【摘要】：目的探討通心絡(luò)是否對糖尿病大鼠具有抗心肌細(xì)胞凋亡的作用,并且進(jìn)一步研究通心絡(luò)是否通過調(diào)節(jié)Bax、Bcl-2、Caspase3、microRNA-21、PDCD4的表達(dá)來抑制細(xì)胞凋亡。方法健康的雄性SD大鼠60只,隨機(jī)取出12只作為正常對照組,將其余的48只大鼠用STZ腹腔注射誘導(dǎo)糖尿病,三天后將造模成功的40只大鼠隨機(jī)平均分配為四組分別為:通心絡(luò)低劑量治療組(0.5g/kg·d),通心絡(luò)中劑量治療組(1.0g/kg·d),通心絡(luò)高劑量治療組(1.5g/kg·d)。按上述規(guī)定劑量分別給各通心絡(luò)治療組通心絡(luò)灌胃治療12周。12周后,取大鼠尾靜脈血測血糖濃度,對比各組差異;取大鼠心臟的心尖部分進(jìn)行HE染色然后在電鏡下觀察大鼠心肌結(jié)構(gòu)有哪些病理變化;Western blot測Bax、Bcl-2、Caspase3的表達(dá);PCR測microRNA-21及PDCD4的表達(dá)。結(jié)果糖尿病模型組較正常對照組血糖明顯升高(P0.01);大鼠心肌HE染色后電鏡下觀察心肌結(jié)構(gòu):糖尿病模型組較正常對照組,心肌超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)大量異常的病理改變?nèi)缧募〖?xì)胞腫脹變性,炎細(xì)胞浸潤,成纖維細(xì)胞增生,血管內(nèi)皮間質(zhì)增厚等。通心絡(luò)各治療組較糖尿病模型組,心肌機(jī)構(gòu)的病理改變明顯減輕;Western blot結(jié)果:與正常對照組比較,糖尿病模型組Bcl-2表達(dá)下降(P0.01),Bax、caspase3表達(dá)上升(P0.01)。與糖尿病模型組比較,通心絡(luò)治療各組Bcl-2表達(dá)上升(P0.01),Bax、caspase3表達(dá)下降(P0.01),通心絡(luò)高劑量組與低劑量組比較Bcl-2表達(dá)上升(P0.05),Bax、caspase3表達(dá)下降(P0.05);PCR結(jié)果:與正常對照組比較,糖尿病模型組microRNA-21的表達(dá)下降(P0.05),PDCD4表達(dá)上升(P0.05)。與糖尿病模型組比較,通心絡(luò)治療各組microRNA-21的表達(dá)上升(P0.05),PDCD4表達(dá)下降(P0.05)通心絡(luò)高劑量組與低劑量組比較microRNA-21的表達(dá)上升(P0.05),PDCD4表達(dá)下降(P0.05)。結(jié)論成功造模的糖尿病大鼠心肌超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)大量凋亡的心肌細(xì)胞,肥大變形的心肌細(xì)胞,間質(zhì)纖維化等病理性改變;中藥通心絡(luò)對糖尿病大鼠有減輕心肌細(xì)胞凋亡的效果,其抑制心肌凋亡的效用可能與提高Bcl-2及microRNA-21的表達(dá),抑制Bax、Caspase3及PDCD4的表達(dá)相關(guān);通心絡(luò)的治療具有一定的劑量依賴性。
[Abstract]:Objective to investigate whether Tongxinluo can inhibit cardiomyocyte apoptosis in diabetic rats and whether Tongxinluo inhibits apoptosis by regulating the expression of Bax,Bcl-2,Caspase3,microRNA-21,PDCD4. Methods Sixty healthy male SD rats were randomly selected as normal control group. The remaining 48 rats were injected intraperitoneally with STZ to induce diabetes mellitus. Three days later, 40 successful rats were randomly divided into four groups: Tongxinluo low dose group (0.5g/kg d), Tongxinluo medium dose group) (1.0g/kg d), group) Tongxinluo high dose treatment group (1.5g/kg d).) According to the above prescribed dosage, Tongxinluo treatment group was given Tongxinluo gastric perfusion for 12 weeks. After 12 weeks, blood glucose concentration was measured in tail vein of rats, and the differences were compared. The apical part of rat heart was stained with HE and the expression of Bax,Bcl-2,Caspase3 was detected by; Western blot and the expression of microRNA-21 and PDCD4 by PCR. Results the blood glucose in the diabetic model group was significantly higher than that in the normal control group (P0.01). After HE staining, myocardial structure was observed under electron microscope: compared with normal control group, myocardial ultrastructure showed a large number of abnormal pathological changes, such as myocardial cell swelling and degeneration, inflammatory cell infiltration, fibroblast proliferation in diabetic model group. Vascular endothelial interstitial thickening and so on. Compared with the diabetic model group, Tongxinluo treatment group significantly alleviated the results of; Western blot. Compared with the normal control group, the expression of Bcl-2 decreased (P0.01) and the expression of Bax,caspase3 increased (P0.01) in the diabetic model group. Compared with the diabetic model group, the expression of Bcl-2 increased (P0.01) and the expression of Bax,caspase3 decreased (P0.01) in Tongxinluo group. The expression of Bcl-2 in Tongxinluo high dose group was higher than that in low-dose group (P0.05), Bax,). The expression of caspase3 decreased (P0.05). PCR results: compared with the normal control group, the expression of microRNA-21 decreased (P0.05) and the expression of PDCD4 increased (P0.05) in diabetic model group. Compared with the diabetic model group, the expression of microRNA-21 in Tongxinluo group increased (P0.05), the expression of PDCD4 decreased (P0.05). The expression of microRNA-21 in Tongxinluo high-dose group was higher than that in low-dose group (P0.05). The expression of PDCD4 decreased (P0.05). Conclusion A large number of apoptotic cardiomyocytes, hypertrophic and deformed cardiomyocytes, interstitial fibrosis and other pathological changes were found in the myocardial ultrastructure of diabetic rats. Tongxinluo has the effect of reducing cardiomyocyte apoptosis in diabetic rats. Its effect of inhibiting myocardial apoptosis may be related to increasing the expression of Bcl-2 and microRNA-21 and inhibiting the expression of Bax,Caspase3 and PDCD4. The treatment of Tongxinluo in a dose dependent manner.
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R259

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本文編號：2311801