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電針缺血性腦卒中大鼠水溝穴對miR-221及靶基因eNOS的影響

發(fā)布時間:2018-06-12 08:51

  本文選題:腦缺血 + 電針。 參考:《第二軍醫(yī)大學》2017年碩士論文


【摘要】:研究目的:本實驗通過動物實驗驗證電針水溝穴對缺血性腦卒中大鼠的治療作用,觀察電針MCAO大鼠水溝穴對缺血半暗帶區(qū)血管新生的影響,對大鼠大腦缺血半暗帶區(qū)miR-221及靶基因eNOS的影響,探討電針大鼠水溝穴對MCAO大鼠腦缺血后血管新生相關的miR-221的調控機制。研究方法:SD雄性成年大鼠隨機分為正常組、假手術組、模型組和電針組,參照Longa法制作缺血性腦卒中大鼠模型(MCAO),于72h后取缺血半暗帶區(qū)大腦皮質區(qū)組織,正常組和假手術組取相應部位組織,電針組大鼠選取水溝穴使用電針每天治療30min,連續(xù)治療3d。(1)Bederson五分法記錄各組大鼠的神經功能缺損程度,觀察電針水溝穴對MCAO大鼠神經缺損的影響;HE染色法和免疫組化法觀察電針MCAO大鼠水溝穴對各組大鼠腦組織神經細胞形態(tài)學的改變和大腦缺血半暗帶區(qū)以CD34為標記的血管新生的表達變化;(2)實時熒光定量PCR技術和western blot技術檢測各組大鼠中動脈供血區(qū)大腦皮質區(qū)組織中miR-221及eNOS的表達變化。研究結果:1.(1)神經缺損評分結果顯示:正常組和假手術組大鼠無神經缺損體征,兩組比較,p0.05,無統(tǒng)計學意義;模型組和電針組大鼠有不同程度的神經缺損,與假手術組比較,模型組大鼠神經缺損程度明顯增加,p0.01,有統(tǒng)計學意義;與模型組比較,電針組大鼠神經缺損程度明顯降低,p0.01,有統(tǒng)計學意義。(2)HE結果顯示:正常組和假手術組大鼠腦組織中的神經細胞排列均勻整齊,細胞輪廓清晰,結構完整,染色均勻,無細胞腫脹、壞死和破碎;模型組大鼠腦組織中的神經細胞明顯腫脹,有壞死和破碎,細胞排列不整齊,染色不均勻,細胞數量明顯減少,細胞核縮小甚至消失,細胞間隙增大;與模型組相比,電針組腦組織神經細胞腫脹程度較輕,細胞壞死、破碎相對較少,結構較完整,神經細胞數量相比模型組較多。(3)免疫組化結果顯示:正常組和假手術組大鼠中動脈供血皮質區(qū)以CD34為標記的血管新生數量較少,兩組比較無統(tǒng)計學意義,p0.05;模型組和電針組大鼠血管新生數量明顯增加,與假手術組大鼠相比,模型組大鼠血管新生明顯增多,p0.01,有統(tǒng)計學意義;與模型組大鼠相比,電針組大鼠血管新生程度更加顯著,p0.01,有統(tǒng)計學意義。(4)實時熒光定量PCR結果顯示:正常組和假手術組大鼠腦組織中miR-221表達量較少,兩組比較無差異,p0.05;模型組和電針組mi R-221表達水平增高,與假手術組比較,模型組miR-221表達量顯著增多,p0.01,有統(tǒng)計學意義;與模型組比較,電針組miR-221表達相對降低,p0.05,有統(tǒng)計學意義。正常組和假手術組大鼠腦組織中eNOS mRNA表達較少,兩組比較無差異;與假手術組比較,模型組eNOS mRNA表達增高,p0.05,有統(tǒng)計學意義;與模型組比較,電針組eNOS表達顯著增多,p0.01,有統(tǒng)計學意義。(5)Western blot結果顯示:正常組和假手術組大鼠腦組織中eNOS蛋白表達較少,兩組比較無差異;與假手術組比較,模型組eNOS蛋白表達增多,p0.01,有統(tǒng)計學意義;與模型組比較,電針組eNOS蛋白表達顯著增多,p0.01,有統(tǒng)計學意義。結論:電針MCAO大鼠水溝穴通過調節(jié)miR-221的表達水平,影響eNOS的表達,促進缺血半暗帶區(qū)血管新生的表達,降低神經缺損程度,此通路可能是參與血管新生的機制之一。
[Abstract]:Objective : To observe the effect of electroacupuncture ( EA ) on the angiogenesis of cerebral ischemic stroke in rats with cerebral ischemia in rats . The effect of electroacupuncture on the angiogenesis of rats with cerebral ischemia was studied . The results showed that : 1 . The results showed that the rats with cerebral ischemic stroke had no signs of nerve defect after cerebral ischemia in rats . ( 2 ) The results of HE showed that the neural cells in the brain tissues of the normal and sham operation groups were uniform and orderly , the cells were clear , the structure was complete , the staining was uniform , no cell swelling , necrosis and fragmentation were observed . Compared with the sham operation group , the expression level of eNOS mRNA in the model group was significantly increased , and the expression of eNOS mRNA in the model group was significantly increased . Compared with the model group , the expression of eNOS protein in the model group was significantly increased .
【學位授予單位】:第二軍醫(yī)大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R245.97

【參考文獻】

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本文編號:2009097

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