【摘要】：目的:本項實驗以自然衰老的C57/6小鼠作為老年性耳聾的模型,觀察穴位埋線腎俞穴和足三里對老年性耳聾小鼠耳蝸螺旋神經(jīng)元GABAA受體與NMDA受體的時序性表達的干預,以及應用ABR儀器來測定小鼠在聽力高低頻區(qū)的閾值,探究埋線改善耳蝸老化的機制,驗證中醫(yī)腎主耳理論的機制。材料與方法:SPF級健康雄性C57BL/6小鼠110只,先隨機抽取10只作為青年組來測量ABR的閾值,自然衰老組與埋線組各隨機抽取10只,處死小鼠應用RT-PCR法測量NMDA受體與GABAA受體的表達情況,剩下80只鼠分為兩組,自然衰老組正常飼養(yǎng),不做任何處理,埋線組小鼠腎俞與足三里埋線,埋線方法:將羊腸線裁剪3mm,放入5號注射器針頭中,刺入小鼠穴位下,深度為3mm,用0.25×0.40mm華佗牌針灸針將羊腸線推入穴位中,埋線兩周一次,共8次,在小鼠16周,20周,24周,28周時候分別抽取10只,測定ABR閾值后處死小鼠,觀察指標的表達的情況。結果:1.在同一頻率刺激下的自然衰老組小鼠,與第12周比較,16周ABR值變化無統(tǒng)計學意義(P0.05);與第16周比較,小鼠第20周、24周、28周ABR值明顯升高,聽力損失明顯,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05),且隨周數(shù)增加,ABR值均逐漸升高(P0.05)。同一頻率刺激下,與青年組比較,在第12周及16周時,自然衰老組、埋線組小鼠ABR值變化均無明顯差異(P0.05);第20周、24周及28周時,自然衰老組、埋線組小鼠ABR值顯著升高且差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。與自然衰老組比較,在第12周、16周及20周時,埋線組小鼠ABR值變化均無統(tǒng)計學意義(P0.05);在第24周、28周時ABR值明顯降低(P0.05),且埋線組在20周之后ABR閾值趨于穩(wěn)定,聽力損傷程度較小,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。2.結果顯示自然衰老組小鼠在16周時GABAA受體表達量與12周對比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),與第16周比較時,第20,24,28周GABAA受體表達量明顯降低,證明聽力損失明顯,差異符合統(tǒng)計學意義(P0.05),且隨著周數(shù)增加,GABAA受體表達量明顯下降(P0.05)。同青年組小鼠對比,在第12周及16周時,自然衰老組、埋線組小鼠GABAA受體表達量均無明顯差異(P0.05);第20周,24周,28周時,兩組小鼠GABAA受體表達量顯著降低(P0.05),與自然衰老組比較,埋線組12周,16周,20周GABAA受體表達量的變化無統(tǒng)計學意義(P0.05),在第24周,28周時GABAA受體表達量明顯高于自然衰老組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),且埋線組在20周之后GABAA表達量趨于穩(wěn)定,聽力損傷程度較小,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。3.結果顯示自然衰老組小鼠在16周時NMDA受體表達量與12周對比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),與第16周比較時,第20,24,28周GABAA受體表達量明顯升高,證明聽力損失明顯,差異符合統(tǒng)計學意義(P0.05),且隨著周數(shù)增加,GABAA受體表達量明顯增加(P0.05)。同青年組小鼠對比,在第12周及16周時,自然衰老組、埋線組小鼠GABAA受體表達量均無明顯差異(P0.05);第20周,24周,28周時,兩組小鼠GABAA受體表達量顯著升高(P0.05),與自然衰老組比較,埋線組12周,16周,20周GABAA受體表達量的變化無統(tǒng)計學意義(P0.05),在第24周,28周時GABAA受體表達量明顯低于自然衰老組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),且埋線組在20周之后NMDA表達量趨于穩(wěn)定,聽力損傷程度較小,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1當聽力下降時,小鼠ABR閾值明顯增加,腎俞與足三里埋線可以降低ABR閾值。2正常SGN中GABAA數(shù)量較高,NMDA受體含量低,當聽力下降時GABAA受體數(shù)量降低,NMDA受體含量增加,腎俞與足三里埋線可調(diào)節(jié)這兩個受體的表達。3自然衰老組小鼠ABR閾值與受體表達量在第20周,24周,28周呈時序性表達,而通過腎俞與足三里埋線的干預改變了實驗結果,且最佳干預點為第16周。4腎俞穴與足三里穴可以作為人體的保健穴對老年性耳聾具有預防與治療的作用,其作用機制可能是通過延緩耳蝸中毛細胞的凋亡而實現(xiàn)的。
【圖文】：

- 15 -GABA 受體與 NMDA 受體表達情況結果顯示自然衰老組小鼠在 16 周時 GABAA 受體表達量與 12 周對比，差異無統(tǒng)義（P>0.05），與第 16 周比較時，第 20，，24，28 周 GABAA 受體表達量明顯降低聽力損失明顯，差異符合統(tǒng)計學意義（P<0.05），且隨著周數(shù)增加，GABAA 受體表顯下降（P<0.05）。同青年組小鼠對比，在第 12 周及 16 周時，自然衰老組、埋
【學位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R245

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本文編號：2620469