本文關(guān)鍵詞：捏脊療法對頸椎病模型大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞外基質(zhì)及基質(zhì)金屬蛋白酶的影響

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【摘要】：目的：觀察捏脊療法對頸椎病模型大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞外基質(zhì)代謝及MMPs/TIMPs的影響。方法：40只健康的SD大鼠,雌雄各半,隨機(jī)分為假手術(shù)對照組(簡稱假手術(shù)組)10只,造模組30只。造模組參照動靜力失衡性頸椎間盤退變的造模方法進(jìn)行造模；假手術(shù)組僅是將皮膚切開后直接縫合,并沒有切斷肌肉組織,僅當(dāng)作空白對照。造模后的大鼠常規(guī)給予飼養(yǎng)3個月,再采用甲苯胺藍(lán)進(jìn)行染色,通過觀察椎間盤組織的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)改變,來判斷造模的成功與否。確定造模成功后將造模組的大鼠,按照隨機(jī)數(shù)字表法,分成模型對照組(簡稱模型組)、模型捏脊組(捏脊組)、模型莫比可組(簡稱莫比可組),每組各8只。捏脊組大鼠采用自制的松緊帶進(jìn)行固定,捏脊治療手法如下：用一只手固定好大鼠而另一只手的示指與拇指的指腹同時輕輕地將大鼠脊柱兩側(cè)的皮膚提起,從脊中線的尾根部交替地捻動向前一直至“大椎”穴處為一次,總共14次；從第8次開始,用雙手拇指的橈側(cè)緣頂住大鼠的皮膚,示指與中指向前按,三指需同時提拿大鼠皮膚,雙手從脊中線的尾根部交替地捻動向前一直至“大椎”穴,并且要做到捏三提一,力量要以大鼠較為平靜且不吵鬧為度,每天捏脊治療一次,連續(xù)2周為一個療程,間隔2天后,再開始進(jìn)行下一個療程,總共有2個療程。莫比可組每天給予莫比可片按0.7878 mg/kg進(jìn)行灌胃干預(yù),治療的療程與捏脊組一致；假手術(shù)組與模型組只做固定不予其它的治療處理,其固定的時間與捏脊組一致。治療結(jié)束后,取椎間盤,通過免疫組織化學(xué)法檢測頸椎間盤軟骨細(xì)胞內(nèi)MMP-1、MMP-3、MMP-13,TIMP-1, COL-Ⅱ的表達(dá),采用Western blot半定量檢測法檢測椎間盤軟骨細(xì)胞內(nèi)的ECM蛋白表達(dá)水平。結(jié)果：(1)甲苯胺藍(lán)染色：在假手術(shù)組中,軟骨終板的染色呈深藍(lán)紫色,軟骨的終板厚度較厚,軟骨細(xì)胞的數(shù)目較多,軟骨細(xì)胞的細(xì)胞外基質(zhì)也較豐富。而在造模組中,軟骨終板的染色變淡,厚度變薄,軟骨細(xì)胞的數(shù)目以及細(xì)胞外基質(zhì)變少。(2)免疫組織化學(xué)檢測：與假手術(shù)組的相比,模型組中MMP-1、MMP-3、MMP-13表達(dá)均升高,COL-Ⅱ、 TIMP-1表達(dá)均降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；與模型組比較,捏脊組與莫比可組中MMP-1、MMP-3、MMP-13的表達(dá)量均減少,COL-Ⅱ、 TIMP-1表達(dá)均升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(3) Western blot檢測：與假手術(shù)組進(jìn)行比較,在模型組中大鼠的椎間盤軟骨組織中ECM蛋白表達(dá)量顯著性降低,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；而捏脊組與莫比可組中的ECM蛋白表達(dá)量較模型組中的均升高,差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論：(1)捏脊療法能夠有效抑制退變的大鼠頸椎間盤軟骨細(xì)胞中MMP-1、MMP-3以及MMP-13的表達(dá)。(2)捏脊療法能夠有效促進(jìn)退變的大鼠頸椎間盤軟骨細(xì)胞中ECM、TIMP-1、COL-Ⅱ蛋白的表達(dá)。(3)捏脊療法可能是通過調(diào)節(jié)了MMPs/TIMPs的平衡從而影響椎間盤軟骨細(xì)胞外基質(zhì)的代謝,進(jìn)而達(dá)到延緩頸椎間盤退變的目的。
【關(guān)鍵詞】：捏脊療法 頸椎病 COL-Ⅱ MMPs/TIMPs ECM
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R244.1;R-332
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-12
• 材料與方法12-19
• 1 實驗材料12-13
• 1.1 實驗動物12
• 1.2 主要實驗儀器12
• 1.3 主要實驗藥物12
• 1.4 主要實驗試劑12-13
• 2 實驗方法13-19
• 2.1 實驗分組13
• 2.2 動物造模13
• 2.3 造模是否成功的驗證13-14
• 2.4 干預(yù)方法14-15
• 2.5 標(biāo)本的采集與處理15
• 2.6 免疫組織化學(xué)法檢測15-16
• 2.7 Western Blot法檢測16-18
• 2.8 統(tǒng)計學(xué)處理18-19
• 結(jié)果19-28
• 1 免疫組化檢測19-26
• 1.1 各組大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞中MMP-1、MMP-3以及MMP-13表達(dá)的比較19-23
• 1.2 各組大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞中COL-Ⅱ表達(dá)的比較23-24
• 1.3 各組大鼠椎間盤軟骨細(xì)胞中TIMP-1表達(dá)的比較24-26
• 2 各組大鼠椎間盤軟骨組織中ECM蛋白表達(dá)的比較26-28
• 討論28-34
• 1 頸椎病的發(fā)病機(jī)制28-29
• 2 捏脊療法治療頸椎病的相關(guān)中醫(yī)依據(jù)29
• 3 捏脊療法治療頸椎病的相關(guān)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)依據(jù)29-30
• 4 細(xì)胞外基質(zhì)對頸椎間盤退變的影響30-31
• 5 MMPs/TIMPs對細(xì)胞外基質(zhì)的影響31-34
• 結(jié)論34
• 不足與展望34-35
• 參考文獻(xiàn)35-39
• 附錄39-40
• 致謝40-41
• 文獻(xiàn)綜述41-45
• 參考文獻(xiàn)43-45
• 作者簡歷45

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本文編號：906355