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對(duì)于細(xì)胞因子多糖五味子多糖的提取純化及其對(duì)腸道免疫功能的影響論文模板

發(fā)布時(shí)間:2016-07-11 17:02

  本文關(guān)鍵詞:五味子多糖的提取純化及其對(duì)腸道免疫功能的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


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摘要:近年來(lái),大量的探討表明五味子多糖具有多種生理保健功能,但是,五味子多糖對(duì)腸道免疫功能的影響尚不清楚。本探討從五味子干果為主要原料,采取超濾的辦法制備了具有較高純度的五味子精多糖,探討了五味子精多糖誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,從及對(duì)小鼠腸道免疫調(diào)節(jié)的意義。主要探討結(jié)果如下:1.確定五味子精多糖的最佳制備工藝。五味子干粉脫脂后,于55℃熱水中浸提2h;將提取液通過(guò)100Ku的超濾膜進(jìn)行分離純化,最佳的超濾壓力是0.207Mpa,操作溫度為20℃,,超濾時(shí)間30min膜通量基本穩(wěn)定;超濾液除去蛋白后經(jīng)過(guò)巴氏滅菌和凍干后得到平均分子量為210ku的五味子精多糖。2.將制備的五味子精多糖溶于培養(yǎng)基使終濃度分別為0、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2mg/L意義于SMMC7721肝癌細(xì)胞,結(jié)果顯示,在短時(shí)間處理(24~48h)時(shí),五味子多糖對(duì)肝癌細(xì)胞沒(méi)有明顯的抑制生長(zhǎng)意義(P>0.05),較高劑量在24h時(shí)甚至有一定推動(dòng)增殖意義,在較長(zhǎng)處理時(shí)間(72h)時(shí),五味子多糖體現(xiàn)明顯的肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)抑制和推動(dòng)凋亡意義(P<0.05),其劑量大小與細(xì)胞生存率呈負(fù)相關(guān)。吖啶橙、溴化乙錠染色多糖意義肝癌細(xì)胞72h顯示,空白組細(xì)胞幾乎都呈綠色,形態(tài)完整,貼壁生長(zhǎng),多糖濃度0.05、0.5、2.0mg/L組別的橙黃色死亡細(xì)胞數(shù)量顯著增多,細(xì)胞的形態(tài)和大小雜亂無(wú)章,貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞邊緣變得模糊不清,細(xì)胞發(fā)生凋亡現(xiàn)象,并與劑量呈正相關(guān),進(jìn)一步說(shuō)明了五味子精多糖能夠抑制SMMC7721肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。3.分別利用高(500mg/Kg d)、中(200mg/Kg d)、低劑量(50mg/Kg d)五味子多糖粉對(duì)BALB/c小鼠進(jìn)行灌胃15天。小腸腸液中SIgA、小腸組織中各主要細(xì)胞因子含量經(jīng)過(guò)前7天左右波動(dòng)期后,基本處于穩(wěn)定。在前七天免疫應(yīng)答高峰期,IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10等細(xì)胞因子先后出現(xiàn)峰值,小鼠腸道黏膜免疫體系先后出現(xiàn)細(xì)胞免疫占主導(dǎo)地位、體液免疫占主導(dǎo)地位后免疫應(yīng)答逐漸趨緩。10~15天長(zhǎng)期灌胃結(jié)果顯示:五味子精多糖可從推動(dòng)腸道SIgA的分泌量,其SIgA的含量與劑量呈正相關(guān)。流式細(xì)胞儀對(duì)腸系膜淋巴結(jié)(MLN)的T淋巴細(xì)胞表型分析顯示,高、中劑量組均能明顯增大CD3+CD4+與CD3+CD8+比例,結(jié)合之前細(xì)胞因子和SIgA含量變化,推斷高、中劑量的五味子多糖

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    本文編號(hào):69038

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