目的:通過(guò)觀察云南春燥環(huán)境下實(shí)驗(yàn)小鼠表征、肺臟器指數(shù)、氣管及肺組織形態(tài),以及氣道黏蛋白MUC5ac、纖毛蛋白DPCD含量的變化,分析、探究上述各項(xiàng)指標(biāo)與中醫(yī)“燥勝則干”理論的相關(guān)性。從宏觀和微觀、結(jié)構(gòu)及功能多維度探討云南春燥環(huán)境對(duì)小鼠產(chǎn)生的影響,在一定程度上反證云南春燥動(dòng)物模型的準(zhǔn)確性、可靠性,為進(jìn)一步開展云南春燥實(shí)驗(yàn)研究提供新的模型及評(píng)價(jià)指標(biāo)。方法:將30只昆明種雄性小鼠隨機(jī)分為正常組、模型組及桑杏湯組,每組10只,于云南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物房進(jìn)行飼養(yǎng)與造模。正常組小鼠設(shè)置常溫常濕氣候環(huán)境,普通飼料喂養(yǎng);模型組和桑杏湯組小鼠設(shè)置春燥氣候環(huán)境進(jìn)行干預(yù),以特制辛辣香燥飼料喂養(yǎng);桑杏湯組小鼠于施加因素第一天起開始,每天上午九點(diǎn)進(jìn)行桑杏湯灌胃,正常組小鼠和模型組小鼠不灌胃。每天觀察記錄小鼠體重、飲食、飲水及活動(dòng)狀況,飼養(yǎng)至第14日,小鼠出現(xiàn)被毛枯槁、分叉,爪甲干瘦,尿色發(fā)黃等干燥癥狀,且打斗撕咬痕跡明顯,于第15日進(jìn)行實(shí)驗(yàn)取材。觀察各組小鼠氣管、肺組織形態(tài),以及檢測(cè)各組小鼠氣道黏蛋白MUC5ac、纖毛蛋白DPCD含量的變化。結(jié)果:1.實(shí)驗(yàn)小鼠表征變化正常組小鼠飼養(yǎng)期間精神狀態(tài)良好,少見打斗、撕咬痕跡,爪甲色澤紅潤(rùn)鮮明,皮毛順滑,無(wú)枯槁分叉,尿液質(zhì)清透明;模型組小鼠相比正常組,自干預(yù)因素施加日起,逐漸出現(xiàn)精神煩躁,可見清晰打斗、撕咬痕跡,尾部血痕日益明顯,爪甲紫紅無(wú)光澤偏瘦,皮毛干枯,有分叉現(xiàn)象,尿液顏色黃等;桑杏湯組小鼠與模型組相比,精神狀態(tài)尚可,尾部出現(xiàn)少量抓痕,爪甲色紅缺乏光澤,皮毛色澤潤(rùn)澤,偶有分叉,尿液普遍微黃。正常組小鼠飲食飲水正常,起伏平穩(wěn)。與正常組相比,模型組小鼠飲食量減少(P0.05),飲水量明顯增多(P0.01);桑杏湯組小鼠飲食及飲水量雖有變化,但差異均不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,桑杏湯組小鼠飲食量增加(P0.05),飲水量減少(P0.05)。2.實(shí)驗(yàn)小鼠肺臟器指數(shù)及氣管、肺組織形態(tài)變化與正常組相比,模型組小鼠肺臟器指數(shù)明顯降低(P0.01),桑杏湯組小鼠肺臟器指數(shù)比正常組有所降低,但不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);與模型組相比,桑杏湯組小鼠肺臟器指數(shù)升高(P0.05)。正常組小鼠氣管,鏡下見管腔形態(tài)規(guī)則,黏膜層表面完整,纖毛排列有序整齊;肺組織鏡下見結(jié)構(gòu)清晰,肺泡壁完整,無(wú)增生,未見水腫、充血現(xiàn)象。模型組小鼠氣管,鏡下見黏膜層局部出現(xiàn)損傷,纖毛出現(xiàn)明顯脫落、缺失,黏膜下層偶見炎性細(xì)胞,血管壁可見輕微擴(kuò)張、充血;肺組織鏡下見支氣管壁增厚,支氣管黏膜層纖毛排列不齊,毛細(xì)血管略微擴(kuò)張,肺泡壁間質(zhì)出現(xiàn)明顯充血淤血。桑杏湯組小鼠氣管,鏡下見管腔形態(tài)較規(guī)則,黏膜層較為完整,纖毛排列整齊,偶見缺失;肺組織鏡下見氣道結(jié)構(gòu)清晰,支氣管形態(tài)規(guī)則,毛細(xì)血管壁輕微增厚,肺泡壁間質(zhì)存在輕度充血現(xiàn)象。3.實(shí)驗(yàn)小鼠氣道黏蛋白MUC5ac含量變化相比于正常組,模型組實(shí)驗(yàn)小鼠MUC5ac含量減少明顯(P0.01);桑杏湯組小鼠MUC5ac含量雖有所變化,但差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。與模型組比較,桑杏湯組實(shí)驗(yàn)小鼠MUC5ac含量升高(P0.05)。4.實(shí)驗(yàn)小鼠氣道纖毛蛋白DPCD含量變化與正常組相比,模型組小鼠蛋白含量明顯減少,桑杏湯組小鼠DPCD與正常組比較含量較少,與模型組相比明顯增多。小鼠氣道纖毛蛋白DPCD含量由高到低分別為正常組桑杏湯組模型組。結(jié)論:1.云南春燥環(huán)境下,小鼠出現(xiàn)一系列干燥癥狀,如小鼠飲食量下降,飲水量明顯增多。同時(shí)小鼠氣管、肺組織結(jié)構(gòu)受到一定程度損傷,說(shuō)明云南春燥環(huán)境對(duì)小鼠生理功能及組織結(jié)構(gòu)方面均有一定影響。2.在治燥經(jīng)方桑杏湯的干預(yù)下,小鼠各項(xiàng)表征、氣管及肺組織結(jié)構(gòu)得到不同程度改善,根據(jù)“以方測(cè)證”原則,初步反證本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型具備云南春燥證的基本特征。3.在云南春燥環(huán)境干預(yù)下,小鼠氣道黏蛋白MUC5ac、纖毛蛋白DPCD含量明顯降低,經(jīng)桑杏湯干預(yù)后,含量均有所升高。說(shuō)明云南春燥環(huán)境對(duì)小鼠氣道“纖毛-黏液毯”防御屏障有一定影響,MUC5ac和DPCD可考慮作為云南春燥動(dòng)物模型評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行進(jìn)一步探究。
【學(xué)位單位】：云南中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R228;R-332
【部分圖文】：

