本文關(guān)鍵詞：五味子多糖的提取純化及其對(duì)腸道免疫功能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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談細(xì)胞因子五味子多糖的提取純化及其對(duì)腸道免疫功能的影響碩士論文答辯技巧

論文導(dǎo)讀：

摘要：近年來，大量的探討表明五味子多糖具有多種生理保健功能，但是，五味子多糖對(duì)腸道免疫功能的影響尚不清楚。本探討從五味子干果為主要原料，采取超濾的辦法制備了具有較高純度的五味子精多糖，探討了五味子精多糖誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，從及對(duì)小鼠腸道免疫調(diào)節(jié)的意義。主要探討結(jié)果如下：1.確定五味子精多糖的最佳制備工藝。五味子干粉脫脂后，于55℃熱水中浸提2h；將提取液通過100Ku的超濾膜進(jìn)行分離純化，最佳的超濾壓力是0.207Mpa，操作溫度為20℃，超濾時(shí)間30min膜通量基本穩(wěn)定；超濾液除去蛋白后經(jīng)過巴氏滅菌和凍干后得到平均分子量為210ku的五味子精多糖。2.將制備的五味子精多糖溶于培養(yǎng)基使終濃度分別為0、0.05、0.1、0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2mg/L意義于SMMC7721肝癌細(xì)胞，結(jié)果顯示，在短時(shí)間處理（24~48h）時(shí)，五味子多糖對(duì)肝癌細(xì)胞沒有明顯的抑制生長意義(P＞0.05)，較高劑量在24h時(shí)甚至有一定推動(dòng)增殖意義，在較長處理時(shí)間（72h）時(shí)，五味子多糖體現(xiàn)明顯的肝癌細(xì)胞生長抑制和推動(dòng)凋亡意義(P＜0.05)，其劑量大小與細(xì)胞生存率呈負(fù)相關(guān)。吖啶橙、溴化乙錠染色多糖意義肝癌細(xì)胞72h顯示，空白組細(xì)胞幾乎都呈綠色，形態(tài)完整，貼壁生長，多糖濃度0.05、0.5、2.0mg/L組別的橙黃色死亡細(xì)胞數(shù)量顯著增多，細(xì)胞的形態(tài)和大小雜亂無章，貼壁生長的細(xì)胞邊緣變得模糊不清，細(xì)胞發(fā)生凋亡現(xiàn)象，并與劑量呈正相關(guān)，進(jìn)一步說明了五味子精多糖能夠抑制SMMC7721肝癌細(xì)胞的生長。3.分別利用高（500mg/Kg d）、中（200mg/Kg d）、低劑量（50mg/Kg d）五味子多糖粉對(duì)BALB/c小鼠進(jìn)行灌胃15天。小腸腸液中SIgA、小腸組織中各主要細(xì)胞因子含量經(jīng)過前7天左右波動(dòng)期后，基本處于穩(wěn)定。在前七天免疫應(yīng)答高峰期，IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10等細(xì)胞因子先后出現(xiàn)峰值，小鼠腸道黏膜免疫體系先后出現(xiàn)細(xì)胞免疫占主導(dǎo)地位、體液免疫占主導(dǎo)地位后免疫應(yīng)答逐漸趨緩。10~15天長期灌胃結(jié)果顯示：五味子精多糖可從推動(dòng)腸道SIgA的分泌量，其SIgA的含量與劑量呈正相關(guān)。流式細(xì)胞儀對(duì)腸系膜淋巴結(jié)（MLN）的T淋巴細(xì)胞表型分析顯示，高、中劑量組均能明顯增大CD3+CD4+與CD3+CD8+比例，結(jié)合之前細(xì)胞因子和SIgA含量變化，推斷高、中劑量的五味子多糖

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談細(xì)胞因子五味子多糖的提取純化及其對(duì)腸道免疫功能的影響碩士論文答辯技巧(2)

論文導(dǎo)讀：

是依靠增多CD3+CD4+表型輔助性T細(xì)胞不同亞群細(xì)胞數(shù)量來增大該比例的，其中高劑量組可從增多Th2亞群的細(xì)胞數(shù)量和活性，中劑量組可從增多Th1、Th2亞群細(xì)胞活性和數(shù)量，低劑量組的CD3+CD4+與CD3+CD8+比例同對(duì)照組差別不明顯(P＞0.05)，但可從增多Th1、Th2細(xì)胞的活性。4.中劑量（200mg/Kg d）、低劑量（50mg/Kg d）五味子多糖灌胃可從推動(dòng)腸道黏膜免疫水平，同時(shí)提升體液免疫和細(xì)胞免疫能力，，保持腸道免疫平衡，對(duì)抵抗外界異物感染、保證機(jī)體腸道健康最為有利；高劑量組（500mg/Kg d）可提升腸道體液免疫水平，但造成了腸道細(xì)胞免疫受到抑制，機(jī)體對(duì)外界異物不敏感，不利于機(jī)體腸道健康。 關(guān)鍵詞：五味子