本文關(guān)鍵詞：一測(cè)多評(píng)法測(cè)定穿心蓮及其制劑中內(nèi)酯類成分，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

一測(cè)多評(píng)法在中藥材含量測(cè)定中應(yīng)用進(jìn)展

摘要：影響中藥材質(zhì)量因素很多，導(dǎo)致市場(chǎng)上中藥材質(zhì)量控制困難，目前僅憑單一成分評(píng)價(jià)中藥材質(zhì)量過(guò)于片面，不能很好反應(yīng)中藥材質(zhì)量?jī)?yōu)良。一測(cè)多評(píng)法以中藥材本身具有成分為內(nèi)參物，同時(shí)測(cè)定多種成分，可以很好反應(yīng)中藥材質(zhì)量。筆者結(jié)合近年一測(cè)多評(píng)法在中藥材中應(yīng)用實(shí)例進(jìn)行探討，為中藥材質(zhì)量控制提供參考。

關(guān)鍵詞：中藥材，含量測(cè)定，一測(cè)多評(píng)

影響中藥材質(zhì)量的因素很多，有不同產(chǎn)地、不同炮制加工方法、不同儲(chǔ)藏方式等[1]。因此，目前中藥材市場(chǎng)藥材質(zhì)量良莠不齊，直接影響中醫(yī)臨床辨證施治的治療效果�，F(xiàn)階段中藥標(biāo)準(zhǔn)多用單一成分含量高低來(lái)反應(yīng)中藥材質(zhì)量，但中藥材成分復(fù)雜多樣，作用機(jī)制模糊，大多靠幾種成分協(xié)同發(fā)揮藥效，這樣僅以一種成分含量無(wú)法全面反映中藥質(zhì)量。但如果以傳統(tǒng)測(cè)定方法同時(shí)測(cè)中藥材中幾種成分不但面臨對(duì)照品難得，檢驗(yàn)周期長(zhǎng)，還耗能、耗時(shí)。2006年王智民等[2]首次提出一測(cè)多評(píng)法（quantitative analysis of multi-components by single-marker，QAMS），該通過(guò)中藥有效成分間存在的內(nèi)在函數(shù)關(guān)系和比例關(guān)系法，測(cè)定一個(gè)成分（對(duì)照品易得、價(jià)廉、有效者）實(shí)現(xiàn)多個(gè)成分（對(duì)照品難以得到或難供應(yīng)者）同步測(cè)定。不僅解決了中藥多成分定量和多指標(biāo)質(zhì)量控制中存在的對(duì)照品缺乏問(wèn)題，同時(shí)實(shí)現(xiàn)多指標(biāo)同步質(zhì)量控制反映中藥質(zhì)量。該法提出后得到業(yè)內(nèi)學(xué)者廣泛認(rèn)可和應(yīng)用，并于2010版《中國(guó)藥典（一部）》收載�，F(xiàn)就一測(cè)多評(píng)法原理及應(yīng)用進(jìn)展進(jìn)行概述，并對(duì)存在的問(wèn)題和發(fā)展前景進(jìn)行探討，為中藥質(zhì)量控制提供參考依據(jù)。

1一測(cè)多評(píng)概念與原理

研究思路起源于內(nèi)標(biāo)法、校正因子法、主成分自身對(duì)照法以及紫外百分吸收系數(shù)法等幾個(gè)概念。在一定線性范圍內(nèi)，成分的量（質(zhì)量或濃度）與檢測(cè)器響應(yīng)成正比的原理，在多指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)時(shí)，引入相對(duì)校正因子的概念，以樣品中某一典型成分( 有對(duì)照品供應(yīng)者、價(jià) 廉、有活性) 為內(nèi)標(biāo)，根據(jù)中藥有效成分間存在的內(nèi)在函數(shù)關(guān)系和比例關(guān)系，建立該成分與其他成分之間的相對(duì)校正因子(relative correction factor,RCF)，通過(guò)RCF計(jì)算其他成分的含量。這種測(cè)定一個(gè)成分，實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)成分定量的方法命名為“一測(cè)多評(píng)”法。

