【摘要】：目的：明確腺苷A1受體是否參與艾灸的鎮(zhèn)痛作用。方法：以C57BL/6J小鼠為研究對(duì)象,篩選基礎(chǔ)熱痛閾值在10 s-16 s的小鼠,隨機(jī)分為空白組、造模組；造模組予小鼠右足底注射完全弗氏佐劑20μL建立炎癥痛模型,造模后第4天,在小鼠右側(cè)“足三里”處分別運(yùn)用CCPA(A1受體激動(dòng)劑)、CPT(A1受體拮抗劑)進(jìn)行干預(yù)；模灸組小鼠于“足三里”穴位溫和灸,施灸15 min；鎮(zhèn)痛效應(yīng)測(cè)定分別在造模前、造模后第4天(即艾灸治療前)、艾灸后15min、45 min、75 min、105 min、135 min用PL-200熱刺痛儀測(cè)定熱痛閾；采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)下丘腦AiR mRNA表達(dá)；統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)軟件處理。結(jié)果：(1)炎癥痛模型小鼠艾灸鎮(zhèn)痛效應(yīng)與空白組比較,模型組小鼠痛閾降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；與模型組比較,模灸組小鼠痛閾顯著提高,在15～75 min時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(2)腺苷A1受體對(duì)艾灸鎮(zhèn)痛作用的影響1)腺苷A1受體激動(dòng)劑對(duì)艾灸鎮(zhèn)痛作用的影響①單獨(dú)注射三種不同濃度激動(dòng)劑(CCPA) (0.05 mM、0.1mM、0.2 mM)對(duì)模型組進(jìn)行干預(yù)后,痛閾均升高；CFA+CCPA 0.05 mM組在注射后45～135 min時(shí),較注射前升高(P0.05)；CFA+CCPA 0.1 mM 及 CFA+CCPA 0.2 mM組在注射后15～135 min時(shí),均保持較高水平,與注射前比較有差異(P0.05)。②艾灸加三種不同濃度激動(dòng)劑(CCPA) (0.05 mM、0.1mM、0.2 mM)對(duì)模灸組進(jìn)行干預(yù)后,痛閾均升高；CFA+MOXI+CCPA 0.05 mM組在干預(yù)后,在15～135 min與模灸組比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);CFA+MOXI+CCPA0.1 mM組和CFA+MOXI+CCPA 0.2 mM組在干預(yù)后15～135 min,均比模灸組痛閾有所提高(P0.05)；與單獨(dú)注射三種不同濃度CCPA(0.05 mM,0.1mM、0.2 mM)組比較,CFA+MOXI+CCPA 0.05 mM組痛閾值在15～75 min均有所提高(P0.05)；CFA+MOXI+CCPA 0.05 mM組在15 min, CFA+MOXI+CCPA 0.2 mM組在45min時(shí)痛閾均提高(P0.05)2)腺苷A1受體拮抗劑對(duì)艾灸鎮(zhèn)痛作用的影響①單獨(dú)注射三種不同濃度拮抗劑(CPT)(75 nM、150 nM、300 nM)對(duì)模型組進(jìn)行干預(yù),CFA+CPT 75 nM組及CFA+CPT 150 nM組在注射后15～105 min,CFA+CPT 300 nM組在注射后15～135 min時(shí)痛閾下降,與注射前比較有差異(P0.05);②艾灸加三種不同濃度拮抗劑(CPT)(75nM、50 nM、300 nM)對(duì)模灸組進(jìn)行干預(yù)后,其痛閾均有所下降；與模灸組比較,CFA+MOXI+CPT 75 nM組、CFA+MOXI+CPT 150 nM組、CFA+MOXI+CPT 300 nM組在干預(yù)后15-105 min,痛閾均有所降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)；與單獨(dú)注射三種不同濃度CPT(75 nM、150 nM、300 nM)組比較,CFA+MOXI+CPT 75 nM組、CFA+MOXI+CPT 150nM組在干預(yù)后15～75 min,痛閾均升高(P0.05); CFA+MOXI+CPT 300 nM組在干預(yù)后15～105 min,痛閾升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。(3)下丘腦A1R mRNA表達(dá)的變化結(jié)果：與空白組比較,模型組下丘腦A1R mRNA表達(dá)下調(diào)2.23倍。與模型組比較,模灸組下丘腦A1R mRNA表達(dá)上調(diào)4.26倍。結(jié)論：1.艾灸“足三里”能提高炎癥痛小鼠痛閡,鎮(zhèn)痛效應(yīng)在灸后約45 min達(dá)到高峰；2.局部腺苷A1受體參與艾灸鎮(zhèn)痛；①激活穴位局部A1受體增強(qiáng)艾灸鎮(zhèn)痛效應(yīng)；②阻斷穴位局部A1受體減弱艾灸鎮(zhèn)痛效應(yīng)；3.下丘腦腺苷A1受體可能參與艾灸鎮(zhèn)痛。
[Abstract]:Objective: to determine whether adenosine A1 receptor is involved in the analgesic effect of moxibustion. Methods: taking C57BL/6J mice as the research object, the mice with basic heat pain threshold in 10 s-16 s were selected and randomly divided into blank group and model group. The model group was injected into the right foot of the mouse to establish an inflammatory pain model with completely Freund's adjuvant 20 L, and fourth days after making the model, on the right side of mice. " CCPA (A1 receptor agonist) and CPT (A1 receptor antagonist) were used respectively in Zusanli; moxibustion group mice were treated with mild moxibustion at "Zusanli" point and 15 min with moxibustion. The analgesic effect was measured before modeling, fourth days after moxibustion (before moxibustion treatment), 15min, 45 min, 75 min, 105 min, 135 min with PL-200 tantalgia. The AiR mRNA expression in the hypothalamus was detected by real time fluorescence quantitative PCR, and the statistical analysis was processed by SPSS23.0 statistical software. Results: (1) the analgesic effect of Moxibustion in the model mice was compared with that of the blank group. The