圖 1正常組 圖 2 模型組 圖 3桑杏湯組4.2 各組實(shí)驗(yàn)小鼠飲食、飲水變化（1）飲食量：各組小鼠每日每 10g 體重飲食量，正常組自飼養(yǎng)之日起至第十四天無(wú)較大波動(dòng)，模型組小鼠每日飲食量逐漸減少，于第五天及第十二天到達(dá)最低值，桑杏湯組小鼠日常飲食偶有波動(dòng)，整體起伏保持平衡。（詳見圖 4）與正常組相比，模型組每 10g 體重小鼠飲食量有明顯減少（P<0.05）,桑杏湯組小鼠每 10g 體重飲食量雖有所變化，但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與模型組相比，桑杏湯組每 10g 小鼠體重飲食量相對(duì)增加且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（詳見表 2，圖 6）2.53量（g）

圖 1正常組 圖 2 模型組 圖 3桑杏湯組4.2 各組實(shí)驗(yàn)小鼠飲食、飲水變化（1）飲食量：各組小鼠每日每 10g 體重飲食量，正常組自飼養(yǎng)之日起至第十四天無(wú)較大波動(dòng)，模型組小鼠每日飲食量逐漸減少，于第五天及第十二天到達(dá)最低值，桑杏湯組小鼠日常飲食偶有波動(dòng)，整體起伏保持平衡。（詳見圖 4）與正常組相比，模型組每 10g 體重小鼠飲食量有明顯減少（P<0.05）,桑杏湯組小鼠每 10g 體重飲食量雖有所變化，但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與模型組相比，桑杏湯組每 10g 小鼠體重飲食量相對(duì)增加且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（詳見表 2，圖 6）2.53量（g）

圖 1正常組 圖 2 模型組 圖 3桑杏湯組4.2 各組實(shí)驗(yàn)小鼠飲食、飲水變化（1）飲食量：各組小鼠每日每 10g 體重飲食量，正常組自飼養(yǎng)之日起至第十四天無(wú)較大波動(dòng)，模型組小鼠每日飲食量逐漸減少，于第五天及第十二天到達(dá)最低值，桑杏湯組小鼠日常飲食偶有波動(dòng)，整體起伏保持平衡。（詳見圖 4）與正常組相比，模型組每 10g 體重小鼠飲食量有明顯減少（P<0.05）,桑杏湯組小鼠每 10g 體重飲食量雖有所變化，但差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；與模型組相比，桑杏湯組每 10g 小鼠體重飲食量相對(duì)增加且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。（詳見表 2，圖 6）2.53量（g）

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本文編號(hào)：2832303