具體表現(xiàn)為，在多指標(biāo)（s,a,b,.....,i,......）質(zhì)量評(píng)價(jià)時(shí)，以藥材（或成藥）中某個(gè)典型有效成分作為內(nèi)參物（s），建立內(nèi)參物與其他待測(cè)成分（a,b,.....,i,......）之間的相對(duì)校正因子（RCF，fsa,fsb,fsc,......）按計(jì)算公式：fsi=fs/fi=(As/Cs)/(Ai/Ci)=(As·Ci)/(Ai·Cs)，式中As為內(nèi)參物峰面積，Ai為其他組分峰面積，Cs內(nèi)參物濃度，Ci為其他組分濃度。在方法學(xué)建立時(shí)，需要準(zhǔn)備待測(cè)組分及所選內(nèi)參物的對(duì)照品，求出內(nèi)參物與個(gè)待測(cè)組分見(jiàn)的RCF，并把它作為常數(shù)用于以后的含量測(cè)定計(jì)算中[3]。含量測(cè)定過(guò)程中，只需準(zhǔn)備內(nèi)參物的對(duì)照品，因而內(nèi)參物（s）濃度可按常規(guī)方法進(jìn)行測(cè)定，應(yīng)用RCF，結(jié)合內(nèi)參物實(shí)測(cè)值計(jì)算待測(cè)組分濃度（Ci）。

2 一測(cè)多評(píng)法應(yīng)用

2.1 黃酮類內(nèi)參物的建立

李倩等[4]建立一測(cè)多評(píng)法同時(shí)測(cè)定16批丹參中以丹參酮IIA與丹參酮I、二氫丹參酮I、隱丹參酮4種指標(biāo)成分的相對(duì)校正因子，計(jì)算丹參酮I、二氫丹參酮I、隱丹參酮含量實(shí)現(xiàn)一測(cè)多評(píng)，同時(shí)用外標(biāo)法驗(yàn)證該方法在丹參藥材中應(yīng)用的準(zhǔn)確性和可行性。結(jié)果表明，采用校正因子計(jì)算的含量值與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值之間無(wú)顯著差異。范玲等[5]以大黃素為內(nèi)參物測(cè)定虎

杖中大黃素、虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素甲醚含量，通過(guò)建立大黃素與虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素甲醚的相對(duì)校正因子，并用該校正因子進(jìn)行虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素甲醚的含量計(jì)算，同時(shí)采用外標(biāo)法測(cè)定飲片中虎杖苷、白藜蘆醇、大黃素及大黃素甲醚的含量，并比較計(jì)算值與外表法測(cè)定值的差異，結(jié)果測(cè)定11批虎杖中3種成分含量的計(jì)算值與實(shí)測(cè)值的RSD均小于3%，表明一測(cè)多評(píng)法可用于控制虎杖飲片的質(zhì)量。蔡海霞等[6]以中藥材黃芪為研究對(duì)象，建立黃芪中4種個(gè)主要異黃酮類化合物的一測(cè)多評(píng)含量測(cè)定方法，測(cè)定芒柄花素與毛蕊異黃酮苷、芒柄花苷和毛蕊異黃酮的相對(duì)校正因子，并用該校正因子測(cè)定毛蕊異黃酮苷、芒柄花苷和毛蕊異黃酮的含量，與外標(biāo)法測(cè)定值進(jìn)行比較。結(jié)果表明，測(cè)定的34批黃芪藥材及飲片中4種異黃酮的含量計(jì)算值與實(shí)測(cè)值間無(wú)顯著差異，該法可用于黃芪藥材質(zhì)量評(píng)價(jià)。另外，朱晶晶等[7]通過(guò)建立27批黃芩中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素4種成分的一測(cè)多評(píng)法，測(cè)定黃芩苷與后3種成分間的相對(duì)校正因子，并測(cè)定黃芩苷的含量,用所建立的校正因子計(jì)算其他3個(gè)成分的含量，同時(shí)用外標(biāo)法測(cè)定所選27批黃芩中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素4種成分含量，兩種測(cè)定結(jié)果比較表明測(cè)值之間沒(méi)有明顯差異。一測(cè)多評(píng)法不僅用于單味藥中，在成方制劑中同樣適用。楊菲等[8]建立銀黃片中黃芩苷、漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素4種黃酮類化合物一測(cè)多評(píng)法。測(cè)定黃芩苷與漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素的相對(duì)校正因子，并用測(cè)定的校正因子測(cè)定黃芩中漢黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素含量，同時(shí)用外標(biāo)法測(cè)定真實(shí)值。結(jié)果表明，測(cè)多評(píng)法的計(jì)算結(jié)果與外標(biāo)法的實(shí)測(cè)值之間沒(méi)有顯著性差異，實(shí)驗(yàn)所得的相對(duì)校正因子可信，證明一測(cè)多評(píng)法可運(yùn)用于銀黃片質(zhì)量控制。

