慢性腎功能衰竭(chronic renal failure,CRF)起病緩慢,病程長,進(jìn)展難以逆轉(zhuǎn),并發(fā)癥多樣,治療困難,醫(yī)療費(fèi)用昂貴,已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人民健康和生命的常見病。因此,增加有關(guān)慢性腎衰竭的研究,豐富治療手段,對于延緩疾病進(jìn)程和提高患者生活品質(zhì)具有重要意義。懸針療法是將中醫(yī)氣功與針刺相結(jié)合而創(chuàng)新形成的一種獨(dú)特療法,具有無痛、無創(chuàng)、不受禁刺或慎刺限制等優(yōu)點(diǎn)。本研究采用懸針療法刺激大鼠“腎俞”穴,觀察懸針療法對于大鼠腎臟功能、貧血損害及腎間質(zhì)纖維化相關(guān)因子的影響,探究懸針療法對慢性腎衰的防治作用。目的本實驗以腺嘌呤灌胃法建立的慢性腎衰模型大鼠作為研究對象,尿毒清顆粒作為陽性對照組,“腎俞”穴為治療穴位,在造模開始的同時對大鼠使用懸針療法進(jìn)行治療。觀察懸針療法對大鼠紅細(xì)胞計數(shù)(RBC)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、血紅蛋白(Hb)、血小板(PLT)、血磷(P3+)、血磷(Ca2+)、血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、Smad7和大鼠腎臟病理組織形態(tài)學(xué)的影響,以探究懸針療法對慢性腎衰模型大鼠的防治作用,探討懸針療法延緩模型大鼠慢性腎衰竭進(jìn)展的可能機(jī)制。方法使用隨機(jī)數(shù)字表法將40只清潔級SD大鼠分為正常組、模型組、藥物組和懸針組,每組10只大鼠。將腺嘌呤與蒸餾水混合制成0.25%的腺嘌呤混懸液,按照200mg/kg/d的劑量每日對正常組之外的大鼠進(jìn)行灌胃,連續(xù)28天;藥物組每日上午腺嘌呤混懸液灌胃,下午將尿毒清顆粒溶于蒸餾水制成2.25%溶液,按照2.2g/kg/d的劑量進(jìn)行灌胃,其余組灌胃同等劑量蒸餾水;懸針組每日上午腺嘌呤混懸液灌胃,下午進(jìn)行懸針治療30分鐘。每周稱量各組大鼠體重,實驗結(jié)束后,使用全自動生化分析儀分別檢測大鼠全血RBC、HCT、Hb、PLT,血清P3+、Ca2+、Scr、BUN,免疫組織化學(xué)法檢測大鼠腎組織的TGF-β1和Smad7表達(dá),取腎稱取濕重,腎臟組織進(jìn)行石蠟切片后做常規(guī)HE染色和Masson染色,觀察病理形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果1體重及腎重情況:自第2周開始,模型組、藥物組及懸針組大鼠與正常組大鼠體重出現(xiàn)顯著差異(P0.05),懸針組大鼠的體重除第3周外均明顯高于模型組大鼠(P0.05);與正常組相比,模型組大鼠的腎臟體重比顯著提高(P0.05),懸針組相對模型組顯著降低(P0.05),懸針組與藥物組相較無顯著差異(P0.05)。2全血RBC、HCT、Hb情況:與正常組相比,模型組大鼠的RBC、Hb、HCT均顯著降低(P0.05)。與模型組相比,懸針組的RBC、Hb、HCT均顯著提高(P0.05),懸針組與藥物組相較均無顯著差異(P0.05)。3血清P3+、Ca2+情況:與正常組相比,模型組大鼠血清P3+含量顯著提高(P0.05),Ca2+含量顯著降低(P0.05)。懸針組大鼠的P3+含量顯著降低(P0.05),Ca2+含量顯著升高(P0.05),懸針組與藥物組相較均無顯著差異(P0.05)。4TGF-β1表達(dá)情況:與正常組相比,模型組大鼠腎組織中TGF-β1的AOD明顯升高(P0.01)。與模型組相比,懸針組大鼠的TGF-β1表達(dá)明顯降低(P0.01),懸針組與藥物組相較均無顯著差異(P0.05)。5血清Scr、Bun情況:與正常組相比,模型組大鼠血清Scr、Bun含量顯著提高(P0.05),懸針組大鼠的Scr、Bun顯著降低(P0.05),懸針組與藥物組相較均無顯著差異(P0.05)。6 HE染色切片情況:正常組大鼠腎臟結(jié)構(gòu)完整,腎小球未見萎縮,腎小管、集合管未見擴(kuò)張或萎縮,無纖維組織增生和炎細(xì)胞浸潤。模型組大鼠腎小管黃綠色結(jié)晶沉積及肉芽腫形成、腎小管擴(kuò)張、腎小管變性/壞死、間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤及間質(zhì)纖維化。藥物組大鼠腎臟肉芽腫形成病變程度無明顯減輕,其余病變均略有減輕趨勢。懸針組大鼠腎小管擴(kuò)張、腎小管變性/壞死等病變均有減輕趨勢。7Masson染色切片情況:正常組大鼠腎臟除血管周圍有膠原纖維呈深藍(lán)色染色,組織內(nèi)無明顯藍(lán)色著色。模型組大鼠除血管周圍有膠原纖維呈深藍(lán)色染色外,可見廣泛的間質(zhì)增寬,呈淡藍(lán)色著色,此為間質(zhì)纖維化特殊染色表現(xiàn),其中散在局灶性增生的深藍(lán)色膠原纖維著色。藥物組組織內(nèi)局灶性膠原纖維的增生程度略有減輕,腎間質(zhì)纖維化程度有減輕趨勢。懸針組局灶性膠原纖維的增生程度略有減輕,腎間質(zhì)纖維化程度有減輕趨勢。結(jié)論1懸針療法對腺嘌呤灌胃模型大鼠腎臟具有一定的保護(hù)作用。其一,懸針療法能夠提高模型大鼠體重增長的速度和幅度;其二,懸針療法能夠降低模型大鼠的腎重體重比,降低腎臟肥大指數(shù);其三,通過病理切片可以看出懸針療法能夠改善模型大鼠腎臟病理形態(tài),減輕腎小管結(jié)晶沉積、腎小管擴(kuò)張、腎小管變性/壞死及間質(zhì)纖維化病變。2懸針療法能夠有效提高RBC、HCT、Hb的含量,提示懸針能夠改善腎性貧血狀態(tài),改善腎臟血供。3懸針療法能夠有效降低P3+的含量并提高Ca2+的含量,調(diào)整高磷低鈣的病理狀態(tài),改善鈣磷代謝,降低腎性骨病、心血管疾病等并發(fā)癥的發(fā)生風(fēng)險。4懸針療法可以有效減少TGF-β1在腎臟的表達(dá),減少細(xì)胞外基質(zhì)的沉積,延緩腎間質(zhì)纖維化。5懸針療法能夠有效降低Scr和BUN的含量,提高腎臟功能。6懸針療法對于慢性腎衰竭具有一定程度的防治作用,機(jī)制可能為通過調(diào)節(jié)腎小管和間質(zhì)局部血液的供給,改善腎臟微循環(huán),改善鈣磷代謝,促使腎臟中TGF-β1的表達(dá)較減少,減輕腎間質(zhì)纖維化,使血氧供給的增加與間質(zhì)纖維化的減輕形成良性循環(huán),最終增強(qiáng)腎臟功能,改善患者生活質(zhì)量。
【學(xué)位單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R245;R-332
【部分圖文】：

