本文關(guān)鍵詞：急性乙醇中毒對大鼠海馬形態(tài)影響的激光掃描共聚焦顯微鏡觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景與目的:乙醇作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)的抑制劑,可抑制大腦皮層的活動,使皮質(zhì)下中樞的興奮失去控制,從而誘發(fā)腦功能紊亂,導(dǎo)致機體神經(jīng)行為功能的改變,造成學(xué)習(xí)、記憶認(rèn)知、運動協(xié)調(diào)等多種行為功能障礙。因此乙醇的過量飲用可嚴(yán)重影響醉酒者的身心健康,導(dǎo)致交通事故、家庭社會暴力等一系列不良后果,給社會和家庭帶來極大的危害。但目前國內(nèi)外研究多集中在慢性乙醇中毒對中樞神經(jīng)系統(tǒng)帶來的不良影響,對急性乙醇中毒的研究報道較少。本研究選取大鼠給予不同劑量的乙醇灌胃后建立急性乙醇中毒動物模型,采用HE染色及免疫熒光法結(jié)合激光共聚焦觀察乙醇中毒后海馬形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化情況,探討急性乙醇中毒所致病變基礎(chǔ)及其可能作用機制,為今后的相關(guān)研究提供科學(xué)依據(jù)。方法:1.SD大鼠,雌雄不限,體重250g左右,隨機分組,酒精濃度為56%(v/v)(紅星二鍋頭)2.分為四個劑量組:對照組、低劑量(4ml/kg)、中劑量組(8ml/kg)、高劑量組(16ml/kg)。分別處理1h、2h、4h、8h、12h。對照組給予相應(yīng)體積的生理鹽水,制作低、中、高劑量急性乙醇中毒模型。3.采用HE染色法觀察急性乙醇中毒后海馬形態(tài)的變化情況4.采用免疫熒光法觀察不同時間段急性乙醇中毒后海馬神經(jīng)元Neu N的表達(dá)5.利用激光共聚焦觀察不同時間段急性乙醇中毒后經(jīng)過熒光雙染的Neu N及DAPI的海馬神經(jīng)元表達(dá)結(jié)果:1.HE染色結(jié)果顯示,給予大鼠不同濃度乙醇灌胃后,與對照組相比,乙醇組中齒狀回神經(jīng)元的胞體厚度未發(fā)生明顯的變化,但其神經(jīng)元細(xì)胞的排布卻表現(xiàn)為不同程度的改變。大鼠給予4 ml/kg乙醇灌胃1 h及2 h后齒狀回神經(jīng)元細(xì)胞并未發(fā)生明顯的改變,作用4 h后可見齒狀回內(nèi)顆粒細(xì)胞排布呈現(xiàn)輕微的疏松狀,作用至8 h時,顆粒細(xì)胞的排布已恢復(fù)至正常結(jié)構(gòu);8 ml/kg和16 ml/kg乙醇處理組可見部分齒狀回顆粒細(xì)胞胞體出現(xiàn)明顯水腫,給予大鼠乙醇灌胃2 h后,8 ml/kg乙醇處理組與對照組相比無明顯差別,4 h時可見齒狀回神經(jīng)元細(xì)胞出現(xiàn)明顯排列紊亂、疏松,細(xì)胞間隙增大,8 h時其細(xì)胞排布結(jié)構(gòu)逐漸恢復(fù)至正常狀態(tài),至12 h時,齒狀回內(nèi)細(xì)胞的密度已與對照組相當(dāng);而16 ml/kg乙醇處理在灌胃后2 h即可觀察到齒狀回細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變,表現(xiàn)為細(xì)胞密度的降低,細(xì)胞間隙的增大等,4 h時乙醇對齒狀回內(nèi)神經(jīng)元細(xì)胞的損傷進(jìn)一步加重,與對照組相比,可見細(xì)胞數(shù)目明顯減少,細(xì)胞排布的緊密度降低,灌胃8 h后,在齒狀回內(nèi)可觀察到明顯的空隙結(jié)構(gòu),神經(jīng)元細(xì)胞排布分散零亂,其層狀結(jié)構(gòu)已完全消失,由此可知高濃度的乙醇可導(dǎo)致齒狀回神經(jīng)元細(xì)胞致密結(jié)構(gòu)出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷,至灌胃12 h時,齒狀回顆粒細(xì)胞排布結(jié)構(gòu)尚未恢復(fù)至正常。2.免疫熒光結(jié)果顯示,與對照組相比,乙醇處理組中齒狀回神經(jīng)元Neu N熒光表達(dá)強度減弱。