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基于肥大細(xì)胞和P物質(zhì)探討哮喘大鼠腧穴敏化的機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2020-06-16 12:43
【摘要】:目的:通過觀察哮喘模型大鼠體表敏化點(diǎn)的分布及敏化點(diǎn)處溫度,結(jié)合相關(guān)組織肥大細(xì)胞(MCs)和P物質(zhì)(SP)變化特征,探討哮喘模型大鼠穴位敏化點(diǎn)及熱敏點(diǎn)的產(chǎn)生機(jī)理。方法:將60只體質(zhì)量為(250±20)g的雄性SD大鼠隨機(jī)均分6組,分別為模型Ⅰ組和空白Ⅰ組,模型Ⅱ組和空白Ⅱ組,模型Ⅲ組和空白Ⅲ組,每組各10只。模型組予卵白蛋白/氫氧化鋁(OVA/AL(OH)_3)混合液腹腔及四肢注射后超聲霧化吸入OVA生理鹽水溶液,制備哮喘大鼠模型。其中模型Ⅰ組連續(xù)造模4周,模型Ⅱ組連續(xù)造模8周,模型Ⅲ組連續(xù)造模12周;空白Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組分別注射生理鹽水4周、8周、12周,注射方法同模型組。以EB滲出作為穴位敏化的標(biāo)志,各組在相應(yīng)實(shí)驗(yàn)周期結(jié)束后,在異氟烷吸入麻醉下予尾靜脈注射EB,脫毛后記錄皮膚EB滲出點(diǎn)并用紅外熱像儀檢測大鼠背部EB滲出處及對照點(diǎn)溫度,最后剪取相應(yīng)敏化處組織。采用改良甲苯胺藍(lán)染色法,檢測EB滲出點(diǎn)處組織中MCs數(shù)量及脫顆粒情況。采用免疫組織化學(xué)染色方法,檢測EB滲出點(diǎn)處組織中SP的表達(dá)。結(jié)果:1、敏化點(diǎn)的分布及溫度:模型I組EB滲出點(diǎn)主要分布在左側(cè)“肺俞穴”,模型Ⅱ組大鼠EB滲出點(diǎn)則主要分布在雙側(cè)“肺俞穴”和左側(cè)“定喘穴”,模型Ⅲ組大鼠EB滲出點(diǎn)主要分布在雙側(cè)“肺俞穴”和雙側(cè)“定喘穴”,在胸部“華蓋穴”偏右的部位也有出現(xiàn)EB滲出點(diǎn)。在紅外熱像儀下,高溫區(qū)主要分布在頸部,模型I組高溫分布在頸部偏左,模型Ⅱ組和模型Ⅲ組在頸部左右均有分布;空白組相應(yīng)點(diǎn)處溫度則無明顯變化。與空白組相比,模型組EB滲出點(diǎn)溫度升高明顯(P0.05);與模型組EB滲出點(diǎn)旁開相比,模型組EB滲出點(diǎn)溫度升高不明顯;與空白組旁開點(diǎn)相比,模型組EB滲出點(diǎn)旁開溫度升高明顯(P0.05);與空白組旁開點(diǎn)相比,空白組EB滲出點(diǎn)相應(yīng)點(diǎn)溫度變化不明顯。三個(gè)模型組EB滲出點(diǎn)之間平均溫度隨著病程的增加而略有升高,但沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2、敏化點(diǎn)組織中MCs數(shù)量及其脫顆粒和SP表達(dá)情況:模型Ⅰ組和模型Ⅱ組敏化點(diǎn)處MCs數(shù)目明顯高于敏化點(diǎn)旁開以及空白組相應(yīng)點(diǎn)(P0.05),模型Ⅲ組敏化點(diǎn)處MCs與敏化點(diǎn)旁開相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,但與空白組相應(yīng)點(diǎn)相比有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。三個(gè)模型組敏化點(diǎn)處MCs脫顆粒率均明顯高于敏化點(diǎn)旁開及空白組相應(yīng)點(diǎn)(P0.05),敏化點(diǎn)旁開和空白組相應(yīng)點(diǎn)處MCs脫顆粒率則無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三個(gè)模型組之間敏化點(diǎn)處MCs數(shù)量及其脫顆粒率均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三個(gè)模型組敏化點(diǎn)處SP陽性表達(dá)均高于敏化點(diǎn)旁開及空白組相應(yīng)點(diǎn)(P0.05),敏化點(diǎn)旁開處SP陽性表達(dá)與空白組對應(yīng)點(diǎn)之間均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;三個(gè)模型組敏化點(diǎn)處的SP表達(dá)比較,SP陽性表達(dá)隨著病程的延長而逐漸增加,但未達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。結(jié)論:1、哮喘模型大鼠敏化穴有“肺俞穴”、“定喘穴”、“華蓋穴”,敏化點(diǎn)的部位會(huì)隨著造模時(shí)間的延長而增多;哮喘大鼠模型的熱敏點(diǎn)主要是“肺俞穴”和“定喘穴”。2、MCs和SP參與了腧穴的敏化現(xiàn)象,MCs參與腧穴的敏化主要與其脫顆粒關(guān)系密切。隨著疾病程度的發(fā)展,腧穴的敏化會(huì)出現(xiàn)“擴(kuò)散”現(xiàn)象。敏化點(diǎn)處單位面積內(nèi)的MCs數(shù)量及SP表達(dá)量處于動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài),增加量隨著疾患的加重表現(xiàn)的并不明顯。3、哮喘模型大鼠的敏化點(diǎn)和熱敏點(diǎn)會(huì)出現(xiàn)一定程度的重合現(xiàn)象。
【學(xué)位授予單位】:福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:R245
【圖文】:

點(diǎn)溫,大鼠,第一,空白


與空白Ⅱ組相比,模型Ⅱ組敏化處平均溫度明顯升高(P<0.05);與空白Ⅱ組旁開點(diǎn)相比,模型Ⅱ組敏化點(diǎn)旁開溫度升高明顯(P<0.05);與敏化點(diǎn)旁開相比,敏化點(diǎn)處溫度升高不明顯。(見表3-3、圖3-2)表3-3 第二組大鼠各相應(yīng)點(diǎn)的溫度比較( x±S)組別 例數(shù)(只) 溫度變化(℃)模型Ⅱ組敏化點(diǎn) 9 36.75±0.17*模型Ⅱ組敏化旁開點(diǎn) 9 36.58±0.12#空白Ⅱ組對應(yīng)點(diǎn) 9 36.01±0.14空白Ⅱ組對應(yīng)旁開點(diǎn) 9 35.67±0.04注a:與空白Ⅱ組對應(yīng)點(diǎn)相比,*P<0.05,注b:與空白Ⅱ組對應(yīng)旁開點(diǎn)相,#P<0.05。*#

點(diǎn)溫,大鼠,空白,敏化


與空白Ⅲ組相比,模型Ⅲ組敏化處平均溫度明顯升高(P<0.05);與空白Ⅲ組旁開點(diǎn)相比,模型Ⅲ組敏化點(diǎn)旁開處溫度升高明顯(P<0.05);與敏化點(diǎn)旁開相比,敏化點(diǎn)處溫度升高不明顯。(見表3-4、圖3-3)表3-4 第三組大鼠各相應(yīng)點(diǎn)的溫度比較( x±S)組別 例數(shù)(只) 溫度變化(℃)模型Ⅲ組敏化點(diǎn) 10 36.84±0.11*模型Ⅲ組敏化旁開點(diǎn) 10 36.60±0.07#空白Ⅲ組對應(yīng)點(diǎn) 10 36.46±0.07空白Ⅲ組對應(yīng)旁開點(diǎn) 10 36.26±0.06注a:與空白Ⅲ組對應(yīng)點(diǎn)相比,*P<0.05,注b:與空白Ⅲ組對應(yīng)旁開點(diǎn)相比,#P<0.05。* #

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