外的大鼠體重開始與正常組大鼠出現(xiàn)差異（Ｐ＜〇．〇５），懸針組大鼠的體重除第３周外均??明顯高于模型組大鼠（Ｐ＜０．０５）。此外，體重增幅方面，懸針組大鼠增長最為明顯（尸＜０．０５）。??（見表１，表２，圖１，圖２）??表１各組大鼠體重變化的比較（Ｚ±ｓ）??組別?數(shù)量?初始?第一周?第二周?第三周?第四周??正常組?１０?１７７．２０±７．?１３?２５３．３０±１２．０８?３０３．７０±１９．０６?３２７．２０±２２．３４?３６６．?１０±２７．９６??模型組?１０?１７５．?３０±６．?７５?２２１．００±１Ｌ９８＊?２４６．?８０±?１６．?９３＊?２６１．?７０±２２．?０７＊?２７１．９０±２６．?５４＊??藥物組?１０?１７６．７０?土?８．０４?２３０．４０±１１．５１＊?２５８．?００?士?１２．?０７＊?２７１．?００±１６．?１０＊?２８４．?５０±?１２．?７０＊??懸針組?１０?１８１．７０±８．５９?２３５．?１０±１２．７８°?２６５．７０±２１．０６°?２７６．?１０±２１．８４?３００．５０±３２．３０ｓ??注：與正常組相比，＞＜０．０５；與模型組相比，＞＜０．?０５。??４Ｗ?＾??４００?－?嶋繪??ｔＳ第一爾??＊?ｓ?絞第二爾??ｒｌｒｉｌｉ?＝??．—邏ＩＩ?ｍ??正常組?模型經(jīng)?纖組?懸針組??圖１各組大鼠體重變化趨勢??注：與正常組相比

與正常組相比，模型組大鼠的腎臟指數(shù)顯著提高（戶＜〇．〇５）。與模型組相比，懸針??組的腎臟指數(shù)顯著降低（Ｐ＜〇．〇５）。懸針組與藥物組相較無顯著差異（Ｔ＾Ｏ．Ｏ〗）。說明懸??針療法能夠抑制腎臟肥大，具有降低腎臟肥胖指數(shù)的作用。（見表２，圖３）??�。海剩欤�??正常組?鏌型組?藥物ｍ?懸針組??圖３各組大鼠腎臟體重比的比較??４５??

圖５各組大鼠Ｓｍａｄ７積分光密度值的比較??注：與正常組相比，＞＜０．０５；與模型組相比，＞＜０．０５??７各組大鼠血清Ｓｃｒ、Ｂｕｎ檢測結(jié)果??與正常組相比，模型組大鼠血清Ｓｃｒ、Ｂｕｎ含量顯著提高（Ｓｃｒ、Ｂｕｎ顯著降低（Ｐ＜０．０５）。懸針組與藥物組相較均無顯著差１４０?＊??Ｉ?＿?＝＝??Ｉ：?Ｉ?１?（??：■?１?Ｍ?Ｍ??正常組模型組藥物組懸針組??
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本文編號：2854461