本文關鍵詞：五味子多糖的提取純化及其對腸道免疫功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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談細胞因子五味子多糖的提取純化及其對腸道免疫功能的影響碩士論文答辯技巧

論文導讀：

摘要：近年來，大量的探討表明五味子多糖具有多種生理保健功能，但是，五味子多糖對腸道免疫功能的影響尚不清楚。本探討從五味子干果為主要原料，采取超濾的辦法制備了具有較高純度的五味子精多糖，探討了五味子精多糖誘導腫瘤細胞凋亡，從及對小鼠腸道免疫調(diào)節(jié)的意義。主要探討結果如下：1.確定五味子精多糖的最佳制備工藝。五味子干粉脫脂后，于55℃熱水中浸提2h；將提取液通過100Ku的超濾膜進行分離純化，最佳的超濾壓力是0.207Mpa，操作溫度為20℃，超濾時間30min膜通量基本穩(wěn)定；超濾液除去蛋白后經(jīng)過巴氏滅菌和凍干后得到平均分子量為210ku的五味子精多糖。2.將制備的五味子精多糖溶于培養(yǎng)基使終濃度分別為0、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2mg/L意義于SMMC7721肝癌細胞，結果顯示，在短時間處理（24~48h）時，五味子多糖對肝癌細胞沒有明顯的抑制生長意義(P＞0.05)，較高劑量在24h時甚至有一定推動增殖意義，在較長處理時間（72h）時，五味子多糖體現(xiàn)明顯的肝癌細胞生長抑制和推動凋亡意義(P＜0.05)，其劑量大小與細胞生存率呈負相關。吖啶橙、溴化乙錠染色多糖意義肝癌細胞72h顯示，空白組細胞幾乎都呈綠色，形態(tài)完整，貼壁生長，多糖濃度0.05、0.5、2.0mg/L組別的橙黃色死亡細胞數(shù)量顯著增多，細胞的形態(tài)和大小雜亂無章，貼壁生長的細胞邊緣變得模糊不清，細胞發(fā)生凋亡現(xiàn)象，并與劑量呈正相關，進一步說明了五味子精多糖能夠抑制SMMC7721肝癌細胞的生長。3.分別利用高（500mg/Kg d）、中（200mg/Kg d）、低劑量（50mg/Kg d）五味子多糖粉對BALB/c小鼠進行灌胃15天。小腸腸液中SIgA、小腸組織中各主要細胞因子含量經(jīng)過前7天左右波動期后，基本處于穩(wěn)定。在前七天免疫應答高峰期，IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10等細胞因子先后出現(xiàn)峰值，小鼠腸道黏膜免疫體系先后出現(xiàn)細胞免疫占主導地位、體液免疫占主導地位后免疫應答逐漸趨緩。10~15天長期灌胃結果顯示：五味子精多糖可從推動腸道SIgA的分泌量，其SIgA的含量與劑量呈正相關。流式細胞儀對腸系膜淋巴結（MLN）的T淋巴細胞表型分析顯示，高、中劑量組均能明顯增大CD3+CD4+與CD3+CD8+比例，結合之前細胞因子和SIgA含量變化，推斷高、中劑量的五味子多糖

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談細胞因子五味子多糖的提取純化及其對腸道免疫功能的影響碩士論文答辯技巧(2)

論文導讀：

是依靠增多CD3+CD4+表型輔助性T細胞不同亞群細胞數(shù)量來增大該比例的，其中高劑量組可從增多Th2亞群的細胞數(shù)量和活性，中劑量組可從增多Th1、Th2亞群細胞活性和數(shù)量，低劑量組的CD3+CD4+與CD3+CD8+比例同對照組差別不明顯(P＞0.05)，但可從增多Th1、Th2細胞的活性。4.中劑量（200mg/Kg d）、低劑量（50mg/Kg d）五味子多糖灌胃可從推動腸道黏膜免疫水平，同時提升體液免疫和細胞免疫能力，，保持腸道免疫平衡，對抵抗外界異物感染、保證機體腸道健康最為有利；高劑量組（500mg/Kg d）可提升腸道體液免疫水平，但造成了腸道細胞免疫受到抑制，機體對外界異物不敏感，不利于機體腸道健康。 關鍵詞：五味子