【摘要】：目的:探索三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后早期腱骨愈合界面的影響。方法:實(shí)驗(yàn)材料及分組成年新西蘭大白兔(北京海淀區(qū)興旺實(shí)驗(yàn)動養(yǎng)殖場)27只,雄性,取材前實(shí)驗(yàn)動物運(yùn)動良好,可奔跑,未見關(guān)節(jié)腫脹、跛行等異常。膝關(guān)節(jié)前抽屜試驗(yàn)均為陰性。27只新西蘭大白兔隨機(jī)分為a)空白對照組;b)陽性對照組;c)實(shí)驗(yàn)組。每組9只。造模方法用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉(1ml/kg)。膝關(guān)節(jié)屈曲,髕骨內(nèi)側(cè)入路切開關(guān)節(jié)囊,暴露關(guān)節(jié)腔。髕骨向外側(cè)脫位,屈膝切除髕下脂肪墊,暴露趾長伸肌腱及髁間窩交叉韌帶。向上牽拉趾長伸肌腱,在其肌肉肌腱結(jié)合處切斷,保留股骨外髁止點(diǎn)。趾長伸肌腱斷端以1/0絲線編織牽引,作為移植物。切斷前交叉韌帶,制作前交叉韌帶損傷模型。脛骨隧道入口在脛骨結(jié)節(jié)內(nèi)側(cè)5mm,出點(diǎn)位于前交叉韌帶脛骨足印處。經(jīng)脛骨隧道,從髁間窩股骨外髁內(nèi)壁鉆股骨隧道,入點(diǎn)為前交叉韌帶止點(diǎn),出點(diǎn)在股骨外上髁附近皮質(zhì)。隧道直徑2mm。導(dǎo)針牽引移植物斷端,由上向下依次通過股骨隧道、髁間窩、脛骨隧道。拉緊移植物、牽引縫線縫合于脛骨結(jié)節(jié)皮質(zhì)固定,完成前交叉韌帶重建。腱骨界面干預(yù)措施各組實(shí)驗(yàn)動物完成模型建立后,分別給予干預(yù)措施。藥物均采用局部注射的干預(yù)方法,于術(shù)后一次性注射。a)空白對照組不給予干預(yù)措施;b)陽性對照組給予VEGF 1mg干預(yù);c)實(shí)驗(yàn)組給予三七總皂苷1mg干預(yù)。術(shù)后處理膝關(guān)節(jié)無菌敷料覆蓋,繃帶包扎。術(shù)后的新西蘭大白兔均分籠喂養(yǎng),膝關(guān)節(jié)不固定,自由活動。觀察并記錄傷口情況及其步態(tài)。術(shù)后3天每天肌注青霉素40萬單位。飼養(yǎng)溫度:22℃-24℃,濕度40%-70%。標(biāo)本切片及染色3組分別在術(shù)后2、4、6周各處死3只大白兔。每組每個時段3只大白兔含6個標(biāo)本,每個標(biāo)本為包含股骨段全長隧道的股骨外髁。股骨隧道全長附帶股骨外髁標(biāo)本,10%的福爾馬林固定,EDTA脫鈣、石蠟包埋,切片機(jī)切片(厚度約5um)。所有切片均行常規(guī)HE染色,Masson染色,免疫組化Ⅰ型膠原染色,免疫組化CD34染色,免疫組化VEGF染色,免疫組化VEGHR染色。觀察指標(biāo)通過HE染色,CD34染色,VEGF染色,VEGHR染色觀察腱骨愈合界面血供的影響。通過HE染色,masson染色,Ⅰ型膠原染色觀察腱骨愈合界面膠原纖維的影響。通過HE染色,masson染色觀察腱骨愈合界面骨形成的影響。結(jié)果:1.三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后早期血供的影響。HE染色血管計數(shù)前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(56.38 ± 36.55),VEGF組(110.47 ± 39.27),三七總皂苷組(79.43 ± 50.49),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(62.58),VEGF組平均秩次(121.72),三七總皂苷組平均秩次(87.21),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中VEGF組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周血管計數(shù)最多,其次為三七總皂昔組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(79.25±29.08),VEGF組(82.38±37.73),三七總皂苷組(163.78±71.74),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(68.06),VEGF組平均秩次(71.28),三七總皂昔組平均秩次(132.16),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂昔組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面血管計數(shù)最多,其次為VEGF 組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(63.08±43.37),VEGF組(122.20±77.00),三七總皂苷組(133.08±75.00),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(59.76),VEGF組平均秩次(101.4),三七總皂苷組平均秩次(110.34),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面血管計數(shù)最多,其次為VEGF 組。CD34染色血管計數(shù)前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(61.67 ±11.24),VEGF組(127.33 ±24.58),三七總皂苷組(150.33 ± 10.60),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊、P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周血管計數(shù)最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(78.00 ±1.73),VEGF組(220.67 ±22.72),三七總皂苷組(172.67 ±16.92),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊、P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中VEGF組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面血管計數(shù)最多,其次為三七總皂苷組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(92.00±3.61),VEGF組(157.33±43.66),三七總皂苷組(47.00± 12.12),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(5.00),VEGF組平均秩次(8.00),三七總皂苷組平均秩次(2.00),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中VEGF組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面血管計數(shù)最多。VEGF染色評分前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面VEGF染色評分結(jié)果。