該文立足科教結(jié)合背景,將癌胚抗原檢測綜合性實驗應(yīng)用到制藥工程專業(yè)實驗教學中,涵蓋納米技術(shù)、免疫分析技術(shù)、微流控芯片技術(shù)和儀器分析技術(shù)等多門前沿知識。實驗基于表面增強拉曼免疫測定方法,制備了免疫金溶膠來提高拉曼檢測靈敏度,制備了的Fe₃O₄@Au磁性納米粒子用于富集信號,將金納米粒子和磁性納米粒子分別偶聯(lián)癌胚抗原單克隆抗體后,在玻璃芯片中與測定抗原充分混合,形成夾心免疫復合物,最終通過精密儀器拉曼光譜進行定量分析。該實驗與傳統(tǒng)ELISA雙抗體夾心法相比,具有檢測時間短、操作簡單和靈敏度高等優(yōu)點。 

【文章來源】：實驗技術(shù)與管理. 2020,37(11)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

微流控芯片檢測原理圖

實驗中玻璃芯片制備所用的掩膜，均由Free Hand軟件完成微通道結(jié)構(gòu)的設(shè)計，掩膜尺寸63 mm×63 mm，通道尺寸500μm×80μm，長度為15 cm，按掩膜用光刻蝕與濕法刻蝕結(jié)合制備出的玻璃芯片如圖2所示。在用聚二甲基硅氧烷（PDMS）材質(zhì)制作的通道接口處固定3個長度相當?shù)臉岊^，以便注射樣品。S型通道是樣品進行混沌混合的區(qū)域，經(jīng)過4個彎道的混合，樣品之間充分接觸和反應(yīng)，反應(yīng)后的溶液在流經(jīng)固定有圓形小磁鐵的集液槽時，磁性復合納米粒子被外部磁場吸附而停留，剩余的溶液則經(jīng)廢液槽排出通道。3.2 Fe3O4@Au粒子表征

圖3是Fe3O4@Au粒子的紫外吸收光譜圖，由圖可知，F(xiàn)e3O4粒子并沒有特征吸收峰，而包裹了金殼之后，在578 nm處出現(xiàn)了特征吸收峰，與金粒子紫外光譜圖相比，出現(xiàn)了紅移現(xiàn)象。這是因為Fe3O4@Au粒子形成之后，Au粒子中的電子發(fā)生轉(zhuǎn)移，Au殼表面出現(xiàn)電子缺失，引起吸收峰紅移。Fe3O4@Au還利用透射電鏡表征，如圖4所示，金包被完全的粒子，本實驗采用種子生長法，是由已經(jīng)連有2 nm Au的Fe3O4繼續(xù)用甲醛緩慢還原出Au粒子，在機械攪拌下，還原出來的Au粒子能比較均勻地在Fe3O4粒子表面生長。


本文編號：3097574