本文關(guān)鍵詞：遠(yuǎn)近配穴電針對髓核源性腰痛大鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：建立自體髓核移植大鼠病理模型,探討遠(yuǎn)近配穴、遠(yuǎn)部取穴、近部取穴電針對其痛行為學(xué)、脊髓形態(tài)學(xué)及脊髓水平小膠質(zhì)細(xì)胞(microglia, MG)和環(huán)氧化酶2(cyclooxygenase 2, COX2)表達(dá)的影響及作用機(jī)制。方法：將自體髓核放置于左側(cè)硬脊膜與脊神經(jīng)根移行處,注意使其對硬脊膜和脊神經(jīng)根無壓迫,建立髓核源性腰痛模型。隨機(jī)將大鼠分為正常組、模型組、假手術(shù)組、遠(yuǎn)近穴組、近穴組、遠(yuǎn)穴組。遠(yuǎn)近穴組取雙側(cè)L5夾脊穴(Ex-B2)、大腸俞(BL25)、委中(BL40)和昆侖(BL60)；近穴組取雙側(cè)L5 Ex-B2和BL25；遠(yuǎn)穴組取雙側(cè)BL40和BL60。電針治療組大鼠每天電針1次,每次20 min,連續(xù)治療7天。于術(shù)前1天和術(shù)后3、5、7天對其進(jìn)行痛行為學(xué)觀察,測定各組大鼠熱刺激爪退縮閾值和機(jī)械縮爪閾值；采用蘇木精-伊紅染色(hematoxylin eosin, HE)觀察各組大鼠術(shù)后7天的脊髓形態(tài)變化；采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse-transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)觀察術(shù)后7天各組大鼠脊髓水平COX2 mRNA和EP2 MRNA表達(dá)變化；采用免疫組織化學(xué)及免疫熒光技術(shù)觀察術(shù)后7天各組大鼠后角左側(cè)小膠質(zhì)細(xì)胞及COX2的表達(dá)變化。結(jié)果：1痛行為學(xué)：實驗結(jié)果顯示,自體髓核移植后,與正常組比較,模型組術(shù)后3、5天的熱刺激爪退縮閾值明顯降低(P0.05)；術(shù)后5、7天與模型組比,所有治療組熱刺激爪退縮閾值升高,有極顯著差異(P0.01)。治療組之間比較未見明顯差異(P0.05),遠(yuǎn)近穴組近穴組遠(yuǎn)穴組。與正常組比較,模型組術(shù)后3天的機(jī)械縮爪閾值明顯降低(P0.01),持續(xù)至術(shù)后7天；術(shù)后3天所有治療組機(jī)械縮爪閾值與正常組比較有顯著差異(P0.01),近穴組與模型組之間的MWT差異顯著(P0.01)。與模型組比,術(shù)后5、7天所有治療組機(jī)械縮爪閾值升高,有極顯著差異(P0.01)。治療組之間比較,遠(yuǎn)近穴組與近穴組療效接近,術(shù)后5天,二者均與遠(yuǎn)穴組有極顯著差異(P0.01),術(shù)后7天,遠(yuǎn)近穴組與遠(yuǎn)穴組有顯著差異(P0.05)。2脊髓形態(tài)：HE染色結(jié)果顯示,與正常組比較,術(shù)后7天模型組,脊髓組織結(jié)構(gòu)紊亂,細(xì)胞核偏移或消失,可見細(xì)胞呈簇狀排列,部分尼氏體消失,出現(xiàn)囊腔樣變化或空腔；假手術(shù)組可見輕微損傷。與模型組比較,電針組仍見囊腔樣變化或空腔、部分尼氏體消失,但細(xì)胞排列較規(guī)律,損傷程度減輕。3免疫組化結(jié)果顯示：與正常組相比,模型組小膠質(zhì)細(xì)胞的染色增強(qiáng),胞體變大,細(xì)胞數(shù)增多,光密度明顯上升(P0.05)。假手術(shù)組中的小膠質(zhì)細(xì)胞光密度與正常組之間未見統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。治療組與模型組之間沒有明顯差異(P0.05),有下降的趨勢。治療組之間沒有明顯差異。與正常組相比,模型組COX2蛋白的染色增強(qiáng),COX2的光密度明顯升高(P0.01)。假手術(shù)組與正常組之間沒有顯著差異(P0.05)。電針治療組與模型組之間有明顯差異(P0.01)。電針組之間沒有明顯差異(P0.05),但是從趨勢可以看出遠(yuǎn)近穴組、近穴組下降的趨勢比遠(yuǎn)穴組更加明顯。