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周VEGF染色評分單因素方差分析,空白組(1.67±0.81),VEGF組(4.67 ± 1.51),三七總皂苷組(6.00 ± 0.00),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(3.67),VEGF組平均秩次(10.83),三七總皂苷組平均秩次(14.00),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周染色評分最高,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周VEGF染色評分單因素方差分析,空白組(2.33±1.97),VEGF組(5.50±1.23),三七總皂苷組(6.17±1.60),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊、P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面染色評分最高,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周血管計數(shù)單因素方差分析,空白組(2.83±1.60),VEGF組(5.33±1.03),三七總皂苷組(7.50±1.64),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊,P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面血管染色評分最高,其次為VEGF組。VEGHR染色評分前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面VEGHR染色血管計數(shù)結(jié)果。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周染色評分單因素方差分析,空白組(4.50±1.23),VEGF組(6.50±1.23),三七總皂苷組(5.67±0.82),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊、P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中VEGF組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周染色評分最多,其次為三七總皂苷組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周染色評分單因素方差分析,空白組(3.67±1.51),VEGF組(5.33±1.03),三七總皂苷組(6.00±0.00),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(5.17),VEGF組平均秩次(10.33),三七總皂苷組平均秩次(13.00),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面染色評分最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周染色評分單因素方差分析,空白組(5.33±1.03),VEGF組(7.00±1.55),三七總皂苷組(8.00± 1.64),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(5.83),VEGF組平均秩次(10.67),三七總皂苷組平均秩次(12.00),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間無統(tǒng)計學(xué)意義。說明前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面6周腱骨愈合界面染色評分三組無明顯差異。2.三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后早期膠原纖維的影響。HE染色膠原纖維前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面HE染色膠原纖維結(jié)果。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周膠原纖維單因素方差分析,空白組(24.98±13.70),VEGF組(28.70± 13.96),三七總皂苷組(24.10±8.98),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(85.08),VEGF組平均秩次(99.61),三七總皂苷組平均秩次(86.82),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間無統(tǒng)計學(xué)意義,說明前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周膠原纖維三組無明顯差異。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周膠原纖維單因素方差分析,空白組(22.62±9.79),VEGF組(25.23±10.04),三七總皂苷組(29.00±11.41),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊、P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面膠原纖維最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周膠原纖維單因素方差分析,空白組(14.70±4.97),VEGF組(27.10±11.56),三七總皂苷組(27.30±6.22),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(43.53),VEGF組平均秩次(108.68),三七總皂苷組平均秩次(119.29),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面膠原纖維最多,其次為VEGF 組。Ⅰ型膠原纖維前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周Ⅰ型膠原染色單因素方差分析,空白組(29.03±5.59),VEGF組(37.53±5.14),三七總皂苷組(49.43±9.72),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(20.37),VEGF組平均秩次(45.55),三七總皂苷組平均秩次(70.58),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周膠原纖維最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周膠原纖維單因素方差分析,空白組(36.67±6.35),VEGF組(43.70±9.46),三七總皂苷組(51.07±12.90),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(27.80),VEGF組平均秩次(48.63),三七總皂苷組平均秩次(60.07),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂昔組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面膠原纖維最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周膠原纖維單因素方差分析,空白組(48.63±7.43),VEGF組(72.87±12.41),三七總皂苷組(79.37±12.96),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(18.22),VEGF組平均秩次(53.32),三七總皂苷組平均秩次(64.97),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面膠原纖維最多,其次為VEGF組。