高于C組(P0.05),O組小腦Orexin-A mRNA表達(dá)量顯著性低于C組(P0.05);M組小腦OX1R mRNA表達(dá)量顯著低于C組(P0.05),O組小腦OX1R mRNA表達(dá)量顯著性低于C組(P0.05)。5、Western blot檢測(cè)結(jié)果:M組小腦OX1R蛋白表達(dá)量顯著性低于C組(P0.05),O組小腦OX1R蛋白表達(dá)量與C組無(wú)顯著性差異(P0.05)。6、免疫熒光檢測(cè)結(jié)果:Orexin-A和OX1R在小腦有廣泛的表達(dá),且Orexin-A在小腦Purkinje cells的表達(dá)尤其明顯。M組小腦Orexin-A蛋白表達(dá)顯著性低于C組(P0.05),O組小腦Orexin-A蛋白表達(dá)與C組無(wú)顯著性差異(P0.05)。7、各指標(biāo)相關(guān)性分析結(jié)果:運(yùn)動(dòng)干預(yù)后大鼠穿越原站臺(tái)次數(shù)的平均值,與小腦Orexin-A的mRNA表達(dá)水平顯著性正相關(guān)(P0.01),與小腦OX1R的mRNA表達(dá)水平顯著性負(fù)相關(guān)(P0.01),與小腦OX1R的蛋白表達(dá)水平顯著性負(fù)相關(guān)(P0.05)。結(jié)論:1、長(zhǎng)期中等負(fù)荷運(yùn)動(dòng)上調(diào)了小腦Orexin-A的mRNA表達(dá),減緩了大鼠空間記憶提取能力衰減的速度,對(duì)空間記憶的保持起到積極作用。2、長(zhǎng)期過(guò)度負(fù)荷運(yùn)動(dòng)下調(diào)了小腦Orexin-A、OX1R的mRNA表達(dá),加快了大鼠空間記憶提取能力衰減的速度,對(duì)空間記憶保持的起到消極作用,可能是由于過(guò)度負(fù)荷運(yùn)動(dòng)干擾了小腦Orexin-A與OX1R mRNA的正常翻譯,其中的機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
【關(guān)鍵詞】:不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng) 空間記憶 小腦 Orexin-A OX1R
【學(xué)位授予單位】:成都體育學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:G804.7
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 1 前言10
- 2 文獻(xiàn)綜述10-14
- 2.1 運(yùn)動(dòng)與記憶10-12
- 2.1.1 適宜運(yùn)動(dòng)與記憶的關(guān)系11
- 2.1.2 過(guò)度運(yùn)動(dòng)與記憶的關(guān)系11-12
- 2.2 食欲素及其受體12-14
- 2.2.1 食欲素及其受體概述12
- 2.2.2 食欲素及其受體與記憶的關(guān)系12-13
- 2.2.3 食欲素及其受體與小腦的關(guān)系13
- 2.2.4 食欲素及其受體與運(yùn)動(dòng)的關(guān)系13-14
- 2.3 小結(jié)14
- 3 材料與方法14-25
- 3.1 實(shí)驗(yàn)材料14-16
- 3.1.1 主要儀器14-15
- 3.1.2 主要試劑15
- 3.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組15-16
- 3.2 實(shí)驗(yàn)方法16-25
- 3.2.1 Morris水迷宮訓(xùn)練和行為學(xué)測(cè)試16-17
- 3.2.2 運(yùn)動(dòng)干預(yù)方案17-18
- 3.2.3 動(dòng)物取材及樣本制備18
- 3.2.4 ELISA檢測(cè)血睪酮水平18-19
- 3.2.5 Real-time PCR檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R的mRNA表達(dá)19-22
- 3.2.6 Western Blot檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R蛋白表達(dá)22-24
- 3.2.7 免疫熒光檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R表達(dá)24-25
- 3.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析25
- 4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-34
- 4.1 體重監(jiān)測(cè)結(jié)果25-26
- 4.2 血睪酮水平檢測(cè)結(jié)果26
- 4.3 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-28
- 4.4 Real-time PCR檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R的mRNA表達(dá)結(jié)果28-30
- 4.4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立和擴(kuò)增效率分析28-29
- 4.4.2 反應(yīng)特異性分析29-30
- 4.4.3 Real-time PCR檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R的mRNA表達(dá)30
- 4.5 Western Blot檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R蛋白表達(dá)結(jié)果30-31
- 4.5.1 小腦Orexin-A蛋白檢測(cè)結(jié)果30-31
- 4.5.2 小腦OX1R蛋白檢測(cè)結(jié)果31
- 4.6 免疫熒光檢測(cè)小腦Orexin-A、OX1R表達(dá)結(jié)果31-33
- 4.6.1 免疫熒光定位小腦Orexin-A31-33
- 4.6.2 免疫熒光定位小腦OX1R33
- 4.7 各檢測(cè)指標(biāo)之間相關(guān)性分析結(jié)果33-34
- 5 分析與討論34-37
- 5.1 不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠體重及血睪酮的影響34-35
- 5.2 不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠空間記憶提取能力的影響35-36
- 5.3 不同負(fù)荷運(yùn)動(dòng)對(duì)大鼠小腦Orexin-A、OX1R表達(dá)的影響36-37
- 5.4 各檢測(cè)指標(biāo)相關(guān)性分析37
- 6 結(jié)論37-38
- 7 參考文獻(xiàn)38-43
- 致謝43
【參考文獻(xiàn)】
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本文編號(hào):1081781
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