本文關(guān)鍵詞：電針對神經(jīng)病理痛模型大鼠脊髓興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運體的影響

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【摘要】：電針鎮(zhèn)痛是用脈沖電,刺激特定穴位代替捻針操作而達(dá)到鎮(zhèn)痛作用的現(xiàn)代方法。我國獸醫(yī)針刺鎮(zhèn)痛的應(yīng)用與研究起始于20世紀(jì)60年代,它被運用于各種類型手術(shù)中的止痛,可克服藥物對心臟和呼吸抑制的缺陷。針刺不僅對急性疼痛有很好的效果,而且對慢性疼痛也有較好的療效。神經(jīng)病理痛性疼痛是由于神經(jīng)系統(tǒng)病變引起的慢性疼痛,其主要癥狀可以分為刺激依賴性(持續(xù)性疼痛和自發(fā)痛)和非刺激依賴性(痛覺過敏和痛覺超敏)。由于神經(jīng)病理性疼痛導(dǎo)致中樞可塑性改變及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)和活性物質(zhì)相互作用的復(fù)雜性,針刺治療神經(jīng)病理性疼痛的中樞機制尚未闡明清楚。谷氨酸是哺乳動物神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)一種重要的神經(jīng)遞質(zhì),對神經(jīng)元有極強的興奮作用,故也稱為興奮性氨基酸。興奮性氨基酸神經(jīng)元和突觸廣泛分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),尤其是海馬回、大腦回外層和脊髓灰質(zhì),參與中樞疼痛感覺的傳導(dǎo)。有文獻(xiàn)報道,興奮性氨基酸在中樞敏化和脊髓傳導(dǎo)轉(zhuǎn)化方面起到關(guān)鍵作用。神經(jīng)損傷導(dǎo)致感覺傳入纖維興奮性氨基酸的釋放增加,中樞神經(jīng)谷氨酸受體被激活,神經(jīng)元興奮性增加并激活膠質(zhì)細(xì)胞。谷氨酸轉(zhuǎn)運體是消除細(xì)胞外液谷氨酸的唯一途徑,對興奮性信號的終止以及保護神經(jīng)細(xì)胞免受興奮性毒性損傷具有重要意義。谷氨酸轉(zhuǎn)運體被報道與慢性疼痛相關(guān)。已發(fā)現(xiàn)的高親和力谷氨酸轉(zhuǎn)運體有五種亞型,清除累積的谷氨酸主要由氨酸天冬氨酸轉(zhuǎn)運體(GLAST)和谷氨酸轉(zhuǎn)運體-1(GLT-1)完成。為了探索GLAST和GLT-1參與針刺治療神經(jīng)病理性疼痛的機制,54只雌性SD大鼠被隨機分為三組,對照組(control)、模型組(SNI)和模型+電針組(SNI+EA)。模型組和模型+電針組通過坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷手術(shù)制作疼痛模型,對照組做假手術(shù)。手術(shù)后第8天開始,對模型+電針組進行電針治療,取“足三里”和“三陰交”穴,2Hz,每次持續(xù)30min,每兩天一次,共電針7次。采用觸覺測痛儀測定手術(shù)前、手術(shù)后第7、8、14和20天各組大鼠手術(shù)側(cè)后肢機械觸痛閾。每組在手術(shù)后第8、14和20天取6只大鼠,斷頸處死后采集腰部脊髓4-6段,采用熒光定量PCR和免疫印跡方法檢測大鼠脊髓GLAST和GLT-1表達(dá)量的變化水平。另取24只雌性SD大鼠,隨機分為四組,電針組(EA)、電針+注射谷氨酸轉(zhuǎn)運體抑制劑5μg組(EA+PDC5)、電針+注射谷氨酸轉(zhuǎn)運體抑制劑10μg組(EA+PDC10)和電針注射谷氨酸轉(zhuǎn)運體抑制劑20μg組(EA+PDC20)。所有大鼠制作神經(jīng)病理痛模型并進行鞘內(nèi)置管,術(shù)后第8天開始,按上述方法電針,電針前30分鐘,鞘內(nèi)注射不同劑量PDC,采用觸覺測痛儀測定手術(shù)前、手術(shù)后第7、8、14和20天各組大鼠術(shù)側(cè)后肢機械觸痛閾,觀察不同劑量PDC對電針鎮(zhèn)痛效果的影響。結(jié)果顯示,SNI大鼠痛閾在手術(shù)7天后顯著低于control組(p0.05);SNI+EA組大鼠的痛閾于14d和20d顯著高于SNI組(p0.05),并和control組沒有顯著差異(p0.05),表明神經(jīng)損傷后大鼠患肢出現(xiàn)痛覺超敏而電針能提高神經(jīng)病理性疼痛大鼠的痛閾并呈現(xiàn)出累加鎮(zhèn)痛效應(yīng)。實驗過程中,各組之間GLAST和GLT-1的mRNA水平變化沒有顯著差異。在8d、14d和20d,SNI組大鼠GLAST和GLI-1蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著低于control組大鼠(p0.05)。SNI+EA組大鼠GLAST和GLT-1蛋白質(zhì)表達(dá)水平在8d和SNI組沒有顯著差異(p0.05),在14d和20d高于SNI組(p0.05)。顯示電針能夠顯著抑制GLAST和GLT-1在神經(jīng)病理痛模型中的下調(diào)趨勢。鞘內(nèi)注射PDC結(jié)果顯示,電針前注射10μg或20μg PDC組大鼠痛閾顯著低于不注射或注射5μg PDC組大鼠,說明PDC對電針鎮(zhèn)痛效應(yīng)有逆轉(zhuǎn)作用,并存在劑量依賴性,進一步證明GLAST和GLT-1參與電針治療神經(jīng)病理性疼痛。本研究通過坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷手術(shù)建立大鼠神經(jīng)病理性疼痛模型,探討電針對大鼠痛閾以及GLAST和GLT-1表達(dá)水平的影響,表明電針能有效緩解神經(jīng)病理性疼痛并增加脊髓谷氨酸轉(zhuǎn)運體蛋白質(zhì)的表達(dá)。該研究有助于揭示電針的鎮(zhèn)痛機制,促進神經(jīng)科學(xué)的發(fā)展。
【關(guān)鍵詞】：神經(jīng)病理性疼痛 電針 谷氨酸 谷氨酸轉(zhuǎn)運體 左旋-吡咯烷-2-4二羧酸
【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R245;R-332
【目錄】：