masson染色膠原纖維前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周膠原纖維單因素方差分析,空白組(26.60±5.00),VEGF組(44.43±7.33),三七總皂苷組(51.07±8.95),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(16.28),VEGF組平均秩次(53.55),三七總皂苷組平均秩次(66.67),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周膠原纖維最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周膠原纖維單因素方差分析,空白組(32.23±4.70),VEGF組(46.23±9.52),三七總皂苷組(56.43±11.99),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(18.90),VEGF組平均秩次(50.65),三七總皂苷組平均秩次(66.95),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面膠原纖維最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周膠原纖維單因素方差分析,空白組(42.90±6.78),VEGF組(58.43±10.79),三七總皂苷組(63.83±9.80),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(20.40),VEGF組平均秩次(53.08),三七總皂昔組平均秩次(63.02),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面膠原纖維最多,其次為VEGF組。3.三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后早期骨形成的影響。HE染色骨形成前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周骨形成單因素方差分析,空白組(21.12±8.16),VEGF組(28.48±16.44),三七總皂苷組(44.50±17.90),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(57.99),VEGF組平均秩次(82.3),三七總皂苷組平均秩次(131.21),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周骨形成最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周骨形成單因素方差分析,空白組(36.68±9.40),VEGF組(43.10±10.35),三七總皂苷組(59.67±15.09),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(56.93),VEGF組平均秩次(81.58),三七總皂苷組平均秩次(132.99),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面骨形成最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周骨形成單因素方差分析,空白組(50.25±8.87),VEGF組(67.68±15.07),三七總皂苷組(76.02±18.67),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(48.68),VEGF組平均秩次(101.05),三七總皂苷組平均秩次(121.77),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面骨形成最多,其次為VEGF組。masson染色骨形成前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第2周骨形成單因素方差分析,空白組(35.40±4.77),VEGF組(52.67±21.17),三七總皂苷組(73.97±14.73),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(24.93),VEGF組平均秩次(42.88),三七總皂苷組平均秩次(68.68),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后腱骨愈合界面2周骨形成最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第4周骨形成單因素方差分析,空白組(45.83±9.12),VEGF組(66.73±12.9),三七總皂苷組(74.93±14.43),三組P(Levene Statistic)0.05,方差齊、P0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后4周腱骨愈合界面骨形成最多,其次為VEGF組。前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面第6周骨形成單因素方差分析,空白組(54.03± 11.00),VEGF組(67.03±25.04),三七總皂苷組(100.83±21.90),三組P(Levene Statistic)0.05,方差不齊、Kruskal-Wallis Test示,空白組平均秩次(25.67),VEGF組平均秩次(40.17),三七總皂苷組平均秩次(70.67),P(Kruskal-Wallis Test)0.05,說明三組之間有統(tǒng)計學(xué)意義,其中三七總皂苷組在前交叉重建術(shù)后6周腱骨愈合界面骨形成最多,其次為VEGF組。結(jié)論:1.三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后早期腱骨愈合界面的血供有促進(jìn)作用。三七總皂苷組對前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面術(shù)后第4周,第6周新生血管生成較空白組和VEGF組有明顯的促進(jìn)作用,其作用機(jī)制可能主要與促進(jìn)多種細(xì)胞因子分泌,促進(jìn)新生血管形成有關(guān)。2.三七總皂苷能促進(jìn)前交叉重建術(shù)后早期腱骨愈合界面膠原纖維的形成。三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面術(shù)后第2周,第4周,第6周膠原纖維的形成較空白組和VEGF組有明顯的促進(jìn)作用,其作用機(jī)制可能主要與促進(jìn)Ⅰ型膠原大量合成,最終促進(jìn)膠原纖維形成有關(guān)。3.三七總皂苷能促進(jìn)前交叉韌帶重建術(shù)后早期腱骨愈合界面骨形成。三七總皂苷對前交叉韌帶重建術(shù)后腱骨愈合界面術(shù)后第2周,第4周,第6周骨形成的較空白組和VEGF組有明顯的促進(jìn)作用,其作用機(jī)制可能主要與促進(jìn)成骨細(xì)胞增長,抑制破骨細(xì)胞增長有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：中國中醫(yī)科學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R274.9

