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熱敏灸“中脘”穴對慢性萎縮性胃炎模型大鼠c-myc、survivin的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-07-16 23:30
【摘要】:目的:觀察熱敏灸“中脘”穴對慢性萎縮性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)模型大鼠血清生長激素(GH)、胃蛋白酶原(PG)及胃黏膜原癌基因(c-myc)、存活素(survivin)mRNA表達(dá)的影響,探討熱敏灸治療CAG可能的效應(yīng)機(jī)制,以期為臨床治療提供部分實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將符合要求的66只大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為空白組、造模組?瞻捉M常規(guī)飼養(yǎng),不予任何刺激,造模組采用復(fù)合病因造模法連續(xù)12周造模后,隨機(jī)分為模型組、維酶素組、艾灸組,艾灸組束縛并艾灸“中脘”穴40min,艾灸后按2ml/kg/d灌服0.9%Nacl,并根據(jù)艾灸過程中大鼠尾溫變化分為熱敏灸組和非熱敏灸組;維酶素組束縛40min后灌服等量維酶素;模型組束縛40min后灌服等量0.9%Nacl;各組均1次/d,共28d。治療期間空白組不予任何刺激。觀察記錄各組大鼠一般狀況、體質(zhì)量等變化。治療結(jié)束后,每組隨機(jī)抽取6只,采用ELISA法檢測CAG模型大鼠血清GH、PG表達(dá),QPCR法檢測胃黏膜中的c-myc、survivin mRNA表達(dá),光學(xué)顯微鏡觀察胃黏膜組織病理學(xué)變化。結(jié)果:(1)造模前各組大鼠一般狀況、體質(zhì)量等各觀察指標(biāo)(基線情況)均相當(dāng)。造模結(jié)束后,空白組大鼠一般狀況良好,體質(zhì)量正常增長。造模組大鼠表現(xiàn)為精神不振,活動(dòng)遲鈍,飲食量下降,毛發(fā)枯槁,背部松垮,皮膚黏膜淡白無光,耳廓及尾色蒼白,大便質(zhì)軟或稀溏等。造模組大鼠體質(zhì)量明顯低于空白組大鼠,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。造模后空白組大鼠胃黏膜肉眼觀及光鏡下觀察未見明顯異常;造模組大鼠胃黏膜肉眼可見色暗紅或灰白,黏膜層明顯變薄,彈性減少,皺襞變平,粘液減少,走向紊亂,溝回變淺或消失,肌層變薄;光鏡下可見胃黏膜層變薄、充血明顯,固有層腺體萎縮甚至消失,部分腺體囊性擴(kuò)張,可見淋巴濾泡和炎癥細(xì)胞,可見異形增生。(2)治療前與空白組相比,各組大鼠體質(zhì)量均明顯降低(均P0.01);治療前與模型組相比,非熱敏灸組、熱敏灸組、維酶素組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。各組大鼠治療后與治療前相比,體質(zhì)量均明顯增長(均P0.01)。治療結(jié)束后與空白組相比,模型組大鼠體質(zhì)量仍差距較大(P0.01);與模型組相比,非熱敏灸組、熱敏灸組和維酶素組大鼠體質(zhì)量均明顯增長(均P0.05),但組間相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。治療后各組大鼠一般狀況均有所改善,光鏡下可見空白組胃黏膜無明顯異常,模型組可見胃黏膜變薄,腺腔擴(kuò)大而腺體萎縮,偶可見腸上皮化生,其余各組較模型組均有改善,其中以熱敏灸組改善最為明顯。(3)治療結(jié)束后,模型組血清GH、PGⅠ、PGⅡ表達(dá)及PGR比值較空白組明顯降低(P0.05,P0.01);與模型組相比,非熱敏灸組、熱敏灸組、維酶素組血清GH、PGⅠ、PGⅡ表達(dá)明顯升高(P0.05,P0.01),PGR比值升高但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;熱敏灸組在提高血清GH、PGⅠ表達(dá)方面均優(yōu)于非熱敏灸組及維酶素組(均P0.05)。(4)治療結(jié)束后,模型組胃黏膜c-myc、survivin mRNA表達(dá)較空白組均明顯升高(均P0.01);與模型組相比,非熱敏灸組、熱敏灸組、維酶素組均能降低胃黏膜c-myc、survivin mRNA表達(dá)(均P0.01),且熱敏灸組及維酶素組優(yōu)于非熱敏灸組(P0.05,P0.01);在降低c-myc mRNA方面維酶素組優(yōu)于熱敏灸組(P0.05),在降低survivin mRNA方面熱敏灸組與維酶素組療效相當(dāng)。結(jié)論:(1)熱敏灸能明顯改善CAG模型大鼠一般狀況(如精神狀態(tài)、大便質(zhì)地等)、體質(zhì)量及胃黏膜組織病理形態(tài)。(2)熱敏灸能提高血清GH、PGⅠ表達(dá),改善CAG模型大鼠胃黏膜萎縮狀態(tài)。(3)熱敏灸能抑制胃黏膜c-myc、survivin mRNA的表達(dá),恢復(fù)胃黏膜細(xì)胞增殖與凋亡之間平衡而達(dá)到治療CAG的目的。
【學(xué)位授予單位】:江西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:R245;R-332
【圖文】:

過程圖,中脘,艾灸,大鼠


熱敏灸“中脘”穴對慢性萎縮性胃炎模型大鼠 c-myc、survivin 的影響以新世紀(jì)全國高等中醫(yī)藥院校規(guī)劃教材《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》[82]及擬人比照法來模擬定位“中脘”穴。2.3.2 施灸方法艾灸前去除大鼠“中脘”穴區(qū)毛發(fā),給予大鼠“中脘”穴(距腧穴約 3cm)艾灸,40min/次,每日 1 次,共 28d。見圖 1。

正態(tài)分布,肉眼觀察,大鼠胃,黏膜


采用 SPSS 25.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,計(jì)量資料以均值±標(biāo)準(zhǔn)差數(shù)據(jù)均進(jìn)行正態(tài)分布及方差齊性檢驗(yàn),組內(nèi)比較采用配對樣本 t 檢較采用兩獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn),多組間差異比較采用單因素方差分析,采用 LSD 法,以 P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。果與分析模型建立情況 肉眼觀察胃黏膜情況模 12 周后,肉眼觀察胃黏膜示:空白組淡紅色有光澤,無出血點(diǎn)整,表面粘液分泌豐富,走向規(guī)則,溝回明顯,肌層豐厚;造模組,黏膜層明顯變薄,彈性減少,皺襞變平,粘液減少,走向紊亂,失,肌層變薄(見圖 3)。計(jì)分析

大鼠胃,空白,箭頭,皮色


空白組 造模組圖 4 造模 12 周空白組與造模組大鼠胃黏膜組織病理學(xué)觀察(HE×100)注:黑色箭頭示異形增生;綠色箭頭示淋巴濾泡浸潤;紅色箭頭示胃腺囊性擴(kuò)張。Figure 4 Histopathological observation of gastric mucosa in blank grouand model group of rats after model establishment at 12 weeks(HE×100Note: The black arrow showed dysplasia;the green arrow showed lymphoid folliculinfiltration;the red arrow showed cystic dilation of the gastric glands.3.2 一般狀況觀察造模前,各組大鼠狀態(tài)良好,活潑好動(dòng),神態(tài)自如,動(dòng)作敏捷有力,肌肉結(jié)實(shí)有力,飲食正常,毛發(fā)濃密潤澤緊致,皮膚黏膜紅潤光澤,耳廓及尾部皮色淡紅,大便呈球形,干稀適中。造模 12 周后,空白組與造模前無明顯變化,食欲佳,活動(dòng)度好。造模組均

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