發(fā)布時(shí)間：2020-09-18 16:48

　　 目的:1、通過比較各組VD大鼠治療后Morris水迷宮測(cè)試成績(jī),驗(yàn)證針刺對(duì)血管性癡呆大鼠認(rèn)知記憶能力的影響。2、通過HE染色觀察針刺對(duì)血管性癡呆大鼠腦海馬組織形態(tài)學(xué)的影響。3、檢測(cè)針刺對(duì)血管性癡呆模型大鼠的腦組織海馬區(qū)Ngb和HIF-1α基因轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)的影響。方法:1、國(guó)際公認(rèn)的4-VO方法改良后復(fù)制血管性癡呆大鼠模型。2、選取12只僅暴露4條血管的大鼠作為假手術(shù)組,另外將造模成功的36只大鼠隨機(jī)分為模型組、電針組、藥物組,每組各12只。電針組予以針刺百會(huì)、風(fēng)府穴,同時(shí)予以電針刺激,刺激電流1m A,頻率為2Hz,每天治療1次,留針30分鐘,從治療開始每連續(xù)治療6天后,休息一天,共治療4周。藥物組給予尼莫地平灌胃治療,與電針組同時(shí)開始治療,每天一次,每連續(xù)治療6天后,休息一天,共治療4周。模型組和假手術(shù)組只做抓取、固定而不給予任何治療。3、于造模后、治療后,分別進(jìn)行Morris水迷宮測(cè)試,篩選大鼠及檢測(cè)大鼠認(rèn)知記憶能力的改善。4、使用HE染色觀察海馬神經(jīng)元的形態(tài)學(xué)改變。5、采用Western blot法,進(jìn)行Ngb和HIF-1α蛋白的定性、定量分析(神經(jīng)元:采用神經(jīng)絲蛋白(Neurofilament,NF),星形膠質(zhì)細(xì)胞:采用神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP))。6、采用RT-PCR方法檢測(cè)Ngb、HIF-1α和p53RFPm RNA的表達(dá)。結(jié)果:模型組與假手術(shù)組相比,大鼠水迷宮測(cè)試逃避潛伏期明顯延長(zhǎng),跨越平臺(tái)次數(shù)明顯減少(p0.05);治療后,電針組、藥物組與模型組相比,逃避潛伏期明顯縮短,跨越平臺(tái)次數(shù)明顯增多,差異明顯(p0.05),其中電針組比藥物組改善更加明顯(p0.05)。HE染色于400倍顯微鏡下觀察神經(jīng)細(xì)胞,可見模型組大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量明顯減少,部分神經(jīng)元突起出現(xiàn)病理性縮短甚至消失。電針組、藥物組與模型組大鼠相比海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量增加,排列相對(duì)整齊,細(xì)胞結(jié)構(gòu)及形態(tài)基本正常,細(xì)胞水腫程度較輕,且電針組更明顯。電針組和藥物組較模型組,大鼠腦神經(jīng)元損傷程度明顯減輕,Ngb、HIF-1α、NFm RNA與蛋白的表達(dá)明顯增加,p53m RNA、GFAPm RNA與蛋白的表達(dá)明顯降低,有顯著差異(p0.05);電針組與藥物組相比,改善更加顯著(p0.05)。結(jié)論:針刺“百會(huì)”、“風(fēng)府”能提高血管性癡呆大鼠水迷宮成績(jī),改善其學(xué)習(xí)記憶能力,并能通過促進(jìn)大腦海馬中Ngb、HIF-1α、NF的表達(dá),降低P53、GFAP的含量,來抑制神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡。
【學(xué)位單位】：安徽中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R245
【部分圖文】：

實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果4.1 水迷宮實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果從圖 1 和表 1 中各組大鼠水迷宮測(cè)試逃避潛伏期及跨越平臺(tái)次數(shù)比較可與假手術(shù)組相比，模型組逃避潛伏期明顯延長(zhǎng)，跨越平臺(tái)次數(shù)明顯減少，差統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；與模型組相比，電針組、藥物組大鼠逃避潛伏期明顯縮跨越原平臺(tái)次數(shù)明顯增多，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）；而其中電針組改鼠的學(xué)習(xí)記憶及認(rèn)知效果明顯好于藥物組（p<0.05）。

電針組、藥物組與模型組大鼠相比，海馬神經(jīng)細(xì)胞分布相對(duì)規(guī)則整齊，細(xì)胞水腫減弱，細(xì)胞染色相對(duì)均勻，數(shù)量有一定的增加，且電針組改變比藥物組更明顯。假手術(shù)組 模型組

圖 3 各組大鼠海馬組織中 Ngb、HIF-1α、NF、GFAP 蛋白表達(dá)比較（x±s,n=12）ig3 :Comparison of Ngb, HIF-1α, NF and GFAP protein expression in hippocampus of each g(x±s, n=12)表 2 各組大鼠海馬組織中 Ngb、HIF-1α、NF、GFAP 蛋白表達(dá)比較（x±s，n=12）ab 2: Comparison of Ngb,HIF-1α,NFandGFAP protein expression in hippocampus of each gr（x±s,n=12）組別 nNGB 平均相對(duì)表達(dá)量HIF-1α平均相對(duì)表達(dá)量NF 平均相對(duì)表達(dá)量GFAP表假手術(shù)組 12 0.42±0.02 0.54±0.02 1.36±0.04 0.4模型組 12 0.58±0.02*0.74±0.04*0.51±0.01*1.1電針組 12 1.15±0.04* 1.31±0.03* 1.07±0.02* 0.53藥物組 120.96±0.04* 1.07±0.05* 0.92±0.01* 0.71

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