【摘要】：目的：觀察止痛健骨方治療兔膝骨關節(jié)炎軟骨的MRI評價以及對與N F-κ B信號通路的影響,并對兩者進行相關性分析,探索MRI對KOA的診斷及軟骨修復的價值,為臨床運用止痛健骨方治療膝骨關節(jié)炎提供實驗依據。方法：90只白兔隨機分為正常對照組、模型對照組、陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組,每組各18只,采用木瓜蛋白酶關節(jié)腔注射方法制備兔KOA模型后,模型驗證成功后,止痛健骨低劑量組、高劑量組給與對應止痛健骨方灌胃,陽性藥物組給與鹽酸氨基葡萄糖片灌胃,正常對照組、模型對照組則灌服同劑量生理鹽水。在實驗干預前,干預第4周,第8周分別測量膝關節(jié)屈曲活動度測量和膝關節(jié)MRI檢查,之后處死兔子,打開右膝關節(jié)腔,進行關節(jié)軟骨及滑膜大體觀察和光鏡下顯微形態(tài)觀察,并免疫組織化學檢測軟骨MMP-1及TNF-α表達,RT-qPCR檢測軟骨IKKαmRNA及N F-κBmRNA表達,對MRI評價對與N F-κ B信號通路進行相關性分析。結果：①運用木瓜蛋白酶關節(jié)腔注射方法可成功制備兔KOA,制備的KOA動物模型病理改變同人類KOA類似。②實驗干預前時,與正常對照組比較,模型對照組、陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在膝關節(jié)屈曲活動度、膝關節(jié)軟骨MRI分級、關節(jié)軟骨Mankin's評分、滑膜組織評分、軟骨MMP-1及TNF-α表達、軟骨IKKα mRNA及NF-κ BmRNA均有增加,差異有統計學意義(P0.05),模型對照組、陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組四組比較,差異無統計學意義(P0.05)。③實驗干預第4周時,與正常對照組比較,模型對照組、陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在膝關節(jié)屈曲活動度、關節(jié)軟骨Mankin's評分、滑膜組織評分、軟骨MMP-1及TNF-α表達、軟骨IKKα mRNA及NF-κB mRNA均有增加,差異有統計學意義(P0.05),。與模型對照組比較,陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在膝關節(jié)軟骨MRI分級差異無統計學意義(P0.05),但其余各指標均有改善差異有統計學意義(P0.05)。陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組第4周時組間比較,差異無統計學意義(P0.05),但各指標較本組干預前得到改善(P0.05)。④實驗干預第8周時,與正常對照組比較,模型對照組、陽性藥物組、止痛健骨低劑量組在膝關節(jié)屈曲活動度、膝關節(jié)軟骨MRI分級、關節(jié)軟骨Mankin's評分、滑膜組織評分、軟骨MMP-1及TNF-α表達、軟骨IKK α mRNA及NF-κB mRNA均有增加,差異有統計學意義(P0.05),止痛健骨高劑量組膝關節(jié)屈曲活動度、膝關節(jié)軟骨MRI分級、軟骨IKK α mRNA及N F-κB mRNA表達恢復至正常水平(P＞0.05)。與模型對照組比較,陽性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在以上各指標均得到明顯改善(P0.05),較本組干預前比較,差異有統計學意義(P0.05)。止痛健骨高劑量組在膝關節(jié)屈曲活動度、軟骨IKK α mRNA及N F-κBmRNA較陽性藥物組、止痛健骨低劑量組得到明顯改善(P＜0.05)。對止痛健骨方治療兔膝骨關節(jié)炎軟骨的MRI評價以及與NF-κB信號通路的相關性分析發(fā)現,兩者成呈直線正相關(P0.05)。結論：①運用木瓜蛋白酶關節(jié)腔注射可成功制備兔KOA模型,制備的KOA模型病理改變同人KOA相似,且該動物模型中NF-κB信號通路存在激活狀態(tài),MMP-1、TNF-α、IKK α mRNA及NF-κB mRNA的表達明顯上升。②兔KOA模型中,NF-κB信號通路指標MMP-1.TNF-α、IKKα mRNA、N F-κBmRNA表達增加時,軟骨MRI損傷分級和病理學評分上升,三者成正向直線相關。③鹽酸氨基葡萄糖片對KOA具有治療作用,作用機理可能通過抑制IKKαmRNA、 NF-κ B mRNA勺表達,減少下游產物MMP-1、TNF-α表達,達到抑制炎癥反應和對軟骨細胞的保護。④止痛健骨方對KOA模型有治療作用,作用機理可能通過抑制KOA軟骨N F-κ B信號通路,通過抑制IKK αmRNA、NF-κB mRNA的表達,減少下游產物MMP-1、TNF-α表達,達到抑制炎癥反應和對軟骨細胞的保護。⑤膝關節(jié)MRI可對KOA軟骨損傷進行診斷和分級,并能無創(chuàng)、直觀反映藥物對KOA軟骨的修復情況,與軟骨病理學評分及NF-κB信號通路呈直線相關。
【圖文】：

組別邐只數邋性別（雌／雄）邐體質量（ｋｇ）邋正常對＇照巧＇邐＼８邐ｉｏＴｓ邐２．邋１６邋＋邋０．邋１７￣模型對照巧邐１８邐９／９邐２．邋１３邋＋邋０．邋１７逡逑陽性藥物巧邐１８邐９／９邐２．邋１７邋＋邋０．邋１５逡逑止痛健骨化劑量巧邐１８邐８／１０邐２．邋１３邋＋邋０．邋１９逡逑止痛健骨高劑量組邐１８邐＾邐２．邋１７邋＋邋０．邋１６逡逑；主：性別經Ｐｅａｒｓｏｎ邋Ｘ邋＾檢驗，Ｘ邋＾－０．邋４４４，戶０．邋９７９；體質量經單因素方差分析Ｆ＝０．０．８４１。逡逑動物模型制備逡逑模型對照納、陽性藥物組、止痛健骨低劑量姐、止痛健骨高劑量姐白兔瓜蛋白酶關節(jié)腔注射方法制備兔ＫＯＡ模型１Ｗ，方法如下：將兔固定定，取右后膝關節(jié)內側，理發(fā)器備皮，醫(yī)用棚伏對右后膝關節(jié)內側常用Ｉｍｌ注射器巧膝關節(jié)穿刺，注射１．６％木瓜蛋白酶溶液０．３ｍｌ，，在造１、４、７天，每天－－次，共注射３次。造模２周后即可出現ＫＯＡ改變。組白兔右膝關節(jié)則給與同劑量生理鹽水注射。逡逑

１膝關節(jié)屈曲活動度測量采用中立位０°法計算，方法如下：用雙臂測定，Ｗ其軸私對準關節(jié)中也點，兩臂對準肢段軸線，膝關節(jié)中立位，０伸直位。逡逑．邋２膝關節(jié)ＭＲＩ檢查膝關節(jié)ＭＲＩ邋｝邋｜描前，給予白兔１０％水合氛

本文編號：2550104