【摘要】：目的：觀察止痛健骨方治療兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨的MRI評(píng)價(jià)以及對(duì)與N F-κ B信號(hào)通路的影響,并對(duì)兩者進(jìn)行相關(guān)性分析,探索MRI對(duì)KOA的診斷及軟骨修復(fù)的價(jià)值,為臨床運(yùn)用止痛健骨方治療膝骨關(guān)節(jié)炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：90只白兔隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組,每組各18只,采用木瓜蛋白酶關(guān)節(jié)腔注射方法制備兔KOA模型后,模型驗(yàn)證成功后,止痛健骨低劑量組、高劑量組給與對(duì)應(yīng)止痛健骨方灌胃,陽(yáng)性藥物組給與鹽酸氨基葡萄糖片灌胃,正常對(duì)照組、模型對(duì)照組則灌服同劑量生理鹽水。在實(shí)驗(yàn)干預(yù)前,干預(yù)第4周,第8周分別測(cè)量膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度測(cè)量和膝關(guān)節(jié)MRI檢查,之后處死兔子,打開右膝關(guān)節(jié)腔,進(jìn)行關(guān)節(jié)軟骨及滑膜大體觀察和光鏡下顯微形態(tài)觀察,并免疫組織化學(xué)檢測(cè)軟骨MMP-1及TNF-α表達(dá),RT-qPCR檢測(cè)軟骨IKKαmRNA及N F-κBmRNA表達(dá),對(duì)MRI評(píng)價(jià)對(duì)與N F-κ B信號(hào)通路進(jìn)行相關(guān)性分析。結(jié)果：①運(yùn)用木瓜蛋白酶關(guān)節(jié)腔注射方法可成功制備兔KOA,制備的KOA動(dòng)物模型病理改變同人類KOA類似。②實(shí)驗(yàn)干預(yù)前時(shí),與正常對(duì)照組比較,模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度、膝關(guān)節(jié)軟骨MRI分級(jí)、關(guān)節(jié)軟骨Mankin's評(píng)分、滑膜組織評(píng)分、軟骨MMP-1及TNF-α表達(dá)、軟骨IKKα mRNA及NF-κ BmRNA均有增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組四組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。③實(shí)驗(yàn)干預(yù)第4周時(shí),與正常對(duì)照組比較,模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度、關(guān)節(jié)軟骨Mankin's評(píng)分、滑膜組織評(píng)分、軟骨MMP-1及TNF-α表達(dá)、軟骨IKKα mRNA及NF-κB mRNA均有增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),。與模型對(duì)照組比較,陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在膝關(guān)節(jié)軟骨MRI分級(jí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但其余各指標(biāo)均有改善差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組第4周時(shí)組間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),但各指標(biāo)較本組干預(yù)前得到改善(P0.05)。④實(shí)驗(yàn)干預(yù)第8周時(shí),與正常對(duì)照組比較,模型對(duì)照組、陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組在膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度、膝關(guān)節(jié)軟骨MRI分級(jí)、關(guān)節(jié)軟骨Mankin's評(píng)分、滑膜組織評(píng)分、軟骨MMP-1及TNF-α表達(dá)、軟骨IKK α mRNA及NF-κB mRNA均有增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),止痛健骨高劑量組膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度、膝關(guān)節(jié)軟骨MRI分級(jí)、軟骨IKK α mRNA及N F-κB mRNA表達(dá)恢復(fù)至正常水平(P＞0.05)。與模型對(duì)照組比較,陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組、止痛健骨高劑量組在以上各指標(biāo)均得到明顯改善(P0.05),較本組干預(yù)前比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。止痛健骨高劑量組在膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度、軟骨IKK α mRNA及N F-κBmRNA較陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量組得到明顯改善(P＜0.05)。對(duì)止痛健骨方治療兔膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨的MRI評(píng)價(jià)以及與NF-κB信號(hào)通路的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),兩者成呈直線正相關(guān)(P0.05)。結(jié)論：①運(yùn)用木瓜蛋白酶關(guān)節(jié)腔注射可成功制備兔KOA模型,制備的KOA模型病理改變同人KOA相似,且該動(dòng)物模型中NF-κB信號(hào)通路存在激活狀態(tài),MMP-1、TNF-α、IKK α mRNA及NF-κB mRNA的表達(dá)明顯上升。②兔KOA模型中,NF-κB信號(hào)通路指標(biāo)MMP-1.TNF-α、IKKα mRNA、N F-κBmRNA表達(dá)增加時(shí),軟骨MRI損傷分級(jí)和病理學(xué)評(píng)分上升,三者成正向直線相關(guān)。③鹽酸氨基葡萄糖片對(duì)KOA具有治療作用,作用機(jī)理可能通過(guò)抑制IKKαmRNA、 NF-κ B mRNA勺表達(dá),減少下游產(chǎn)物MMP-1、TNF-α表達(dá),達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)和對(duì)軟骨細(xì)胞的保護(hù)。④止痛健骨方對(duì)KOA模型有治療作用,作用機(jī)理可能通過(guò)抑制KOA軟骨N F-κ B信號(hào)通路,通過(guò)抑制IKK αmRNA、NF-κB mRNA的表達(dá),減少下游產(chǎn)物MMP-1、TNF-α表達(dá),達(dá)到抑制炎癥反應(yīng)和對(duì)軟骨細(xì)胞的保護(hù)。⑤膝關(guān)節(jié)MRI可對(duì)KOA軟骨損傷進(jìn)行診斷和分級(jí),并能無(wú)創(chuàng)、直觀反映藥物對(duì)KOA軟骨的修復(fù)情況,與軟骨病理學(xué)評(píng)分及NF-κB信號(hào)通路呈直線相關(guān)。
【圖文】：