2.2 生物堿內(nèi)參物的建立

陳靜等[9]在驗(yàn)證一測(cè)多評(píng)法在苦參含量測(cè)定中應(yīng)用的可行性和技術(shù)適應(yīng)性時(shí)，建立氧化苦參堿與槐果堿、苦參堿、氧化槐果堿、槐定堿5中生物堿的相對(duì)校正因子，同時(shí)考察了相對(duì)校正因子的重現(xiàn)性，并用外標(biāo)法測(cè)定21批所選藥材5中生物堿含量。比較常規(guī)的外標(biāo)法實(shí)測(cè)含量與一測(cè)多評(píng)計(jì)算的，含量的相對(duì)誤差，結(jié)果均在小于3% ，說(shuō)明用一測(cè)多評(píng)法進(jìn)行測(cè)定，與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值間無(wú)明顯差異，證明一測(cè)多評(píng)法可用作苦參質(zhì)量控制。匡艷輝等[10],建立了中藥材黃連5個(gè)主要生物堿的一測(cè)多評(píng)法，建立小檗堿與巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿的相對(duì)校正因子，并用該校正因子對(duì)進(jìn)行巴馬汀、黃連堿、表小檗堿、藥根堿的含量計(jì)算（計(jì)算法），同時(shí)采用外標(biāo)法測(cè)定藥材中這 5 種生物堿的含量（實(shí)測(cè)法），并通過(guò)pearson相關(guān)系數(shù)進(jìn)行比較其含量間的相對(duì)誤差，結(jié)果均小于3%。說(shuō)明兩種測(cè)量方法沒(méi)有顯著性差異，一測(cè)多評(píng)法可用于黃連質(zhì)量控制。宋亞芳等[11]用11批吳茱萸藥材建立吳茱萸次堿與吳茱萸內(nèi)酯、吳茱萸堿的相對(duì)校正因子，并用該校正因子進(jìn)行吳茱萸內(nèi)酯、吳茱萸堿的含量計(jì)算，實(shí)現(xiàn)一測(cè)多評(píng)。并用外標(biāo)法測(cè)定這11批吳茱萸中吳茱萸內(nèi)酯、吳茱萸堿及吳茱萸次堿3中成分的實(shí)測(cè)值，并對(duì)這兩種測(cè)量方法進(jìn)行比較，結(jié)果計(jì)算值與實(shí)測(cè)值間無(wú)顯著差異（<5%），表明一測(cè)多評(píng)法可用于吳茱萸藥材中吳茱萸內(nèi)酯、吳茱萸堿及吳茱萸次堿含量測(cè)定。尹萌等以關(guān)黃柏為研究對(duì)象，建立關(guān)黃柏中主要成分小檗堿為指標(biāo)，建立其與藥根堿、巴馬汀間的相對(duì)校正因子，并用測(cè)得的校正因子測(cè)定所選藥材中藥根堿、巴馬汀含量，同時(shí)與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果沒(méi)有顯著性差異，說(shuō)明一測(cè)多評(píng)法可用于控制關(guān)黃柏藥材及飲片的質(zhì)量。一測(cè)多評(píng)法對(duì)多種中藥材中生物堿含量測(cè)定，且測(cè)定結(jié)果與外表法測(cè)定值均沒(méi)顯著性差異，表明一測(cè)多評(píng)法可運(yùn)用于控制主要成分是生物堿中藥材的質(zhì)量控制。

