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一種應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)快速分選混合樣本白細(xì)胞的方法

發(fā)布時(shí)間:2021-04-18 20:09
  目的建立一種應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)快速分選混合樣本白細(xì)胞的方法。方法收集新鮮血液和唾液,混合前對血液進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù),按照16種不同體積比例進(jìn)行混合,各選取100μL混合液,進(jìn)行紅細(xì)胞裂解和抗人CD45抗體細(xì)胞染色,應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分選100個(gè)CD45+細(xì)胞,隨后進(jìn)行PCR復(fù)合擴(kuò)增和基因檢測,結(jié)果用GeneMapper ID-X Software v1.5軟件進(jìn)行分析。結(jié)果當(dāng)混合樣本白細(xì)胞總數(shù)均≥4.88×105時(shí),分選后白細(xì)胞的正確基因座檢出數(shù)≥4;而當(dāng)混合樣本白細(xì)胞總數(shù)均≤2.93×105時(shí),分選后白細(xì)胞的正確基因座檢出數(shù)≤1或者未檢出DNA分型。結(jié)論當(dāng)樣本白細(xì)胞總數(shù)≥4.88×105時(shí),流式細(xì)胞術(shù)可嘗試用于分選混合樣本中的白細(xì)胞。 

【文章來源】:中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2019,34(05)CSCD

【文章頁數(shù)】:3 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 樣本制備和細(xì)胞染色
    1.3 細(xì)胞分析和細(xì)胞分選
    1.4 PCR擴(kuò)增和DNA檢測
2 結(jié)果
3 討論
    3.1 DNA結(jié)果
    3.2 結(jié)果穩(wěn)定性
    3.3 影響因素


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]顯微操作法提取混合斑中精子細(xì)胞方法的探討[J]. 李鑫,胡蘭,郭紅玲,劉志芳,凃政,劉開會(huì),米瑞華.  中國法醫(yī)學(xué)雜志. 2006(05)



本文編號:3146099

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