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針刺內關穴對異丙腎上腺素誘導心肌肥厚小鼠心臟保護作用的研究

發(fā)布時間:2020-08-20 15:40
【摘要】:目的:以交感神經調節(jié)為切入點,探討針刺內關穴對微滲透泵灌注異丙腎上腺素誘導心肌肥厚小鼠的心臟保護作用及其機制,為臨床心肌肥厚的治療提供新的方法和理論依據。方法:1.分組:引購75只SPF級雄性C57BL小鼠,將小鼠按隨機數表法分為空白對照組、心肌肥厚模型組、針刺內關穴處理組、針刺非穴處理組、阿替洛爾陽性藥物組,共5組,每組15只。2.造模:除空白對照組外,異丙腎上腺素(40mg/kg/d)灌注微滲透泵置于小鼠背部皮下,空白對照組采用同微滲透泵同等大小潔凈塑膠以做假手術處置。3.處理:(1)針刺內關穴處理組:異氟烷吸入麻醉后,采用0.17 mm×7 mm不銹鋼毫針,直刺小鼠雙側內關穴,刺入深度為2mm,留針15 min。(2)針刺非穴處理組:異氟烷吸入麻醉后,采用0.17 mm×7 mm不銹鋼毫針直刺小鼠尾根部非穴位分布區(qū)針刺,留針15min。(3)阿替洛爾陽性藥物組:異氟烷吸入麻醉15min后,給予阿替洛爾(10mg/kg)水溶液灌服,每日1次。(4)心肌肥厚模型組和空白對照組:異氟烷吸入麻醉15min,每日1次。各組均連續(xù)處理14天。4.測定:實驗第1天及第15天,酶聯免疫吸附實驗(Elisa)法檢測各組小鼠血清中去甲腎上腺素(NE)的表達并行組間對比。實驗第15天,各組小鼠行心率及超聲心動圖檢測小鼠心功能;普通光學顯微鏡下觀察HE染色與Masson染色后各組小鼠心肌纖維化程度;電學顯微鏡觀察心肌細胞的超微結構。結果:1.一般狀態(tài)和死亡情況:空白對照組小鼠一般狀態(tài)良好,呼吸規(guī)律,無喘促現象。針刺內關穴處理組和阿替洛爾陽性藥物組的小鼠一般狀態(tài)較心肌肥厚模型組和針刺非穴處理組小鼠相比,皮毛顏色及光澤度好,呼吸平穩(wěn)未見急促現象;針刺內關穴處理組死亡率較低,心肌肥厚模型組、空白對照組和阿替洛爾陽性藥物組死亡率較高。2.心率:同空白對照組相比較,心肌肥厚模型組和針刺非穴處理組小鼠心率明顯較高(P0.05),同心肌肥厚模型組相較,針刺內關穴處理組、阿替洛爾陽性藥物組間無明顯差異,不具統計學意義(P0.05)。3.超聲心動圖:與空白對照組相比,心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組左室后壁舒張期厚度(LVPWd)、左室后壁收縮末期厚度(LVPWs)均增加(P0.05),與心肌肥厚模型組相比,針刺內關穴處理組阿替洛爾陽性藥物組LVPWd和LVPWs值均有所下降(P0.05),各組射血分數(EF)相比較無顯著性差異(P0.05)。4.普通光學顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察:心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組與空白對照組相較心肌組織出現代償性肥大,而針刺內關穴處理組和阿替洛爾陽性藥物組的心肌細胞和肌纖維病變程度明顯小于心肌肥厚模型組。5.各組小鼠血清中去甲腎上腺素(NE)水平:實驗第1天,五組小鼠血清NE水平無差異(P0.05);實驗第15天,與空白對照組相比,心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組NE表達水平較高,其差異具有統計學意義(P0.05),與心肌肥厚模型組相比,針刺內關穴處理組和阿替洛爾陽性藥物組血液NE表達水平較低,差異具有統計學意義(P0.05)。結論:1.針刺內關穴可顯著逆轉微滲透泵灌注異丙腎上腺素誘導心肌肥厚小鼠心肌細胞形態(tài)學改變,改善其心肌纖維化程度。2.針刺內關穴對微滲透泵灌注異丙腎上腺素誘導心肌肥厚小鼠心肌纖維化的逆轉及心臟的保護作用,可能與其抑制交感神經活性,減少去甲腎上腺素的釋放有關。
【學位授予單位】:黑龍江中醫(yī)藥大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R245
【圖文】:

小鼠,死亡率,內關穴


如針刺內關穴處理組和藥物組小鼠活躍,且皮毛較晦暗,光澤度不如內關穴處理組和藥物組,偶有幾只小鼠口唇爪甲顏色深紫,且呼吸可急促,正常組小鼠的精神狀態(tài)及活躍度等都較好。死亡情況分析每天觀察記錄各組空白對照組、心肌肥厚模型組、針刺內關穴處理刺非穴處理組、阿替洛爾陽性藥物組小鼠的生命狀態(tài),現記錄如表 1表 1 各組小鼠死亡情況記錄表天數 1-2d 3-4d 5-6d 7-8d 9-10d 11-12d 13-1空白組模型組內關組非穴組藥物組11002000110000010000000000110011010

心電圖,小鼠,心率,針刺


死亡率分別為 10%、10%、20%。實及阿替洛爾陽性藥物對照組分別有 1 只小鼠0%。第 7-8 天空白 對照組 小鼠死 亡 1 只,死了阿替洛爾陽性藥物組各組小鼠均有死亡。進行的第 15 天,掃描并記錄各組小鼠心電圖型組與針刺非穴治療組小鼠心率較高,阿替處理組和空白對照組小鼠心率相對較低。經果顯示組間差異有統計學意義,五組小鼠心多重比較:心肌肥厚模型組、針刺非穴治療,有統計學意義(P<0.05);針刺內關穴治療白對照組相比差異無統計學意義(P>0.05);針 性 藥 物 組 與 心 肌 肥 厚 模 型 組 相 比 差 異。各組心率值及心電圖具體情況可見如下:

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圖 3 各組小鼠心電圖注 :A 模 型組 心 電圖 (551 BPM),B 內 關組 心 電圖 (349 BPM),C 非 穴組 心 電圖( 565BPM) ,D 藥物組心 電圖(359 BPM) ,E 空白組心 電圖(390 BPM)4.超聲心動圖結果分析第 15 天各組小鼠進行超聲心動圖檢測,所得結果經統計學軟件進行五組單因素方差分析:左室后壁舒張期厚度(LVPWd)經方差分析結果顯示F=6.255,P<0.05,說明五組差異具有統計學意義;左室后壁收縮末期厚度(LVPWs)經方差分析結果顯示 F=17.062,P<0.05,說明五組左室后壁收縮末期厚度不全相等,差異具有統計學意義;心臟射血分數 EF、FS 值經方差分析結果分別為 F=1.472, P>0.05(EF);F=1.445,P>0.05(FS),說明 EF 與 FS 值五組間無統計學差異。組間比較結果顯示:與空白對照組相比,心肌肥厚模型組、針刺非穴處理組左室后壁舒張期厚度(LVPWd)和左室后壁收縮末期厚度(LVPWs)

【參考文獻】

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