發(fā)布時(shí)間：2020-05-22 11:35

【摘要】：目的:通過多囊卵巢綜合征(Polycystic ovary syndrome,PCOS)患者痰瘀互結(jié)型與腎虛肝郁型及健康人群之間的一般資料、檢驗(yàn)指標(biāo)及利用超高效液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(HPLC-MS)分析其血清代謝標(biāo)志物,通過代謝途徑尋找PCOS患者不同證型之間的差異性,為證型具體化、中醫(yī)藥辨證論治提供分子生物學(xué)依據(jù);通過尋找PCOS患者與健康者之間的差異,試圖尋找PCOS在代謝方面可能的發(fā)病機(jī)制。方法:納入2018年10月1日至2019年1月31日至廣州中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科就診的符合納排標(biāo)準(zhǔn)的PCOS患者60例,通過辨證納入痰瘀互結(jié)型28例,腎虛肝郁型32例,并選取同期來院體檢中心符合納排標(biāo)準(zhǔn)的健康者30例,收集其一般資料,于月經(jīng)第2-3天空腹檢測性激素六項(xiàng),并用促凝管采集清晨空腹靜脈血4-5ml,采用HPLC-MS技術(shù)檢測分析血清代謝標(biāo)志物,將痰瘀互結(jié)型PCOS與健康者之間、痰瘀互結(jié)型與腎虛肝郁型PCOS患者之間的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行對比。結(jié)果:1.本次研究中痰瘀互結(jié)組PCOS患者體重及BMI均高于腎虛肝郁組PCOS患者;腎虛肝郁組PCOS患者痤瘡的發(fā)病率高于痰瘀互結(jié)組PCOS患者;兩種證型間多毛情況、性激素檢測無明顯差異;PCOS患者LH、T、LH/FSH均高于健康者組,且LH/FSH比值多高于2倍以上;2.本次研究篩選出血清標(biāo)志物共4371個(gè),根據(jù)PLS-DA模型中的VIP值(VIP1)和t檢驗(yàn)結(jié)果,根據(jù)質(zhì)譜同位素匹配結(jié)果和HMDB、KEGG等數(shù)據(jù)庫的檢索結(jié)果及鑒別結(jié)果,本次研究中納入分析可能的血清標(biāo)志物20種;其中痰瘀互結(jié)型PCOS相比腎虛肝郁型PCOS患者有14個(gè)標(biāo)志物有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;痰瘀互結(jié)型PCOS患者相比健康者經(jīng)檢驗(yàn)有18種有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:1.通過臨床資料的對比,體重、BMI、痤瘡可被認(rèn)為痰瘀互結(jié)型及腎虛肝郁型PCOS的辨證點(diǎn),通過各項(xiàng)指標(biāo)對比本次研究選取的小樣本與大樣本統(tǒng)計(jì)基本吻合,具有一定樣本代表性,可作為代謝組學(xué)數(shù)據(jù)的進(jìn)一步研究;2.通過血清標(biāo)志物代謝通路分析發(fā)現(xiàn)涉及的主要代謝途徑為:氨基酸代謝(組氨酸、酪氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸、纈氨酸等)、脂質(zhì)代謝(脂肪酸分解、脂質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、磷脂的分解)、糖類代謝(麥芽糖的分解、糖胺聚糖的合成、糖蛋白的合成)及其他途徑(肝的生物轉(zhuǎn)化、膽汁酸代謝等)。3.通過HPLC-MS技術(shù)篩選出標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)痰瘀互結(jié)型PCOS患者相比健康人群主要的血清標(biāo)志物有組氨酸、α-生育酚、1,4-β-D-葡聚糖、十一烷基甘氨酸、甲基硒酸、3,4-Dihydroxybenzylamine、油酰胺、N-Jasmonoylisoleucine、去氧膽酸酸、硫酸角蛋白I、苯二醇、2-Oxo-4-methylthiobutan-oic acid、繳氨酸、L-巖藻糖、脂胺酰胺、LysoPC(22:1(13Z))、Glutaminylhydroxyproline、Methionyl-Glutamate;4.納入痰瘀互結(jié)型PCOS患者相比腎虛肝郁型PCOS患者血清標(biāo)志物為組氨酸、α-生育酚、Pentadecanoylcarnitine、十一烷基甘氨酸、甲基硒酸、3,4-Dihydroxybenzylamine、2-amino-4-butanoic acid、去氧膽酸、苯二醇、~T氨酸、L-巖藻糖、LysoPC(22:1(13Z))、Glutaminylhydroxyproline、Methionyl-Glutamate。
【圖文】：

注：１．痰瘀互結(jié)組；２．腎虛肝郁組；３．健康者組逡逑圖１血清代謝ＵＰＬＧ－Ｔ０Ｆ指紋圖譜逡逑第三節(jié)方法學(xué)考察逡逑在每個(gè)血清樣本中取２０邋ＵＬ至５ｍｒ離心管中，，渦旋混合，制備為樣品池。在樣品池逡逑

邐廣州中醫(yī)藥大學(xué)２０１９屆碩士學(xué)位論文邐逡逑考察儀器及樣品的穩(wěn)定性。重復(fù)性考察樣品疊加圖見圖２邋（ｎ＝６），穩(wěn)定性考察結(jié)果見逡逑圖３邋（ｎ４０），說明樣木處理重復(fù)性良好，樣品及儀器方法穩(wěn)定性良好，滿足分析要逡逑求。選取其中１０個(gè)峰進(jìn)行比較，所得圖譜的峰強(qiáng)度與峰數(shù)目的ＲＳＤ均小于１０％，說明樣逡逑本及儀器方法穩(wěn)定性良好，滿足分析要求。見表７、表８。逡逑
【學(xué)位授予單位】：廣州中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R271.9

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2675933