2.3 皂苷類內(nèi)參物的建立

一測(cè)多評(píng)法提出時(shí)首先運(yùn)用于皂苷類成分含量測(cè)定，此后在含皂苷類成分中藥材中運(yùn)用更加廣泛。王智民等[12]在首次提出“一測(cè)多評(píng)”應(yīng)用于藥材白木通，建立了皂苷PJ1與白木通皂苷B和白木通皂苷C的相對(duì)校正因子，并用建得的校正因子測(cè)定白木通皂苷B和白木通皂苷C的含量，同時(shí)用外表法測(cè)定白木通中皂苷PJ1與白木通皂苷B和白木通皂苷C3種成分絕對(duì)含量。結(jié)果表明一測(cè)多評(píng)法的計(jì)算值與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值之間沒(méi)有顯著性差異，即實(shí)驗(yàn)所得

的校正因子可信，該法可用于中藥材指標(biāo)質(zhì)量評(píng)價(jià)新模式。黃帥等[13]，建立柴胡藥材中柴胡皂苷a與柴胡皂苷c及柴胡皂苷d的校正因子，并用所得校正因子測(cè)定柴胡藥材中柴胡皂苷c及柴胡皂苷d含量。并通過(guò)t-檢驗(yàn)法對(duì)一測(cè)多評(píng)法測(cè)得結(jié)果與外標(biāo)法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較，評(píng)價(jià)一測(cè)多評(píng)法對(duì)柴胡藥材中3種皂苷含量測(cè)定的準(zhǔn)確性和科學(xué)性，結(jié)果外標(biāo)法對(duì)柴胡皂苷c及柴胡皂苷d的實(shí)測(cè)含量與一測(cè)多評(píng)法計(jì)算的含量沒(méi)有顯著性差異，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)，P>0. 05，實(shí)驗(yàn)所得校正因子可信。宋永貴等[14]，建立預(yù)知子中多種三萜皂苷成分的一測(cè)多評(píng)質(zhì)量控制方法。皂苷 PD為內(nèi)參物對(duì)皂苷X、皂苷B、皂苷A的相對(duì)校正因子，并用該校正因子測(cè)定預(yù)知子中皂苷X、皂苷B、皂苷A三種皂苷類成分含量，同時(shí)采用外標(biāo)法同時(shí)測(cè)定藥材中該4種成分的量，兩種測(cè)量方法沒(méi)有顯著性差異，表明采用一測(cè)多評(píng)法控制預(yù)知子的質(zhì)量可行。張勇等[15]，以中藥木瓜為研究對(duì)象，建立木瓜一測(cè)多評(píng)方法。其中選擇木瓜中活性成分齊墩果酸為內(nèi)參物，通過(guò)考察HLPC和UPLC兩種色譜體系建立相對(duì)校正因子計(jì)算熊果酸的量（計(jì)算值），并用外標(biāo)法測(cè)定木瓜中熊果酸含量（實(shí)測(cè)值）。結(jié)果兩種測(cè)量方法，兩種測(cè)量體系無(wú)顯著性差異，說(shuō)明該方法準(zhǔn)確、可行。