乙醇灌胃1 h后,4 ml/kg、8 ml/kg及16 ml/kg乙醇處理組大鼠齒狀回及海馬CA3及CA4中Neu N的表達(dá)量即表現(xiàn)為不同程度的減少;作用2 h時,大鼠齒狀回及海馬CA3及CA4神經(jīng)元中Neu N的熒光強度進(jìn)一步減弱,提示酒精可導(dǎo)致神經(jīng)元細(xì)胞密度的降低,在形態(tài)結(jié)構(gòu)上表現(xiàn)為齒狀回內(nèi)顆粒細(xì)胞間隙增大,細(xì)胞排列疏松、紊亂,海馬CA3及CA4錐體細(xì)胞數(shù)目減少,分布散亂;至4 h時,8 ml/kg及16 ml/kg乙醇處理組中Neu N表達(dá)量持續(xù)減少,僅可在齒狀回及海馬CA3及CA4局部區(qū)域內(nèi)觀察到Neu N表達(dá)分布,可見大量的空隙樣結(jié)構(gòu)分布,上述結(jié)果提示齒狀回顆粒細(xì)胞的層狀排布結(jié)構(gòu)受損嚴(yán)重,海馬內(nèi)錐體細(xì)胞損傷程度進(jìn)一步加劇。至8 h時,4 ml/kg乙醇處理組Neu N熒光強度已與對照組相當(dāng),而中高劑量組在乙醇灌胃后12 h時其齒狀回Neu N表達(dá)尚未恢復(fù)至正常水平,且細(xì)胞排布仍呈現(xiàn)為松散態(tài)。3.激光共聚焦Neu N+dapi表達(dá)結(jié)果可知,neun標(biāo)記神經(jīng)元核,DAPI可標(biāo)記所有細(xì)胞的胞核,乙醇灌胃1 h后,4 ml/kg、8 ml/kg及16 ml/kg乙醇處理組大鼠齒狀回及海馬CA3及CA4中Neu N的表達(dá)開始減弱;作用2 h時,大鼠齒狀回及海馬CA3及CA4神經(jīng)元中Neu N的表達(dá)進(jìn)一步減弱,形態(tài)結(jié)構(gòu)上出現(xiàn)齒狀回內(nèi)顆粒細(xì)胞間隙增大,細(xì)胞排列疏松、紊亂,海馬CA3及CA4錐體細(xì)胞數(shù)目減少,分布散亂;至4 h時,8 ml/kg及16 ml/kg乙醇處理組中Neu N熒光表達(dá)量較弱,僅可在齒狀回及海馬CA3及CA4局部區(qū)域內(nèi)可觀察到Neu N表達(dá)分布,齒狀回顆粒細(xì)胞的層狀排布結(jié)構(gòu)明顯受損,可見空隙樣結(jié)構(gòu)分布,海馬內(nèi)錐體細(xì)胞損傷程度進(jìn)一步加劇,可見少數(shù)細(xì)胞表現(xiàn)為空泡樣結(jié)構(gòu)。至8 h時,4ml/kg組Neu N熒光強度已與對照組無明顯差別,而中高劑量組在灌胃后12 h時其齒狀回Neu N表達(dá)尚未恢復(fù),且細(xì)胞排布仍呈現(xiàn)為松散態(tài)。結(jié)論:乙醇灌胃后可導(dǎo)致海馬及齒狀回中Neu N的表達(dá)及分布發(fā)生改變,與作用時間相關(guān)。乙醇灌胃后可導(dǎo)致大鼠齒狀回及海馬神經(jīng)元細(xì)胞層狀排布結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,表現(xiàn)為細(xì)胞排列疏松,細(xì)胞間隙增大,海馬及齒狀回中錐體細(xì)胞及顆粒細(xì)胞排布結(jié)構(gòu)的影響程度與酒精攝入劑量和作用時間密切相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：乙醇 海馬 神經(jīng)元核蛋白 激光掃描共聚焦顯微鏡
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：D919
【目錄】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-12
• 引言12-15
• 材料與方法15-22
• 1. 實驗材料15-18
• 2. 實驗方法18-22
• 實驗結(jié)果22-25
• 討論25-30
• 結(jié)論30-31
• 附圖31-43
• 綜述43-55
• 參考文獻(xiàn)55-64
• 個人簡歷64-65
• 致謝65

【參考文獻(xiàn)】

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

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  本文關(guān)鍵詞：急性乙醇中毒對大鼠海馬形態(tài)影響的激光掃描共聚焦顯微鏡觀察，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：396732