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針刺內(nèi)關(guān)穴對(duì)異丙腎上腺素誘導(dǎo)心肌肥厚小鼠心臟保護(hù)作用的研究

發(fā)布時(shí)間:2020-08-20 15:40
【摘要】:目的:以交感神經(jīng)調(diào)節(jié)為切入點(diǎn),探討針刺內(nèi)關(guān)穴對(duì)微滲透泵灌注異丙腎上腺素誘導(dǎo)心肌肥厚小鼠的心臟保護(hù)作用及其機(jī)制,為臨床心肌肥厚的治療提供新的方法和理論依據(jù)。方法:1.分組:引購(gòu)75只SPF級(jí)雄性C57BL小鼠,將小鼠按隨機(jī)數(shù)表法分為空白對(duì)照組、心肌肥厚模型組、針刺內(nèi)關(guān)穴處理組、針刺非穴處理組、阿替洛爾陽(yáng)性藥物組,共5組,每組15只。2.造模:除空白對(duì)照組外,異丙腎上腺素(40mg/kg/d)灌注微滲透泵置于小鼠背部皮下,空白對(duì)照組采用同微滲透泵同等大小潔凈塑膠以做假手術(shù)處置。3.處理:(1)針刺內(nèi)關(guān)穴處理組:異氟烷吸入麻醉后,采用0.17 mm×7 mm不銹鋼毫針,直刺小鼠雙側(cè)內(nèi)關(guān)穴,刺入深度為2mm,留針15 min。(2)針刺非穴處理組:異氟烷吸入麻醉后,采用0.17 mm×7 mm不銹鋼毫針直刺小鼠尾根部非穴位分布區(qū)針刺,留針15min。(3)阿替洛爾陽(yáng)性藥物組:異氟烷吸入麻醉15min后,給予阿替洛爾(10mg/kg)水溶液灌服,每日1次。(4)心肌肥厚模型組和空白對(duì)照組:異氟烷吸入麻醉15min,每日1次。各組均連續(xù)處理14天。4.測(cè)定:實(shí)驗(yàn)第1天及第15天,酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(Elisa)法檢測(cè)各組小鼠血清中去甲腎上腺素(NE)的表達(dá)并行組間對(duì)比。實(shí)驗(yàn)第15天,各組小鼠行心率及超聲心動(dòng)圖檢測(cè)小鼠心功能;普通光學(xué)顯微鏡下觀察HE染色與Masson染色后各組小鼠心肌纖維化程度;電學(xué)顯微鏡觀察心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:1.一般狀態(tài)和死亡情況:空白對(duì)照組小鼠一般狀態(tài)良好,呼吸規(guī)律,無(wú)喘促現(xiàn)象。針刺內(nèi)關(guān)穴處理組和阿替洛爾陽(yáng)性藥物組的小鼠一般狀態(tài)較心肌肥厚模型組和針刺非穴處理組小鼠相比,皮毛顏色及光澤度好,呼吸平穩(wěn)未見(jiàn)急促現(xiàn)象;針刺內(nèi)關(guān)穴處理組死亡率較低,心肌肥厚模型組、空白對(duì)照組和阿替洛爾陽(yáng)性藥物組死亡率較高。2.心率:同空白對(duì)照組相比較,心肌肥厚模型組和針刺非穴處理組小鼠心率明顯較高(P0.05),同心肌肥厚模型組相較,針刺內(nèi)關(guān)穴處理組、阿替洛爾陽(yáng)性藥物組間無(wú)明顯差異,不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.超聲心動(dòng)圖:與空白對(duì)照組相比,心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組左室后壁舒張期厚度(LVPWd)、左室后壁收縮末期厚度(LVPWs)均增加(P0.05),與心肌肥厚模型組相比,針刺內(nèi)關(guān)穴處理組阿替洛爾陽(yáng)性藥物組LVPWd和LVPWs值均有所下降(P0.05),各組射血分?jǐn)?shù)(EF)相比較無(wú)顯著性差異(P0.05)。4.普通光學(xué)顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察:心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組與空白對(duì)照組相較心肌組織出現(xiàn)代償性肥大,而針刺內(nèi)關(guān)穴處理組和阿替洛爾陽(yáng)性藥物組的心肌細(xì)胞和肌纖維病變程度明顯小于心肌肥厚模型組。5.各組小鼠血清中去甲腎上腺素(NE)水平:實(shí)驗(yàn)第1天,五組小鼠血清NE水平無(wú)差異(P0.05);實(shí)驗(yàn)第15天,與空白對(duì)照組相比,心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組NE表達(dá)水平較高,其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),與心肌肥厚模型組相比,針刺內(nèi)關(guān)穴處理組和阿替洛爾陽(yáng)性藥物組血液NE表達(dá)水平較低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.針刺內(nèi)關(guān)穴可顯著逆轉(zhuǎn)微滲透泵灌注異丙腎上腺素誘導(dǎo)心肌肥厚小鼠心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變,改善其心肌纖維化程度。2.針刺內(nèi)關(guān)穴對(duì)微滲透泵灌注異丙腎上腺素誘導(dǎo)心肌肥厚小鼠心肌纖維化的逆轉(zhuǎn)及心臟的保護(hù)作用,可能與其抑制交感神經(jīng)活性,減少去甲腎上腺素的釋放有關(guān)。
【學(xué)位授予單位】:黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R245
【圖文】:

小鼠,死亡率,內(nèi)關(guān)穴


如針刺內(nèi)關(guān)穴處理組和藥物組小鼠活躍,且皮毛較晦暗,光澤度不如內(nèi)關(guān)穴處理組和藥物組,偶有幾只小鼠口唇爪甲顏色深紫,且呼吸可急促,正常組小鼠的精神狀態(tài)及活躍度等都較好。死亡情況分析每天觀察記錄各組空白對(duì)照組、心肌肥厚模型組、針刺內(nèi)關(guān)穴處理刺非穴處理組、阿替洛爾陽(yáng)性藥物組小鼠的生命狀態(tài),現(xiàn)記錄如表 1表 1 各組小鼠死亡情況記錄表天數(shù) 1-2d 3-4d 5-6d 7-8d 9-10d 11-12d 13-1空白組模型組內(nèi)關(guān)組非穴組藥物組11002000110000010000000000110011010

心電圖,小鼠,心率,針刺


死亡率分別為 10%、10%、20%。實(shí)及阿替洛爾陽(yáng)性藥物對(duì)照組分別有 1 只小鼠0%。第 7-8 天空白 對(duì)照組 小鼠死 亡 1 只,死了阿替洛爾陽(yáng)性藥物組各組小鼠均有死亡。進(jìn)行的第 15 天,掃描并記錄各組小鼠心電圖型組與針刺非穴治療組小鼠心率較高,阿替處理組和空白對(duì)照組小鼠心率相對(duì)較低。經(jīng)果顯示組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,五組小鼠心多重比較:心肌肥厚模型組、針刺非穴治療,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);針刺內(nèi)關(guān)穴治療白對(duì)照組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);針 性 藥 物 組 與 心 肌 肥 厚 模 型 組 相 比 差 異。各組心率值及心電圖具體情況可見(jiàn)如下:

心電圖,心電圖,小鼠,電圖


圖 3 各組小鼠心電圖注 :A 模 型組 心 電圖 (551 BPM),B 內(nèi) 關(guān)組 心 電圖 (349 BPM),C 非 穴組 心 電圖( 565BPM) ,D 藥物組心 電圖(359 BPM) ,E 空白組心 電圖(390 BPM)4.超聲心動(dòng)圖結(jié)果分析第 15 天各組小鼠進(jìn)行超聲心動(dòng)圖檢測(cè),所得結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行五組單因素方差分析:左室后壁舒張期厚度(LVPWd)經(jīng)方差分析結(jié)果顯示F=6.255,P<0.05,說(shuō)明五組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;左室后壁收縮末期厚度(LVPWs)經(jīng)方差分析結(jié)果顯示 F=17.062,P<0.05,說(shuō)明五組左室后壁收縮末期厚度不全相等,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;心臟射血分?jǐn)?shù) EF、FS 值經(jīng)方差分析結(jié)果分別為 F=1.472, P>0.05(EF);F=1.445,P>0.05(FS),說(shuō)明 EF 與 FS 值五組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。組間比較結(jié)果顯示:與空白對(duì)照組相比,心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組左室后壁舒張期厚度(LVPWd)和左室后壁收縮末期厚度(LVPWs)

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2798144

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