【摘要】：研究背景針刺介入時機(jī)是影響針刺療效的關(guān)鍵因素,古人按照子午流注、靈龜八法選擇針刺施術(shù)時機(jī),而在現(xiàn)代針灸臨床中針刺時機(jī)問題往往被忽視。重視和把握經(jīng)穴及時機(jī)與針刺效應(yīng)的相關(guān)性,不僅可提高針灸臨床療效,同時為針灸治療疾病提供新的思路。多裂肌對維持脊柱穩(wěn)定至關(guān)重要,近年來以多裂肌為靶點治療腰痛在康復(fù)醫(yī)學(xué)、運動醫(yī)學(xué)中被廣泛認(rèn)可。骨骼肌損傷后修復(fù)主要依賴肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖,Foxo1、Myostatin作為肌衛(wèi)星細(xì)胞負(fù)性調(diào)控因子,可抑制肌衛(wèi)星細(xì)胞增殖下調(diào)Myod的表達(dá)影響成肌細(xì)胞分化。本課題組前期從肌細(xì)胞生長因子、肌細(xì)胞自噬、凋亡、炎癥等研究角度已證實電針委中穴、腎俞穴可有效促進(jìn)模型大鼠損傷多裂肌的修復(fù),本實驗將在前期研究的基礎(chǔ)上結(jié)合針刺介入的時機(jī)進(jìn)一步展開對電針委中穴、腎俞穴治療腰多裂肌損傷的探討。研究目的通過免疫組化法和蛋白質(zhì)印跡法觀察在肌損傷后不同時機(jī)電針委中、腎俞穴對腰多裂肌損傷大鼠多裂肌中Foxo1、Myostatin、Myod蛋白表達(dá)的影響,闡明電針促進(jìn)腰多裂肌損傷后修復(fù)的分子機(jī)制并篩選肌損傷后最佳的電針介入時機(jī)。研究方法將152只成年雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白組8只、電針組72只、模型組72只,其中電針組和模型組根據(jù)損傷后即刻干預(yù)、24h干預(yù)、48h干預(yù)三個不同介入時間點和1d、3d、7d三個不同的取材時間點各分為9個亞組;電針組、模型組大鼠選擇雙側(cè)脊柱L4、L5水平兩旁的四個點注射布比卡因以建立大鼠腰多裂肌損傷模型,空白組不做任何處理,正常飼養(yǎng);電針組按照不同的針刺介入時間點選取雙側(cè)委中穴、雙側(cè)腎俞穴進(jìn)行電針干預(yù),連接韓式電針儀HANS-200A,2/100Hz的疏密波,電流強(qiáng)度1mA,持續(xù)20分鐘,1次/天,直至取材的前一天,其對應(yīng)的模型組進(jìn)行同步的捆綁固定;于電針干預(yù)或捆綁固定后1d、3d、7d取材;用免疫組化法和蛋白質(zhì)印跡法檢測模型大鼠多裂肌組織中Foxo1、Myostatin、Myod表達(dá)的變化趨勢。研究結(jié)果1.腰多裂肌Foxo1表達(dá)的變化蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示:1d取材,與空白組相比,24h模型組、48h模型組Foxo1蛋白表達(dá)升高(P0.05);與相應(yīng)模型組比較,24h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)降低(P0.05),即刻、48h針刺組Foxo1表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與即刻、48h電針組相比,24h電針組Foxo1蛋白含量較低(P0.05)。3d取材,與空白組相比,24h、48h模型組Foxo1蛋白表達(dá)升高(P0.05),即刻模型組Foxo1蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與相對應(yīng)的模型組相比,24h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)降低(P0.01),即刻、48電針組Foxo1蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與即刻、48電針組相比,24h電針組Foxo1蛋白含量升高(P0.05)。7d取材,與空白組相比,24h、48h模型組Foxo1蛋白表達(dá)升高(P0.01),即刻模型組Foxo1蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與相對應(yīng)的模型組相比,24h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)降低(P0.01),即刻、48h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與48h電針組相比,24h電針組蛋白表達(dá)降低(P0.05)。免疫組化法結(jié)果顯示:1d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Foxo1蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);與相應(yīng)的模型組相比,即刻、24h、48h電針組Foxo1蛋白表達(dá)降低(P0.05);與即刻電針組相比,24h電針組蛋白含量顯著升高(P0.01);48h電針組蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01)。3d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Foxo1蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);與相應(yīng)模型組相比,24h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01),即刻、48h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與即刻、48h電針組相比,24h電針組Foxo1蛋白表達(dá)降低(P0.01)。7d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Foxo1蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);與相應(yīng)模型組相比,48h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01),即刻、24h電針組Foxo1的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);即刻、24h、48h電針組相比,各組間Foxo1蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05)。2.