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DNA檢測中新型納米探針的制備及應用

發(fā)布時間:2016-05-21 23:08

  本文關(guān)鍵詞:華晨金杯汽車質(zhì)量追溯管理信息系統(tǒng)開發(fā)方案研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】DNA檢測在醫(yī)療診斷、食品安全和生化反恐方面變得日趨重要。盡管傳統(tǒng)PCR技術(shù)非常靈敏,但是設備成本高、操作復雜而且易受污染,不利于推廣到實時檢測,因而人們一直在尋求更廉價、更方便的、更靈敏的(檢測數(shù)個DNA分子)實時檢測方法。納米材料幾乎提供了無限的組分、尺寸、維度和形貌的組合,可以連接各種不同探針分子,從而制備出不同性質(zhì)的納米探針。將納米探針組合可以還產(chǎn)生無數(shù)新的放大策略,為DNA檢測提供了新的可能。盡管基于納米探針的DNA檢測已經(jīng)取得了巨大的進展,該領域依然存在著巨大的挑戰(zhàn):(1)納米探針的使用經(jīng)常會引入非均相界面,由此帶來一系列問題,如雜交速度緩慢,效率低等問題;(2)許多檢測方法需要多步操作,增加了操作復雜性;(3)降低非特異性相互作用對避免背景干擾非常重要,特別在復雜檢測體系中;(4)納米探針的放大效應缺乏一般性,對于不同體系往往需要單個優(yōu)化。因此發(fā)展新的納米探針、新的檢測方法十分重要。在此基礎上,本文完成了以下工作:(1)制備了具有低于計量比金屬含量的金屬-有機雜化粒子,這種粒子由反式-4,4’-雙(N-(2-氨基苯)氨基)二苯乙烯(EDAPS)和金屬離子(Cu(Ⅱ)或Fe(ⅠⅡ))構(gòu)成,合成時先通過沉淀法制備EDAPS的有機小分子納米粒子,再加入金屬離子,在熱輔助下,通過向其中引入配位作用導致了有機小分子粒子向球形金屬-有機雜化粒子轉(zhuǎn)化。調(diào)節(jié)最初沉淀的速度可以調(diào)節(jié)產(chǎn)物粒子尺寸和其中金屬含量,改變反應中投入的金屬離子濃度也可以調(diào)節(jié)產(chǎn)物粒子中金屬含量。最終所得粒子金屬含量介于有機小分子納米粒子與金屬-有機配合物粒子之間,為通過組分調(diào)控粒子性質(zhì)提供了新的可能。對這種粒子制備過程的研究和性質(zhì)表征,為揭示性質(zhì)組分組分迥異的有機小分子粒子和配位聚合物粒子的內(nèi)在聯(lián)系提供了重要的線索。(2)以具有低于計量比金屬含量的金屬-有機雜化納米粒子為基礎,制備了DNA探針。探針粒子內(nèi)含大量熒光小分子和少量金屬離子,金屬離子通過增加表面電荷來穩(wěn)定粒子。將探針粒子通過DNA雜交附著到DNA修飾的玻璃片表面,將粒子溶解產(chǎn)生熒光信號。相比于小分子熒光基團實現(xiàn)了信號放大,相比于合成條件苛刻的量子點,該粒子合成十分簡單快速,同時該探針具有良好的單堿基錯配序列區(qū)分能力。(3)合成了表面氨基的聚苯乙烯納米粒子,對其表面進行DNA修飾制備出表面為正電環(huán)境的DNA納米探針;贒NA雜交驅(qū)動的探針納米粒子聚集我們發(fā)展了一種新的DNA雜交快速分析系統(tǒng)。該系統(tǒng)利用閾值濁度的出現(xiàn)時間對DNA雜交動力學進行表征,有效分析時間甚至能縮短到數(shù)分鐘,該方法能夠成功進行目標DNA序列的定量,并對單堿基錯配有良好的區(qū)分能力。該系統(tǒng)之所以能進行快速分析,是因為對納米粒子尺寸和表面官能團的合理選擇與設計,納米粒子表面的正電環(huán)境通過屏蔽和削弱了DNA鏈相互靠近時的排斥作用,從根本上加快了粒子表面的雜交速度。更重要的,該體系的動力學分析方法對于傳統(tǒng)基于熱力學終點的分析方法做出了有效補充,對于那些熱力學終點性質(zhì)較接近的體系,動力學分析方法是一個優(yōu)秀選擇。
【作者】舒鑫;
【導師】朱進;
【作者基本信息】南京大學,高分子化學與物理(專業(yè)學位),2012,,博士
【關(guān)鍵詞】DNA檢測;納米探針;金屬-有機雜化粒子;聚苯乙烯粒子;閾值濁度;雜交動力學;

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本文編號:47999

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