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 張磊;謝崇新;白靖平;;關(guān)節(jié)鏡下保留殘端重建前交叉韌帶與不保留殘端重建的Meta分析[J];中國組織工程研究;2016年20期

2 狄亞龍;韓長旭;任逸眾;;非接觸前交叉韌帶損傷的危險因素研究進(jìn)展[J];中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版);2016年01期

3 郝建學(xué);王明昊;任康;秦洪;邸麗萍;劉鎖利;李雪波;張?jiān)?;不同移植物對兔前叉韌帶重建術(shù)后血運(yùn)變化的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展;2015年36期

4 孫健;劉暢;鄭龍坡;;Endobutton-Intrafix與Rigidfix-Intrafix固定自體乆肌腱重建前交叉韌帶的臨床對照研究[J];中國矯形外科雜志;2015年12期

5 畢方剛;嚴(yán)世貴;;促進(jìn)前交叉韌帶重建后腱骨愈合方法的研究進(jìn)展[J];中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版);2015年03期

6 晏雄偉;李志權(quán);張洪燕;;自體乆繩肌腱與人工韌帶加強(qiáng)系統(tǒng)重建前交叉韌帶的比較[J];生物醫(yī)學(xué)工程與臨床;2014年04期

7 楊偉毅;陳嘉怡;何於;李靂;曹學(xué)偉;劉軍;黃海定;;補(bǔ)腎中藥對兔前交叉韌帶重建術(shù)后腱-骨愈合生物力學(xué)的影響[J];廣東醫(yī)學(xué);2014年13期

8 楊琳;林萬程;施家樂;;三七總皂苷藥理作用的研究進(jìn)展[J];安徽醫(yī)藥;2014年05期

9 徐虎;張春禮;李光政;熊川;王迎春;朱慶生;裴國獻(xiàn);;前交叉韌帶重建中兩種建立股骨隧道方法的比較(英文)[J];中國矯形外科雜志;2013年08期

10 ;Low-intensity pulsed ultrasound therapy: a potential strategy to stimulate tendon-bone junction healing[J];Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology);2012年12期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 吳平;“接骨丹”對自體半腱肌、股薄肌重建前交叉韌帶術(shù)后腱—骨愈合影響的臨床研究[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

2 雷平;基于三維CT對比研究AM和TT入路重建前交叉韌帶術(shù)中股骨遂道的位置[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2015年

3 唐波;關(guān)節(jié)鏡下采用3種不同移植材料重建前交叉韌帶的近期療效比較[D];泰山醫(yī)學(xué)院;2013年

，

本文編號：2195297