【摘要】：慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)在呼吸系統(tǒng)疾病中較為常見。我國是COPD的高發(fā)地區(qū),40歲以上成年人患病率高達9.9%。慢性阻塞性肺疾病急性加重期(Acute exacerbationchronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)是目前國內(nèi)最常見的致死性呼吸系統(tǒng)疾病之一,多因受到感染誘發(fā),表現(xiàn)為咳嗽、咳痰、喘息等呼吸道癥狀突然加重,嚴(yán)重時可危及生命。西醫(yī)治療該病以抗感染藥物和對癥支持治療為主,療效較為穩(wěn)定,但長期使用吸入類激素藥物可能導(dǎo)致肺部感染風(fēng)險增高,同時存在骨質(zhì)疏松及免疫抑制等不良反應(yīng),限制了其臨床使用。本課題組長期致力于COPD的基礎(chǔ)與臨床研究,目前對COPD的致病機理、病因病機、證候要素和中醫(yī)治療有了系統(tǒng)而深入的研究,但對于該病證型的證候本質(zhì)的認識尚淺顯。本課題與北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院高曉燕教授課題組合作,具備較為完善的代謝組學(xué)分析平臺。因此,本課題采用代謝組學(xué)這一現(xiàn)代新生物科學(xué)研究技術(shù),結(jié)合臨床肺功能、血常規(guī)檢查及癥狀評估等結(jié)果,對AECOPD最常見的痰熱壅肺證進行證候物質(zhì)基礎(chǔ)研究。研究目的:一方面,采用超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(Ultra Performance Liquid chromatography-mass spectrometer,UPLC-MS)技術(shù),研究AECOPD痰熱壅肺證患者血清樣本的代謝產(chǎn)物,探求AECOPD痰熱壅肺證的證候物質(zhì)基礎(chǔ);另一方面,進行中醫(yī)證候?qū)W代謝通路研究,初探AECOPD痰熱壅肺證和非痰熱壅肺證的代謝模式,期望建立一種可用于臨床的中醫(yī)宏觀與西醫(yī)微觀相結(jié)合、中醫(yī)證候觀察與西醫(yī)檢查指標(biāo)相結(jié)合的證候分型方法,為AECOPD中醫(yī)辨證論治提供有效靶點。研究方法:選取北京地區(qū)慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者46例(痰熱壅肺證26例,非痰熱壅肺證20例),身體健康的志愿者10例,獲得受試者知情同意后,收集空腹外周靜脈血2ml,室溫靜置,離心取上層血清,-80℃冰箱儲存,進行超高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析,利用主成分分析、多維分析和單維分析相結(jié)合的辦法,篩選組間差異代謝物(VIP2,p0.05)。通過METLIN、KEGG、LIPID MAPS 和Chemspider篩選化合物結(jié)構(gòu),代入MetPA進行差異代謝物通路分析,通過組間比較,探究AECOPD痰熱壅肺證的證候物質(zhì)基礎(chǔ)。研究結(jié)果:慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者與健康對照組相比較,共發(fā)現(xiàn)53種小分子差異代謝物,主要涉及花生四烯酸代謝、甘油磷脂代謝等9條相關(guān)代謝通路;急性加重期痰熱壅肺證組與非痰熱壅肺證組相比,共發(fā)現(xiàn)50種小分子差異代謝物,主要涉及鞘脂類代謝、甘油磷脂代謝、亞油酸代謝代謝等7條相關(guān)代謝通路。結(jié)論:1、UPLC-MS技術(shù)能夠的較好區(qū)分AECOPD與健康人血清的代謝模式,慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的血清較健康人相比可見多種磷脂、脂肪酸、氨基酸等人體三大能量物質(zhì)的含量發(fā)生變化,主要存在花生四烯酸、甘油磷脂代謝等代謝通路受到擾動。2、AECOPD不同證型之間存在小分子代謝物與代謝通路差異,AECOPD痰熱壅肺證患者血清中主要存在鞘脂類代謝、甘油磷脂代謝等通路紊亂。
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R259
【圖文】：

