本文選題：法醫(yī)物證學(xué) + 實(shí)時(shí)定量PCR　； 參考：《中國法醫(yī)學(xué)雜志》2008年01期

【摘要】：目的研究Chelex-100法提取的生物檢材DNA用量與復(fù)合STR分型成功率的關(guān)系。方法113份各種生物檢材采用Chelex-100法提取DNA,應(yīng)用Quantifiler人類DNA定量試劑盒在ABI 7500熒光定量PCR儀上進(jìn)行實(shí)時(shí)PCR定量,同時(shí)用Identifiler復(fù)合擴(kuò)增系統(tǒng)在ABI 3100遺傳分析儀上對(duì)這些DNA樣品進(jìn)行STR分型。結(jié)果各種生物檢材提取的DNA濃度分別為:37份濾紙、紗布血痕0.042~5.28ng/μl,16份口腔拭子1.15~4.21ng/μl,18份煙頭0.016~1.46ng/μl,10份肋軟骨0.531~14.40ng/μl,8份肌肉5.75~24.80ng/μl,7份指甲0.788~11.50ng/μl,17份精斑0.79~99.50ng/μl。在建立的8μl擴(kuò)增體系中,根據(jù)上述結(jié)果,調(diào)整用于復(fù)合STR擴(kuò)增的DNA模板量在0.5~3ng之間,大部分樣品可獲得完全的STR分型。結(jié)論Chelex-100法提取的檢材DNA模板用量在0.5~3ng之間可得到有效STR擴(kuò)增,濃度為0.5ng/μl以上的DNA樣品,用小體積模板(1μl)比大體積(3μl)模板擴(kuò)增效果好。
[Abstract]:Objective to study the relationship between the amount of DNA extracted by Chelex-100 and the success rate of compound STR typing.Methods Chelex-100 method was used to extract the DNA from 113 biological samples. Quantifiler human DNA quantitative kit was used for real-time PCR quantification on ABI 7500 fluorescence quantitative PCR instrument. STR typing of DNA samples was carried out by Identifiler multiplex amplification system on ABI 3100 genetic analyzer.Results the concentrations of DNA extracted from various biological samples were: 37 pieces of filter paper, 16 samples of 0.042~5.28ng/ 渭 l, 1.15~4.21ng/ 渭 l, 18 0.016~1.46ng/ 渭 l, 10 0.531~14.40ng/ 渭 l, 8 5.75~24.80ng/ 渭 l, 7 0.788~11.50ng/ 渭 l, 17 0.79~99.50ng/ 渭 l.In the established 8 渭 l amplification system, according to the above results, adjusting the amount of DNA template used for compound STR amplification between 0.5~3ng, most samples can obtain complete STR typing.Conclusion the effective STR amplification can be obtained when the amount of DNA template extracted by Chelex-100 method is between 0.5~3ng. The DNA sample with the concentration of more than 0.5ng/ 渭 l can be amplified with 1 渭 l of small volume template than with 3 渭 l of large volume template.
【作者單位】： 廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所 廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所 廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所 南方醫(yī)科大學(xué)廣東廣州 廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所 廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所 廣州市刑事科學(xué)技術(shù)研究所
【分類號(hào)】：D919

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本文編號(hào)：1751917