2.4 其他成分內(nèi)參物的建立

一測(cè)多評(píng)法不僅應(yīng)用于黃酮類、生物堿類、皂苷類有效部位的含量測(cè)定，還可以用于其他類成分含量測(cè)定。楊芳等[16]通過(guò)藥材川白芷建立川白芷中3種香豆素類成分一測(cè)多評(píng)法，建立以歐前胡素對(duì)照品為內(nèi)標(biāo)物與異歐前胡素、氧化前胡素的相對(duì)校正因子，并用該校正因子測(cè)定川白芷中異歐前胡素、氧化前胡素含量（計(jì)算值），結(jié)合外標(biāo)法測(cè)定藥材中這3種香豆素的含量（實(shí)測(cè)值）進(jìn)行比較，結(jié)果20 批藥材中3種香豆素含量的計(jì)算值與實(shí)測(cè)值無(wú)顯著差異。林青等[17]為實(shí)現(xiàn)多指標(biāo)評(píng)價(jià)穿心蓮質(zhì)量，建立一測(cè)多評(píng)分析方法，選擇穿心蓮中穿心蓮內(nèi)酯建立新穿心蓮內(nèi)酯、去氧穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的校正因子，同時(shí)用外標(biāo)法測(cè)定所選39批穿心蓮藥材和30批消炎利膽片中4種內(nèi)酯類成分。并比較兩種測(cè)定方法的差異，結(jié)果對(duì)蓮藥材而言相對(duì)誤差小于5%，30批消炎利膽片兩者相對(duì)誤差小于8%，證明一測(cè)多評(píng)法可用于穿心蓮藥材及消炎利膽片的質(zhì)量控制。賀鳳成等[18]以中藥材五味子為研究對(duì)象，建立一測(cè)多評(píng)法實(shí)現(xiàn)對(duì)五味子4種木脂素類成分的質(zhì)量控制。其中選擇五味子醇甲為內(nèi)參物，建立該成分與五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素間的相對(duì)校正因子，并用所建立校正因子測(cè)定13批五味子藥材中五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素含量，同時(shí)采用外標(biāo)法測(cè)定13批五味子藥材中4個(gè)成分的含量，比較計(jì)算值與實(shí)測(cè)值的差異，驗(yàn)證一測(cè)多評(píng)法的準(zhǔn)確性，研究表明采用校正因子計(jì)算的含量值與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值之間無(wú)顯著差異。付瀅舟[19]等通過(guò)手性毛細(xì)管柱建立速效救心丸中異龍腦、左旋龍腦、右旋龍腦的一測(cè)多評(píng)含量測(cè)定方法，解決對(duì)照品中異龍腦、左旋龍腦和右旋龍腦的相對(duì)含量不一致問(wèn)題。其中選擇冰片中主要有效成分右旋龍腦為內(nèi)參物，建立與其他兩種成分的相對(duì)校正因子，并用建立的相對(duì)校正因子測(cè)定異龍腦、左旋龍腦的含量，同時(shí)與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較以驗(yàn)證一測(cè)多評(píng)法的準(zhǔn)確性，結(jié)果采用一測(cè)多評(píng)法的測(cè)定結(jié)果與現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)方法的測(cè)定結(jié)果基本一致，所建立的方法能測(cè)定以各種冰片投料生產(chǎn)的速效救心丸中的冰片含量。

3 展望

中藥材化學(xué)成分復(fù)雜，具有作用機(jī)制不確定性，用現(xiàn)在單一成分高低評(píng)價(jià)藥材質(zhì)量好壞并不具有很好的說(shuō)服力，這是影響中藥材質(zhì)量控制主要因素。中藥材有效成分復(fù)雜，藥效成分不明確性是制約中藥材走向世界的直接因素。因此，要真正實(shí)現(xiàn)中藥材的現(xiàn)代化、國(guó)際化仍然還有很長(zhǎng)的一段路要走。一測(cè)多評(píng)法通過(guò)以中藥材自有成分為內(nèi)參物，實(shí)現(xiàn)中藥材中多種成分同時(shí)測(cè)定，不僅解決中藥材測(cè)量過(guò)程中對(duì)照品難得到問(wèn)題，同時(shí)可以節(jié)約檢驗(yàn)過(guò)程中的時(shí)間和檢測(cè)成本，所以一測(cè)多評(píng)以其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，而具有廣泛的應(yīng)用前景。但是一測(cè)多評(píng)法目前仍然存在許多不足之處，比如方法建立過(guò)程工作繁瑣，且不能用保留值很的進(jìn)行好定性。

因?yàn)樵诤繙y(cè)定過(guò)程中，，藥材成分保留值很容易受其他因素的干擾，即定性問(wèn)題不能很好的解決。

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