逑５．邋２分析流程圖逡逑本課題有關(guān)代謝組分析實驗流程如圖２所示：（委托北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院）逡逑ｕ樣品懫集所＾處理逡逑代謝物提取逡逑ＧＣ－ＭＳ邐ＬＣ－ＭＳ邐ＮＭＲ逡逑－邐＊邋■邋—邋Ｚ逡逑…卜０＂＊：邐：邐數(shù)據(jù)懫集與倌患識別逡逑丨．＊邋＿邋．邋Ｉ丨：■、，■？逡逑＾＾＾邐４，邐＾逡逑ＰＣＡ分析邐ＰＬＳ－ＤＡ分析邐Ｃｌｕｓｔｅ汾析邐Ｐａｔｈｗａｙ＾、析邐深度分析逡逑圖２代謝組學(xué)分析流程逡逑１．５．３試驗儀器和試劑逡逑１．邋５．邋３．邋１邋儀器逡逑Ｗａｔｅｒｓ邋Ａｃｑｕｉｔｙ？快速高分辨液相色譜飛行時間聯(lián)用儀ＯＪＰＬＣ）邋；邋Ｘｅｖｏ？邋Ｇ２邋Ｑ／Ｔ０Ｆ逡逑串聯(lián)四極桿飛行時間質(zhì)譜系統(tǒng)；Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ邋Ｓｙｎｅｒｇｙ邋ＵＶ型超純水機；Ｄ－３７５２０邋Ｏｓｔｅｒｏｄｅ逡逑高速冷凍離心機（德國ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ公司）；ＭＴＸ－３０００型多管禍旋振蕩器（杭州米歐逡逑儀器有限公司）逡逑１．５．邐３．邋２邋試劑逡逑甲醇（ＬＣ／ＭＳ級，Ｔｈｅｒｍｏ邋Ｆｉｓｈｅｒ公司）；超純水由Ｖｌｉ丨１邋ｉｐｏｒｅ邋Ｓｙｎｅｒｇｙ邋ＵＶ型超純逡逑水機制備；甲酸（丨；Ｃ／ＭＳ級，Ｔｈｅｒｍｏ邋Ｆｉｓｈｅｒ公司）逡逑１．５．４樣品前處理逡逑血清樣品于４°Ｃ室溫解凍，取解凍后血清樣本１５０叱，加入４５０虬甲醇沉淀蛋白，逡逑渦旋振蕩３０ｓ，靜置１０邋ｍｉｎ，經(jīng)１２０００邋ｒｐｍ，４°Ｃ，離心１０邋ｍｉｎ后，樣本分層，底部沉逡逑淀。�。矗埃斑娚蠈忧逡�，經(jīng)氮氣吹干后，加入ｌ00Ｗ．超純水進行復(fù)溶，渦旋３０邋ｓ，靜逡逑置１０ｍｉｎ

正離子模式血清樣本的基峰離子流圖

負離子模式血清樣本的基峰離子流圖

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李銀紅;蔣英亮;孟廣宇;;中藥穴位離子導(dǎo)入輔助治療小兒急性咳嗽病痰熱壅肺證臨床研究[J];人人健康;2017年02期

2 陳愛萍;王慶云;;中西醫(yī)結(jié)合治療慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰熱壅肺證36例臨床觀察[J];四川中醫(yī);2014年03期

3 石麗;李卉;;小兒咳喘顆粒治療小兒急性支氣管炎(痰熱壅肺證)的療效觀察[J];醫(yī)學(xué)信息(中旬刊);2011年09期

4 王至婉;李建生;陳楚湘;章亮;王翔;李海霞;;基于貝葉斯網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建慢性阻塞性肺疾病急性加重期痰熱壅肺證癥狀與證候間關(guān)聯(lián)模式[J];中醫(yī)雜志;2018年03期

5 夏清青;張宇鋒;周玉皆;;清肺化痰湯治療社區(qū)獲得性肺炎痰熱壅肺證患者的臨床療效觀察[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2016年72期

6 蘇慶珠;楊艷華;王雪飛;李維娜;;急支湯治療社區(qū)獲得性肺炎(痰熱壅肺證)的臨床觀察[J];中國中醫(yī)急癥;2015年08期

7 姜莉蕓;蔡瑞錦;李肖暉;鄧虹;;痰熱清注射液治療全身炎性反應(yīng)綜合征療效觀察[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2008年S1期

8 王鈺;;掃日勞-7膠囊治療咳嗽急性氣管-支氣管炎痰熱壅肺證試驗總結(jié)[J];中國社區(qū)醫(yī)師(醫(yī)學(xué)專業(yè)半月刊);2008年03期

