【摘要】：目的:觀察2Hz、100Hz及2/100Hz三種不同頻率電針對擬血管性癡呆(Vascular Dementia,VD)大鼠的行為學(xué)、海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)、海馬組織谷氨酸、Ca~(2+)含量及N-甲基-D-天冬氨酸受體蛋白表達影響的干預(yù)效應(yīng),以探討電針治療VD的作用機制及其適宜頻率,為臨床電針治療VD提供客觀依據(jù)。方法:用Morris水迷宮對SD大鼠進行行為學(xué)測試,將篩選出的學(xué)習(xí)記憶功能正常的大鼠隨機分為待造模組和假手術(shù)組。VD大鼠模型用雙側(cè)頸總動脈反復(fù)缺血再灌注加腹腔注射硝普鈉的方法制備,假手術(shù)組大鼠僅將雙側(cè)頸總動脈分離出,腹腔不注射硝普鈉,不阻斷血流。待雙側(cè)頸總動脈阻斷1min以后,為保證大鼠腦組織充分缺血,觀察術(shù)中大鼠的翻正反射是否消失,虹膜是否呈蒼白色。造模術(shù)后,再將存活的模型大鼠隨機分為模型組、2/100Hz電針組、2Hz電針組、100Hz電針組。術(shù)后第3d開始干預(yù)。三個電針組處方選用“后三里”(雙)、“膈俞”(雙)、“大椎”、“百會”,先用毫針刺入,再接通電針儀,分別施以變頻2/100Hz、低頻2Hz、高頻100Hz電刺激,10分鐘/次,1次/天,連續(xù)治療15d。假手術(shù)組、模型組均采用同電針組相同的體位固定,10分鐘/次,1次/天,連續(xù)固定15d。于造模后第17d進行跳臺實驗檢測其行為學(xué),行為學(xué)檢測結(jié)束后,將大鼠斷頭處死,冰袋上迅速取出大腦組織,分離出右側(cè)海馬組織,加生理鹽水,制成10%的海馬組織勻漿,12000r/min,4℃,離心5min,提取上清液,用分光光度法檢測海馬組織谷氨酸、Ca~(2+)含量,Western Blot技術(shù)檢測N-甲基-D-天冬氨酸受體表達。左側(cè)大腦組織用濃度為10%的甲醛溶液進行固定,石蠟包埋、切片,HE染色,于光鏡下觀察各組大鼠海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果:1不同頻率電針對VD模型大鼠行為學(xué)的影響跳臺實驗學(xué)習(xí)成績結(jié)果顯示:模型組大鼠的反應(yīng)時間明顯延長,且錯誤次數(shù)增多,與假手術(shù)組相比有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01);三種頻率電針均可縮短反應(yīng)時間,減少錯誤次數(shù),較模型組有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05或P0.01),但各電針組之間兩兩相比較,均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。跳臺實驗記憶成績結(jié)果顯示:模型組大鼠的潛伏期明顯縮短,且錯誤次數(shù)顯著增加,與假手術(shù)組相比有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01);三種頻率電針均可明顯延長潛伏期,減少錯誤次數(shù),較模型組有顯著統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05或P0.01),但各電針組之間兩兩相比較,均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。2不同頻率電針對VD模型大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)細(xì)胞病理形態(tài)學(xué)的影響模型組大鼠與假手術(shù)組大鼠相比,海馬CA1區(qū)錐體細(xì)胞數(shù)量明顯減少,水腫明顯,細(xì)胞排列散亂、疏松,細(xì)胞形狀不規(guī)則,部分細(xì)胞核深染、固縮,核仁碎裂,甚至核仁消失;三個電針組大鼠海馬區(qū)錐體細(xì)胞較模型組有明顯改善,錐體細(xì)胞脫落減少,水腫減輕,細(xì)胞排列較整齊、緊密,細(xì)胞近似圓形或橢圓形,核仁較清晰。3不同頻率電針對VD大鼠海馬組織谷氨酸含量的影響模型組大鼠海馬組織谷氨酸含量顯著升高,與假手術(shù)組相比有顯著差異(P0.01)。三種頻率電針均可降低大鼠海馬組織谷氨酸含量,較模型組均有顯著差異(P0.01),但各電針組之間相比較,均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。4不同頻率電針對VD大鼠海馬組織Ca~(2+)含量的影響模型組大鼠海馬組織Ca~(2+)含量明顯升高,與假手術(shù)組相比有顯著差異(P0.01)。三種頻率電針均可降低大鼠海馬組織Ca~(2+)含量,較模型組均有顯著差異(P0.01),但各電針組之間相比均無顯著差異(P0.05)。5不同頻率電針對VD大鼠海馬組織N-甲基-D-天冬氨酸受體表達的影響模型組大鼠海馬組織N-甲基-D-天冬氨酸受體表達明顯增高,與假手術(shù)組相比有顯著差異(P0.01)。三種頻率電針均可降低N-甲基-D-天冬氨酸受體表達,較模型組均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異(P0.01),但各電針組之間比較無明顯差異(P0.05)。結(jié)論:2Hz、100Hz、2/100Hz三種頻率電針干預(yù)均可改善VD模型大鼠海馬組織的缺血性損傷,提高模型大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,其作用機制可能是通過降低模型大鼠海馬組織谷氨酸含量,抑制N-甲基-D-天冬氨酸受體表達,調(diào)節(jié)谷氨酸-N-甲基-D-天冬氨酸受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),減少海馬神經(jīng)細(xì)胞Ca~(2+)含量,從而減輕其對VD模型大鼠海馬組織神經(jīng)細(xì)胞的興奮毒性,對抗神經(jīng)細(xì)胞損傷,改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能。但三種不同頻率電針的干預(yù)效應(yīng)未表現(xiàn)出顯著性差異。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R245

【參考文獻】

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本文編號：2382816