• 摘要7-9
• Abstract9-12
• 縮略語表12-13
• 1 前言13-22
• 1.1 文獻(xiàn)綜述13-20
• 1.1.1 神經(jīng)病理性疼痛研究進展13-14
• 1.1.2 神經(jīng)病理性疼痛的治療14-16
• 1.1.3 電針鎮(zhèn)痛機制研究進展16-17
• 1.1.4 電針治療神經(jīng)病理性疼痛的研究進展17-18
• 1.1.5 谷氨酸受體與疼痛18-19
• 1.1.6 谷氨酸轉(zhuǎn)運體與疼痛19-20
• 1.2 研究思路20
• 1.3 研究內(nèi)容20-21
• 1.3.1 神經(jīng)病理性疼痛模型的建立20
• 1.3.2 電針對神經(jīng)病理性疼痛大鼠機械觸痛閾的影響20-21
• 1.3.3 電針對神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓GLAST和GLT-1 表達(dá)水平的影響21
• 1.3.4 谷氨酸轉(zhuǎn)運體抑制劑對電針治療神經(jīng)病理性疼痛大鼠的影響21
• 1.4 研究目的及意義21
• 1.5 研究創(chuàng)新點21-22
• 2 材料與方法22-33
• 2.1 主要藥品試劑22-23
• 2.2 主要儀器與設(shè)備23-24
• 2.3 主要溶液及試劑的配置24
• 2.4 試驗動物的準(zhǔn)備24
• 2.5 試驗方法24-32
• 2.5.1 試驗設(shè)計24-25
• 2.5.2 動物模型制備25-26
• 2.5.3 電針方法26-27
• 2.5.4 大鼠機械痛閾的測定27-28
• 2.5.5 脊髓樣品總RNA及蛋白提取28-29
• 2.5.6 谷氨酸轉(zhuǎn)運體基因表達(dá)水平測定29-30
• 2.5.7 谷氨酸轉(zhuǎn)運體蛋白表達(dá)水平測定30-31
• 2.5.8 鞘內(nèi)置管及注射31-32
• 2.6 統(tǒng)計學(xué)分析32-33
• 3 結(jié)果與分析33-37
• 3.1 大鼠患側(cè)足底觸覺痛敏的變化33-34
• 3.2 大鼠脊髓GLAST和GLT-1 基因水平的變化34
• 3.3 大鼠脊髓GLAST和GLT-1 蛋白表達(dá)水平的變化34-35
• 3.4 鞘內(nèi)注射PDC對電針鎮(zhèn)痛效果的影響35-37
• 4 討論37-42
• 4.1 疼痛模型的建立37
• 4.2 電針穴位及參數(shù)的選擇37-39
• 4.3 電針對脊髓谷氨酸轉(zhuǎn)運體表達(dá)水平的影響39-40
• 4.4 谷氨酸轉(zhuǎn)運體抑制劑對電針鎮(zhèn)痛效應(yīng)的影響40-42
• 5 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-52
• 附錄52-53
• 致謝53

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：518151