9 車松倍;;中西醫(yī)結(jié)合治療重癥肺炎(痰熱壅肺證)臨床觀察[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2019年02期

10 黃玉瓊;盛學(xué)梅;;中西藥聯(lián)合治療兒童咳嗽變異性哮喘(痰熱壅肺證)臨床觀察[J];黑龍江中醫(yī)藥;2014年03期

相關(guān)會議論文 前7條

1 李建生;王至婉;余學(xué)慶;李素云;鄭四平;孫子凱;張偉;賈新華;王明航;王海峰;;COPD急性加重期證候診斷標(biāo)準(zhǔn)的初步驗證[A];2009年中華中醫(yī)藥學(xué)會內(nèi)科分會全國中醫(yī)內(nèi)科臨床科學(xué)研究專題研討會論文匯編[C];2009年

2 李建生;王至婉;余學(xué)慶;李素云;鄭四平;孫子凱;張偉;賈新華;王明航;王海峰;;COPD急性加重期證候診斷標(biāo)準(zhǔn)的初步驗證[A];第十一次全國中西醫(yī)結(jié)合防治呼吸系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

3 徐文流;余善強;;猴棗牛黃散治療痰熱壅肺證療效總結(jié)[A];第25屆全國中醫(yī)兒科學(xué)術(shù)研討會暨中醫(yī)藥高等教育兒科教學(xué)研究會會議學(xué)術(shù)論文集[C];2008年

4 劉恩順;孫增濤;李燕鈺;魏葆琳;付敏;王強;;清肺消炎丸治療AECOPD(痰熱壅肺證)120例臨床觀察[A];第十一次全國中西醫(yī)結(jié)合防治呼吸系統(tǒng)疾病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

5 孫增濤;李燕鈺;劉恩順;魏葆琳;付敏;王強;;清肺消炎丸治療AECOPD(痰熱壅肺證)120例臨床觀察[A];全國中醫(yī)內(nèi)科肺系病第十四次學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2010年

6 馬秀霞;徐立然;鄭志攀;孟鵬飛;王東旭;唐引引;宋夕元;;清肺培元微丸治療艾滋病肺部感染臨床研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會防治艾滋病分會換屆暨第九次學(xué)術(shù)會論文集[C];2013年

7 王海峰;李建生;余學(xué)慶;李素云;王明航;李亞;;慢性肺源性心臟病呼吸衰竭中醫(yī)常見證候臨床調(diào)查研究[A];第六屆全國中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)理論研究學(xué)術(shù)研討會暨第二屆湖南省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會肝病專業(yè)學(xué)術(shù)年會論文集[C];2010年

相關(guān)重要報紙文章 前1條

1 趙亞男;痰熱壅肺證的護理[N];醫(yī)藥養(yǎng)生保健報;2007年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前2條

1 于會勇;肺脹基礎(chǔ)上的風(fēng)溫肺熱病證候?qū)W規(guī)律研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

2 范華;手指末端生物光子輻射與肺氣虛證、痰熱壅肺證的相關(guān)性研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2016年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 呂明圣;清熱化痰通腑穴位貼敷輔助治療AECOPD痰熱壅肺證療效觀察[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

2 孫瑗;基于UPLC-MS技術(shù)初探AECOPD痰熱壅肺證代謝模式特征[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2019年

3 劉玉清;加味定喘湯治療支氣管哮喘急性發(fā)作期痰熱壅肺證的臨床觀察[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2018年

4 韓迎東;清肺培元顆粒治療艾滋病肺部感染（痰熱壅肺證）的臨床療效觀察[D];河南中醫(yī)藥大學(xué);2018年

5 郭源慧;清金化痰湯治療慢阻肺急性加重期痰熱壅肺證的免疫機制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

6 徐f ;麻杏蔞石湯治療AECOPD痰熱壅肺證臨床療效觀察[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

7 弓雪峰;麻杏石甘加味方離子導(dǎo)入治療痰熱壅肺證肺炎患者療效與安全性評價[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

8 郭f ;清金化痰湯治療慢阻肺急性加重期痰熱壅肺證的調(diào)節(jié)性免疫機制探討[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2018年

9 蔡凌峰;痰熱清聯(lián)合肺泡灌洗對CAP痰熱壅肺證患者NE、MUC5AC的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2017年

10 夏清青;清肺化痰湯治療社區(qū)獲得性肺炎痰熱壅肺證患者的臨床研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2016年

本文編號：2772853