pain threshold of the model group was lower, the difference was statistically significant (P0.05); compared with the model group, the pain threshold of moxibustion group was obvious. The difference was statistically significant at 15~75 min (P0.05). (2) the effect of adenosine A1 receptor on moxibustion analgesia 1) the effect of adenosine A1 receptor agonist on the analgesic effect of Moxibustion (1) alone injection of three different concentration agonists (0.05 mM, 0.1mM, 0.2 mM) to the model group after the dry prognosis, the pain threshold increased; CFA+CCPA 0.05 mM group At 45~135 min after injection, higher than before injection (P0.05), CFA+CCPA 0.1 mM and CFA+CCPA 0.2 mM in 15~135 min after injection, all maintained a higher level, compared with before injection (P0.05). 2. Moxibustion plus three different concentration agonists (CCPA) (0.05 mM, 0.1mM, 0.2 mM) to the moxibustion group after the prognosis, pain threshold increased. There was no significant difference between the XI+CCPA 0.05 mM group and the moxibustion group in the 15~135 min group (P > 0.05), and the CFA+MOXI+CCPA0.1 mM group and the CFA+MOXI+CCPA 0.2 mM group were 15~135 min compared with the moxibustion group (P0.05), and compared with the group of three different concentrations CCPA (0.05 mM, 0.2). The pain threshold in the 0.05 mM group was improved at 15~75 min (P0.05), the CFA+MOXI+CCPA 0.05 mM group was 15 min, the CFA+MOXI+CCPA 0.2 mM group increased the pain threshold at 45min (P0.05) 2) the effect of adenosine A1 receptor antagonist on the moxibustion analgesic effect (1) alone injection of three different concentrations of antagonists (150, 150, 300) to the model group. The pain threshold of A+CPT 75 nM group and CFA+CPT 150 nM group was 15~105 min after injection, and the pain threshold of CFA+CPT 300 nM group decreased at 15~135 min after injection (P0.05). 2. Moxibustion plus three different concentration antagonists (CPT) (75nM, 50 nM, 300) had the prognosis of moxibustion group, and the pain threshold decreased; compared with moxibustion group, The T 75 nM group, CFA+MOXI+CPT 150 nM group and CFA+MOXI+CPT 300 nM group were 15-105 min in the dry prognosis, and the pain threshold decreased. The difference was statistically significant (P0.05). Compared with the group of three different concentrations of CPT (75 nM, 150 nM, 300 nM) group, the 75 groups were 15~75 of the prognosis, and the pain threshold increased. The XI+CPT 300 nM group had a 15~105 min prognosis and a higher pain threshold (P0.05). (3) the changes in the expression of A1R mRNA in the hypothalamus: compared with the blank group, the expression of A1R mRNA in the hypothalamus was down 2.23 times. Compared with the model group, the expression of A1R mRNA expression in the hypothalamus of moxibustion group was up 4.26 times. Conclusion: 1. Moxibustion "Zusanli" can be raised. The pain gap of high inflammatory pain mice, the analgesic effect reached the peak about 45 min after moxibustion; 2. local adenosine receptor was involved in moxibustion analgesia; (1) activating the local A1 receptor to enhance the analgesic effect of moxibustion; (2) blocking the local A1 receptor to weaken the analgesic effect of moxibustion; 3. the adenosine A1 receptor in the hypothalamus could participate in moxibustion analgesia.
【學(xué)位授予單位】：成都中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R245.81

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本文編號(hào)：2163334