腰多裂肌Myostatin表達(dá)的變化蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示:1d取材,與空白組相比,24h、48h模型組Myostatin蛋白表達(dá)降低(P0.05),即刻模型組Myostatin蛋白表達(dá)無差異(P0.05);與相應(yīng)模型組相比,即刻電針組Myostatin的蛋白表達(dá)升高(P0.05),24h、48h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)無差異(P0.05);與即刻電針組相比,24h、48h電針組Myostatin蛋白表達(dá)降低(P0.05)。3d取材,與空白組相比,即刻、48h模型組Myostatin蛋白表達(dá)降低(P0.05),24h模型組Myostatin蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);與相應(yīng)模型組相比,24h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01),即刻、48h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與48h電針組相比,24h電針組Myostatin蛋白表達(dá)降低(P0.05)。7d取材,與空白組相比,即刻、48h模型組Myostatin蛋白表達(dá)降低(P0.05),24h模型組Myostatin蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與相應(yīng)的模型組相比,24h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01),即刻、48h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與即刻、48h電針組相比,24h電針組蛋白含量降低(P0.05)。免疫組化法結(jié)果顯示:1d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Myostatin蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);與相應(yīng)模型組相比,24h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01),即刻、48h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與48h電針組比較,24h電針組Myostatin蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01)。3d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Myostatin蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01);與相應(yīng)模型組相比,24h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)降低(P0.05),48h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01),即刻電針組Myostatin的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與48h電針組相比,24h電針組蛋白含量顯著降低(P0.01)。7d取材,與空白組相比,即刻24h、48h模型組Myostatin蛋白表達(dá)升高(P0.05,P0.01);與相應(yīng)的模型組相比,24h、48h電針組Myostatin的蛋白表達(dá)顯著降低(P0.01),即刻電針組Myostatin的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);即刻、24h、48h電針組相比,三組間Myostatin的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05)。3.腰多裂肌Myod表達(dá)的變化蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示:1d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Myod蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01,P0.05);與相應(yīng)模型組相比,即刻、24h電針組Myod的蛋白表達(dá)升高(P0.05,P0.01);與48h電針組相比,24h電針組Myod蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01)。3d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Myod蛋白表達(dá)升高(P0.05,P0.01);與相應(yīng)的模型組相比,即刻、24h、48h電針組Myod的蛋白表達(dá)升高(P0.05);與即刻、48h電針組相比,24h電針組Myod蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01)。7d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Myod蛋白表達(dá)升高(P0.05);與相應(yīng)的模型組相比,24h電針組Myod的蛋白表達(dá)顯著升高(P0.01),24h、48h電針組Myod的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義(P0.05);與即刻、48h電針組相比,24h電針組蛋白含量顯著升高(P0.01)。免疫組化法結(jié)果顯示:1d、3d、7d取材,與空白組相比,即刻、24h、48h模型組Myod蛋白表達(dá)升高均(P0.05);與相應(yīng)的模型組相比,即刻、24h、48h電針組Myod的蛋白表達(dá)無差異(P0.05);即刻、24h、48h電針組三組間Myod的蛋白表達(dá)均無差異(P0.05)。研究結(jié)論布比卡因可以有效建立大鼠腰多裂肌損傷模型;電針可以通過下調(diào)Foxo1、Myostatin的表達(dá),上調(diào)Myod的表達(dá)從而有效促進(jìn)模型大鼠損傷多裂肌的修復(fù);不同的針刺時機(jī)可以對針刺的效應(yīng)產(chǎn)生影響,損傷后24h為電針介入的最佳時機(jī)。
【圖文】：

