【摘要】： 第一部分一次性和三重腦震蕩鼠驚跳反射弱刺激抑制變化研究 目的:運用驚跳反射弱刺激抑制(prepulse inhibition of the acoustic startleresponse,PPI)實驗比較研究一次性腦震蕩(pure cerebral concussion,PCC)與多重腦震蕩(multiple cerebral concussion,MCC)大鼠的感覺門控變化情況,以探討MCC的認知損傷的積累效應。方法:用金屬單擺閉合性腦損傷打擊裝置復制大鼠PCC和MCC模型,檢測腦震蕩(cerebral concussion,CC)后大鼠在驚刺激誘發(fā)的驚嚇反射波幅(p值)、前置刺激誘發(fā)的反射波幅(pp值)及驚跳反射弱刺激抑制PPI變化情況。結果:PCC大鼠打擊24小時內p值、pp值降低(P＜0.05),至傷后16天后接近或恢復正常;MCC打擊后24小時內p值、pp值降低(P＜0.05),至傷后28天仍未恢復。CC后PPI與正常對照組相比沒有明顯差異性(P＞0.05)。結論:1.采用金屬單擺式機械打擊裝置能成功建立PCC和MCC大鼠模型且此模型穩(wěn)定性高,重復性強。2.大鼠感覺門控在CC后受損,隨著CC次數增加,損傷持續(xù)時間也增加。 第二部分一次性和三重腦震蕩鼠谷氨酸脫羧酶67變化研究 目的:建立PCC和MCC大鼠模型,通過谷氨酸脫羧酶(glutamic aciddecarboxylase,GAD67)的變化規(guī)律,觀察PCC、MCC大鼠大腦γ-氨基丁酸(Gamma-amino butyric acid,GABA)能神經元、神經纖維變化的規(guī)律。進一步探討CC大鼠認知行為障礙的神經生物學基礎。并探討PCC和MCC是否有損傷積累效應。方法:用自制金屬單擺式閉合性腦損傷打擊裝置復制PCC和?MCC大鼠模型96只,隨機分為PCC大鼠傷后1d、2d、4d、8d、16d、24d和MCC大鼠1d、2d、4d、8d、16d、24d(n=6)十二個實驗組,另設一正常對照組(n=6)。運用抗GAD67抗體進行免疫組化染色,用圖像分析系統測定扣帶回皮質分子層(cg11)、扣帶回皮質外錐體層(cg13)、第一軀體感覺皮質分子層(S1ULp1)、第一軀體感覺皮質外錐體層(S1ULp3)、第一軀體感覺皮質內錐體層(S1ULp5)、梨狀皮質(Pir)、內側隔核(MS)、尾殼核近腦室處(CPU1)、尾殼核遠離腦室處(CPU2)、伏隔核(Acb)、壓部后顆粒細胞b皮質分子層(RSGb1)、壓部后顆粒細胞b皮質分子層(RSGb3)、第一感覺皮質分子層(S1BF1)、第一感覺皮質分子層(S1BF3)、第一感覺皮質分子層(S1BF5)、杏仁核(Aco)、海馬CA1-3、齒狀回下支(DG1)、齒狀回上支(DG2)、丘腦網狀核(Rt)和下丘腦腹內側核(VMH)等23個腦區(qū)GAD67陽性表達物的光密度值,并測定前額葉皮質、頂葉皮質和丘腦網狀核陽性細胞數。結果:(1)GAD67陽性表達物可在鼠腦廣泛的神經元內表達。GAD67陽性細胞主要分布在大腦皮質、丘腦網狀結構等部位,GAD67陽性纖維在腦內分布廣泛。CC后大鼠GAD67陽性表達物呈現先下降后升高的趨勢。(2)PCC大鼠中隔斷面GAD67光密度:cg11、cg13、S1ULp1、S1ULp3、CPU2、Acb等腦區(qū)GAD67光密度在傷后1天降低最為明顯:S1ULp5、Pir、MS、CPU1等腦區(qū)GAD67光密度在傷后8天降低最為明顯。(3)MCC大鼠中隔斷面GAD67光密度:CPU1、CPU2、Acb等腦區(qū)GAD67光密度在傷后2d降低最為明顯;cg11、cg13、S1ULp1、S1ULp3、S1ULp5、Pir、MS等腦區(qū)GAD67光密度在傷后4d降低最為明顯。(4)PCC大鼠海馬斷面GAD67光密度:CA2、CA3、DG1、DG2等腦區(qū)GAD67光密度在傷后1d降低最為明顯;cg11、cg13、S1ULp1、S1ULp3、S1ULp5、Aco、CA1、Rt等腦區(qū)GAD67光密度在傷后8天降低最為明顯;VMH腦區(qū)GAD67光密度在傷后16d降低最為明顯。(5)MCC大鼠海馬斷面GAD67光密度:Aco、CA1-3、DG1、DG2、Rt、VMH等腦區(qū)GAD67光密度在傷后4d降為最低;cg11、cg13、S1ULp1、S1ULp3、S1ULp5等腦區(qū)GAD67光密度在傷后24d降低最為明顯。(6)大鼠大腦皮質GAD67陽性細胞數在腦震蕩后明顯減少,然后逐漸增加至傷后24d組基本正常且MCC降低比PCC降低明顯。前額葉皮質(PFC)GAD67陽性細胞數:PCC組大腦皮質GAD67陽性細胞數在16d降為最低;MCC組大腦皮質GAD67陽性細胞低谷期在8d。頂葉皮質GAD67陽性細胞數:PCC組大鼠大腦皮質GAD67陽性細胞數在8d降為最低;MCC組大鼠大腦皮質GAD67陽性細胞數在4d降為最低。結論:(1)GAD67陽性細胞和陽性纖維在大鼠腦內廣泛分布。GAD67陽性細胞主要分布在大腦皮質、丘腦網狀結構等部位。大鼠GAD67神經元數目呈現下降趨勢,且MCC比PCC要重。(2)CC后,大鼠大腦皮質、CPu、Acb、Pir、MS、CA、DG、Rt、VMH等腦區(qū)GAD67陽性表達出現不同程度的下降,PCC中隔斷面以1d和8d為重,海馬斷面以1d和8d為重;MCC中隔斷面和海馬斷面以傷后4d和24d為重。提示GAD67的傷后變化可能參與了CC后的認知障礙,且這種變化與PPI變化相一致。
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【學位授予單位】：昆明醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2009
【分類號】：R651.15;D919.1

【參考文獻】

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本文編號：2343730