組別邐只數(shù)邋性別（雌／雄）邐體質(zhì)量（ｋｇ）邋正常對(duì)＇照巧＇邐＼８邐ｉｏＴｓ邐２．邋１６邋＋邋０．邋１７￣模型對(duì)照巧邐１８邐９／９邐２．邋１３邋＋邋０．邋１７逡逑陽(yáng)性藥物巧邐１８邐９／９邐２．邋１７邋＋邋０．邋１５逡逑止痛健骨化劑量巧邐１８邐８／１０邐２．邋１３邋＋邋０．邋１９逡逑止痛健骨高劑量組邐１８邐＾邐２．邋１７邋＋邋０．邋１６逡逑；主：性別經(jīng)Ｐｅａｒｓｏｎ邋Ｘ邋＾檢驗(yàn)，Ｘ邋＾－０．邋４４４，戶０．邋９７９；體質(zhì)量經(jīng)單因素方差分析Ｆ＝０．０．８４１。逡逑動(dòng)物模型制備逡逑模型對(duì)照納、陽(yáng)性藥物組、止痛健骨低劑量姐、止痛健骨高劑量姐白兔瓜蛋白酶關(guān)節(jié)腔注射方法制備兔ＫＯＡ模型１Ｗ，方法如下：將兔固定定，取右后膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)，理發(fā)器備皮，醫(yī)用棚伏對(duì)右后膝關(guān)節(jié)內(nèi)側(cè)常用Ｉｍｌ注射器巧膝關(guān)節(jié)穿刺，注射１．６％木瓜蛋白酶溶液０．３ｍｌ，，在造１、４、７天，每天－－次，共注射３次。造模２周后即可出現(xiàn)ＫＯＡ改變。組白兔右膝關(guān)節(jié)則給與同劑量生理鹽水注射。逡逑

１膝關(guān)節(jié)屈曲活動(dòng)度測(cè)量采用中立位０°法計(jì)算，方法如下：用雙臂測(cè)定，Ｗ其軸私對(duì)準(zhǔn)關(guān)節(jié)中也點(diǎn)，兩臂對(duì)準(zhǔn)肢段軸線，膝關(guān)節(jié)中立位，０伸直位。逡逑．邋２膝關(guān)節(jié)ＭＲＩ檢查膝關(guān)節(jié)ＭＲＩ邋｝邋｜描前，給予白兔１０％水合氛

本文編號(hào)：2550104