結(jié)果提示：與電針遠(yuǎn)穴組相比,電針遠(yuǎn)近穴組、近穴組抑制小膠質(zhì)細(xì)胞及COX2表達(dá)的作用趨勢更明顯。4免疫熒光結(jié)果顯示：COX2在脊髓有基礎(chǔ)表達(dá),模型建立后,COX2的熒光表達(dá)增強(qiáng)；與模型組相比,電針組中的COX2的表達(dá)減弱。小膠質(zhì)細(xì)胞在正常脊髓中有基礎(chǔ)表達(dá)；術(shù)后7天小膠質(zhì)細(xì)胞熒光表達(dá)增強(qiáng),電針治療后其表達(dá)減弱。在結(jié)果中發(fā)現(xiàn)COX2與小膠質(zhì)細(xì)胞有共同的表達(dá)區(qū)域。5 RT-PCR結(jié)果顯示：COX2 mRNA在大鼠脊髓中有基礎(chǔ)表達(dá),造模7天后COX2 mRNA表達(dá)顯著增加(P0.05)。假手術(shù)組與正常組之間的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,電針治療后遠(yuǎn)近穴組和近穴組的COX2 mRNA表達(dá)顯著下降(P0.05)而遠(yuǎn)穴組未見明顯下降。遠(yuǎn)近穴組和近穴組的COX2 mRNA表達(dá)未見統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)果提示電針遠(yuǎn)近穴組、近穴組的治療作用優(yōu)于遠(yuǎn)穴組。EP2 mRNA在大鼠脊髓中有基礎(chǔ)表達(dá),造模7天后EP mRNA表達(dá)顯著增加(P0.05)。假手術(shù)組與正常組之間的差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與模型組相比,電針治療后EP2 mRNA未見明顯下降,但有下降趨勢。結(jié)論：無論是近部取穴、遠(yuǎn)部取穴和遠(yuǎn)近配穴電針均能可下調(diào)自體髓核移植所導(dǎo)致的脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞和COX2的高表達(dá)水平,減輕對脊髓的損傷,提高熱刺激爪退縮閾值和機(jī)械縮爪閾值,發(fā)揮針刺的鎮(zhèn)痛抗炎癥作用。在電針的療效結(jié)果中,遠(yuǎn)近配穴和近部取穴的療效接近,且優(yōu)于遠(yuǎn)部取穴,可為臨床針灸治療腰痛提供理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：電針 腰痛 炎性痛 髓核 脊髓后角 小膠質(zhì)細(xì)胞 環(huán)氧化酶2
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R245
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 符號說明10-11
• 第一部分 文獻(xiàn)綜述11-32
• 綜述一 針刺治療腰痛的研究現(xiàn)狀11-17
• 1 實驗研究11-13
• 2 臨床研究13-17
• 綜述二 遠(yuǎn)近配穴法研究進(jìn)展17-22
• 1 腧穴配伍17-18
• 2 遠(yuǎn)近配穴法18-22
• 綜述三 針刺對神經(jīng)病理性疼痛大鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響22-27
• 1 小膠質(zhì)細(xì)胞活化22-24
• 2 神經(jīng)病理性疼痛與小膠質(zhì)細(xì)胞24-25
• 3 針刺對神經(jīng)病理性疼痛小膠質(zhì)細(xì)胞的影響25-27
• 參考文獻(xiàn)27-32
• 前言32-35
• 第二部分 實驗研究 遠(yuǎn)近配穴電針對自體髓核移植大鼠脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞活性的影響35-63
• 1 材料35-38
• 2 方法38-47
• 3 結(jié)果47-53
• 4 小結(jié)53-54
• 5 討論54-63
• 結(jié)語63-64
• 1 結(jié)論63
• 2 存在問題與不足63-64
• 參考文獻(xiàn)64-72
• 附錄72-81
• 致謝81-82
• 個人簡歷82-83

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