不同電針介入時機(jī)對模型大鼠腰多裂肌損傷后Ｆｏｘｏｌ、Ｍｙｏｓｔａｔｉｎ、Ｍｙｏｄ表達(dá)的影響逡逑二腰椎旁開７ｍｍ），選用華佗牌０．３０Ｘ邋１３ｍｍ邋—次性針灸針，針刺后連接韓式電針ＨＡＮＳ－２００Ａ，邋２／ｌＯＯＨｚ的疏密波，電流強(qiáng)度１ｍＡ，，持續(xù)２０分鐘，１次／天，直至取材的一天。在電針干預(yù)后的Ｉｄ、３ｄ、７ｄ各取材８只。（具體操作時間點參加下圖）逡逑

４８ｈ模型組Ｆｏｘｏｌ的蛋白表達(dá)升高（ＰＣ０．０５）；８ｈ電針組Ｆｏｘｏｌ的蛋白表達(dá)差異無統(tǒng)計意義（Ｐ＞０．邋０５）逡逑與即刻電針組相比，２４ｈ電針組蛋白含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＞０．邋表達(dá)升高（Ｐ＜０．０５）邋；邋２４ｈ電針組與４８ｈ電針組相比，２４ｈ電針０．邋０５）。逡逑表１空白組、各模型組大鼠腰多裂�。疲铮铮斓鞍妆磉_(dá)比較（ｆ邋士邋）逡逑空白組邐即刻模型組邐２４ｈ模型組邐４８ｈ模型組逡逑０．邋８６±０．邋０９邐１．０９±０．邋１７邐１．２４士０．２１＊邐１．邋１０±０．邋３２０．８６±０．０９邐１．０７±０．３１邐０．７９土０．１７＊邐１．６０±０．２６０．邋８６±０．邋０９邐０．邋９８±０．邋４９邐２．邋３６±０．邋８７林邐１．３３±０．邋４８相比Ｐ＜０．邋０５，邋＂邋Ｐ＜０．邋０１逡逑
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R245;R-332

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 駱永珍;;致敏家兔皮試反應(yīng)強(qiáng)度和血漿皮質(zhì)酮含量以及電針對其作用的子午時辰差異[J];四川生理科學(xué)雜志;1989年03期

2 翁明;廖海清;;電針治療老年性失眠療效量表分析[J];針灸臨床雜志;2007年05期

3 葉曉春;邵水金;國海東;韓小晶;劉玉璞;陸萍萍;;電針對坐骨神經(jīng)損傷大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子的影響[J];中國中醫(yī)藥信息雜志;2017年06期

4 石杰;秦黎虹;劉振;顧光;潘賓;汪德龍;黃日龍;;電針治療嚴(yán)重功能性便秘療效觀察[J];安徽中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2015年01期

5 朱雪萍;程井軍;吳其愷;;電針豐隆穴治療非酒精性脂肪性肝炎的臨床研究[J];湖北中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2016年05期

6 金建明;嚴(yán)偉;殷建權(quán);;電針結(jié)合推拿治療肥大性脊椎炎的臨床觀察[J];針灸臨床雜志;2006年02期

7 陳躍華;陳興奎;尹小君;施茵;;電針與益生菌合用黛力新對腹瀉型腸易激綜合征的療效比較研究[J];中國中西醫(yī)結(jié)合雜志;2012年05期

8 鄒燃;張紅星;張?zhí)品?徐蕓;;不同頻率電針與藥物治療急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的比較[J];中國臨床康復(fù);2006年43期

9 李同軍;于志國;;推拿與電針相結(jié)合治療面神經(jīng)麻痹的臨床觀察[J];中醫(yī)藥信息;2008年02期

10 劉洪澤;;針刀與電針治療神經(jīng)根型頸椎病臨床療效對比探討[J];大家健康(學(xué)術(shù)版);2014年02期

相關(guān)會議論文 前10條

1 郭長青;芮娜;劉焰剛;劉云霞;沙巖;馬廣昊;;新砭石療法治療肩周炎多中心隨機(jī)對照研究[A];“針灸診療規(guī)范化研究的思路”學(xué)術(shù)論文集[C];2008年

2 程井軍;吳其愷;彭銳;孫國杰;;電針對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝組織氧化及抗氧化狀態(tài)的影響[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會第十三屆內(nèi)科肝膽病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

3 譚峰;;電針對高血壓大鼠腦梗死皮層與頸髓RAC-1mRNA表達(dá)的影響[A];7th中華醫(yī)學(xué)會神經(jīng)病學(xué)分會全國中青年神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會暨第十屆全國神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病與腦脊液細(xì)胞學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2014年

4 屠文展;蔣松鶴;樓新法;張瑞峰;劉芬;龐玲霞;李莎莎;;低頻脈沖電針對慢性根性痛大鼠背根神經(jīng)節(jié)P物質(zhì)的影響[A];中國針灸學(xué)會2009學(xué)術(shù)年會論文集（上集）[C];2009年

5 程井軍;吳其愷;彭銳;;電針對非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝組織氧化及抗氧化狀態(tài)的影響[A];第十八次全國中西醫(yī)結(jié)合肝病學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2009年

6 方芳;方劍喬;劉U

本文編號：2669806