【摘要】：全球結(jié)核病疫情嚴(yán)峻,2017年全球約1000萬人感染結(jié)核病,死亡160萬病例(包括30萬HIV陽性結(jié)核病患者),加上世界各地耐多藥結(jié)核菌和廣譜耐藥結(jié)核菌的劇增,導(dǎo)致目前結(jié)核病防治面臨極大挑戰(zhàn),開發(fā)新型抗結(jié)核藥物及新的輔助治療迫在眉睫。民族醫(yī)藥是人類長期實踐積累的資源寶庫,是各民族長期運用傳統(tǒng)藥物與疾病奮斗的經(jīng)驗總和,為現(xiàn)代醫(yī)藥的研究提供了重要的資源和線索。長期被運用于結(jié)核病治療的傳統(tǒng)藥物具有潛在的藥用價值和價格優(yōu)勢,對其進(jìn)行收集、整理、研究不僅是對傳統(tǒng)醫(yī)藥知識的保護,也是對現(xiàn)代醫(yī)藥的重要補充。本文采用文獻(xiàn)研究、民族學(xué)植物調(diào)查、民族學(xué)調(diào)查、植物化學(xué)研究等跨學(xué)科研究方法對15個民族涉及結(jié)核病治療的傳統(tǒng)單驗方和復(fù)方進(jìn)行整理,并從中篩選出18種民族藥做進(jìn)一步的活性驗證,實驗結(jié)果顯示部分民族藥具有抗分枝桿菌活性。綜合藥物易獲得性、民間應(yīng)用情況等選擇活性較好的攀援耳草(Hedyotis scandens Roxb.)作為重點研究對象,對其進(jìn)行有效部位篩選及相關(guān)的化學(xué)成分分析,為攀援耳草民間應(yīng)用提供科學(xué)的解釋,也為攀援耳草的深入研究和開發(fā)運用奠定基礎(chǔ)。整體上,本論文的主要研究內(nèi)容包含如下四個方面:(1)抗結(jié)核民族醫(yī)藥理論、藥方整理。歸納了部分民族醫(yī)藥的臨床基礎(chǔ)理論(主要為苗、侗、瑤、彝)以及這些民族對結(jié)核病的認(rèn)識、分類及診治;總結(jié)了民族醫(yī)藥共同的用藥特點;收集整理民族醫(yī)藥中用于治療結(jié)核病(包括肺內(nèi)結(jié)核和肺外結(jié)核)的單驗方677首,復(fù)方477首,共計1154首。涉及15個民族,包括苗族、瑤族、侗族、彝族、土家、基諾族、壯族、黎族、德昂族、藏族、毛南族、仡佬族、水族、傣族、回族,以貴州的苗族、侗族居多;藥物收集內(nèi)容包含科屬、形態(tài)、入藥部位、地方名、漢語譯名、產(chǎn)地、最佳采集方法和時間、用藥禁忌等。(2)部分抗結(jié)核民族藥活性初步定性驗證。基于抗結(jié)核民族藥驗方內(nèi)容,從中篩選出18種民族藥進(jìn)行科學(xué)性驗證,利用乙醇提取法制備粗提物,以分枝桿菌屬非致病模式菌株恥垢分枝桿菌為測試菌,采用紙片擴散法,初步定性判斷藥物粗提物的抑菌活性。結(jié)果顯示:18種民族藥粗提物中,金蕎麥、攀援耳草、巖豇豆、矮地茶4種對恥垢分枝桿菌具有較明顯的抑菌效果,其中以金蕎麥和攀援耳草效果最為顯著,在濃度為200 mg/mL時,抑菌圈直徑均大于10 mm;500mg/mL時,抑菌圈直徑均大于13 mm。而這些藥物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、膠紅酵母菌等幾乎沒有抑菌活性(僅金蕎麥和巖豇豆提取物對金黃色葡萄球菌、白薇提取物對膠紅酵母菌具有一定的抑菌活性),說明上述藥物對分枝桿菌具有特異性的抗菌活性,民間治療結(jié)核藥方具有較高的針對性。(3)攀援耳草抗分枝桿菌活性部位篩選。在上述基礎(chǔ)上,對攀援耳草粗提物利用石油醚、二氯甲烷和正丁醇進(jìn)行不同極性萃取及抑菌活性檢測,結(jié)果顯示其活性成分主要集中在二氯甲烷部位和正丁醇部位。進(jìn)一步利用薄層色譜法、柱色譜法、半制備型高效液相色譜(HPLC)等對二氯甲烷部位進(jìn)行分離,鎖定攀援耳草活性部位在二氯甲烷:甲醇比例25:1、10:1、5:1段,為樣品Fr.11-Fr.16,選擇活性最好的Fr.13樣品進(jìn)行后續(xù)分離,該樣品活性成分主要集中在二氯甲烷:甲醇比例15:1段。(4)攀援耳草揮發(fā)性物質(zhì)成份鑒定。本研究首次利用GC-MS分析測定了攀援耳草三個萃取部位并鑒定了37種揮發(fā)性成分,它們涉及醛、酮、醇、酯類、不飽和烷烴等種類。綜上,本研究在一定程度上推動了抗結(jié)核民族藥收集、整理工作進(jìn)程;經(jīng)過體外抗恥垢分枝桿菌活性實驗初步驗證了部分抗結(jié)核民族藥的活性;對活性較好的攀援耳草活性部位進(jìn)行了分離與追蹤,證實了攀援耳草作為治療結(jié)核病的民族藥理用途,這為攀援耳草后期進(jìn)一步篩選和分離抗結(jié)核活性物質(zhì)及藥物的開發(fā)奠定了一定的基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：貴州民族大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R29

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本文編號：2652721