大麻及其主要代謝物集成檢測方法的研究與應(yīng)用
本文關(guān)鍵詞:大麻及其主要代謝物集成檢測方法的研究與應(yīng)用,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的:建立人體生物樣本(尿樣、血樣)中大麻以及代謝物集成檢測技術(shù)和方法。方法:1.通過膠體金法對可疑生物樣本進(jìn)行初篩。2.檢材(尿、血)經(jīng)水解后制成弱酸性水容液,加入THC-D3和THC-COOH-D3試劑作為內(nèi)標(biāo),采用固相萃取(SPE)方法提取,與硅烷化試劑BSTFA(含1%TMCS)進(jìn)行衍生化后,在氣質(zhì)聯(lián)用儀中進(jìn)行測定。3.對比標(biāo)準(zhǔn)品,以相對保留時間(RRT)和質(zhì)譜圖,對生物檢材定性。以待測組分與內(nèi)標(biāo)峰面積比值作為縱坐標(biāo),系列標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度作為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線來進(jìn)行定量分析。結(jié)果:在血樣中:四氫大麻酚(THC)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、四氫大麻酚酸(THC-COOH)分別在10~80 ng/m L的范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)(R2)0.996 7,平均回收率為91.8%~97%,相對標(biāo)準(zhǔn)誤差(RSD)為0.59%~1.8%。5例血樣THC含量分別為12、19、13、30、23 ng/m L。3例血樣CBN含量分別為43、47、56 ng/m L,2例血樣CBN含量40 ng/m L。2例血樣CBD含量分別為55、60 ng/m L,3例血樣CBD含量50 ng/m L。4例血樣THC-COOH含量分別為47、50、61、86 ng/m L,1例血樣THC-COOH含量10 ng/m L。在尿樣中:四氫大麻酚(THC)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)、四氫大麻酚酸(THC-COOH)分別在10~400 ng/m L的范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)(R2)0.997 4,平均回收率為93.1%~99.3%,相對標(biāo)準(zhǔn)誤差(RSD)為0.27%~1.16%,5例尿樣中由于大部分THC酸化形成THC-COOH,因此沒有THC或者濃度達(dá)不到最低檢出限。1例尿樣CBN含量為41 ng/m L,1例尿樣CBN含量40 ng/m L,3例尿樣CBN含量10 ng/m L。3例尿樣CBD含量分別為71、56、50 ng/m L,1例尿樣CBD含量50 ng/m L,1例尿樣CBD含量15 ng/m L。5例尿樣THC-COOH含量分別為88.4、99、53、47、65 ng/m L。結(jié)論:該方法簡便、準(zhǔn)確,可同時檢測與定量四氫大麻酚(THC)、四氫大麻酚酸(THC-COOH)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)等大麻有效成分。
【關(guān)鍵詞】:GC-MS 大麻 大麻代謝物 衍生化 固相萃取
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:D919
【目錄】:
- 中英文縮略詞對照表5-8
- 摘要8-9
- ABSTRACT9-11
- 前言11-17
- 材料與方法17-22
- 1 材料17
- 1.1 標(biāo)準(zhǔn)品及試劑17
- 1.2 樣品17
- 1.3 儀器17
- 2 方法17-22
- 2.1 技術(shù)思路17-18
- 2.2 分析實驗操作步驟18
- 2.3 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)檢測條件18
- 2.4 標(biāo)準(zhǔn)品及內(nèi)標(biāo)的制備18-19
- 2.5 膠體金法檢測尿液中大麻的檢測方法19
- 2.6 供試樣本的制備19-20
- 2.7 固相萃取和衍生化20
- 2.8 標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限20
- 2.9 待測樣品數(shù)據(jù)處理方法20-22
- 結(jié)果22-34
- 1 免疫法結(jié)果22-23
- 2 標(biāo)準(zhǔn)溶液系列在GC-MS法檢測結(jié)果23-28
- 3 大麻主要代謝物的特征性質(zhì)核比及保留時間28-29
- 4 線性關(guān)系的測定29-30
- 5 方法的回收率和精密度30-32
- 6 方法的應(yīng)用32-34
- 討論34-44
- 1 大麻及其代謝物的穩(wěn)定性34-36
- 2 大麻的毒理作用36
- 3 部分檢測技術(shù)的對比36-37
- 4 取材方法37-38
- 5 膠體金快速免疫方法的應(yīng)用38
- 6 GC/MS條件的選擇38-39
- 7 內(nèi)標(biāo)物的選擇39
- 8 色譜柱的選擇39-41
- 9 提取以及衍生化方法的選擇41-42
- 10 法醫(yī)學(xué)意義42-44
- 小結(jié)44-45
- 致謝45-46
- 參考文獻(xiàn)46-50
- 綜述50-56
- 參考文獻(xiàn)54-56
- 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文56-57
- 導(dǎo)師評閱表57
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