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電針缺血性腦卒中大鼠水溝穴對(duì)miR-221及靶基因eNOS的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-06-12 08:51

  本文選題:腦缺血 + 電針; 參考:《第二軍醫(yī)大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:研究目的:本實(shí)驗(yàn)通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證電針?biāo)疁涎▽?duì)缺血性腦卒中大鼠的治療作用,觀察電針MCAO大鼠水溝穴對(duì)缺血半暗帶區(qū)血管新生的影響,對(duì)大鼠大腦缺血半暗帶區(qū)miR-221及靶基因eNOS的影響,探討電針大鼠水溝穴對(duì)MCAO大鼠腦缺血后血管新生相關(guān)的miR-221的調(diào)控機(jī)制。研究方法:SD雄性成年大鼠隨機(jī)分為正常組、假手術(shù)組、模型組和電針組,參照Longa法制作缺血性腦卒中大鼠模型(MCAO),于72h后取缺血半暗帶區(qū)大腦皮質(zhì)區(qū)組織,正常組和假手術(shù)組取相應(yīng)部位組織,電針組大鼠選取水溝穴使用電針每天治療30min,連續(xù)治療3d。(1)Bederson五分法記錄各組大鼠的神經(jīng)功能缺損程度,觀察電針?biāo)疁涎▽?duì)MCAO大鼠神經(jīng)缺損的影響;HE染色法和免疫組化法觀察電針MCAO大鼠水溝穴對(duì)各組大鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變和大腦缺血半暗帶區(qū)以CD34為標(biāo)記的血管新生的表達(dá)變化;(2)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)和western blot技術(shù)檢測(cè)各組大鼠中動(dòng)脈供血區(qū)大腦皮質(zhì)區(qū)組織中miR-221及eNOS的表達(dá)變化。研究結(jié)果:1.(1)神經(jīng)缺損評(píng)分結(jié)果顯示:正常組和假手術(shù)組大鼠無神經(jīng)缺損體征,兩組比較,p0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組和電針組大鼠有不同程度的神經(jīng)缺損,與假手術(shù)組比較,模型組大鼠神經(jīng)缺損程度明顯增加,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,電針組大鼠神經(jīng)缺損程度明顯降低,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)HE結(jié)果顯示:正常組和假手術(shù)組大鼠腦組織中的神經(jīng)細(xì)胞排列均勻整齊,細(xì)胞輪廓清晰,結(jié)構(gòu)完整,染色均勻,無細(xì)胞腫脹、壞死和破碎;模型組大鼠腦組織中的神經(jīng)細(xì)胞明顯腫脹,有壞死和破碎,細(xì)胞排列不整齊,染色不均勻,細(xì)胞數(shù)量明顯減少,細(xì)胞核縮小甚至消失,細(xì)胞間隙增大;與模型組相比,電針組腦組織神經(jīng)細(xì)胞腫脹程度較輕,細(xì)胞壞死、破碎相對(duì)較少,結(jié)構(gòu)較完整,神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量相比模型組較多。(3)免疫組化結(jié)果顯示:正常組和假手術(shù)組大鼠中動(dòng)脈供血皮質(zhì)區(qū)以CD34為標(biāo)記的血管新生數(shù)量較少,兩組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,p0.05;模型組和電針組大鼠血管新生數(shù)量明顯增加,與假手術(shù)組大鼠相比,模型組大鼠血管新生明顯增多,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組大鼠相比,電針組大鼠血管新生程度更加顯著,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示:正常組和假手術(shù)組大鼠腦組織中miR-221表達(dá)量較少,兩組比較無差異,p0.05;模型組和電針組mi R-221表達(dá)水平增高,與假手術(shù)組比較,模型組miR-221表達(dá)量顯著增多,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,電針組miR-221表達(dá)相對(duì)降低,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。正常組和假手術(shù)組大鼠腦組織中eNOS mRNA表達(dá)較少,兩組比較無差異;與假手術(shù)組比較,模型組eNOS mRNA表達(dá)增高,p0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,電針組eNOS表達(dá)顯著增多,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)Western blot結(jié)果顯示:正常組和假手術(shù)組大鼠腦組織中eNOS蛋白表達(dá)較少,兩組比較無差異;與假手術(shù)組比較,模型組eNOS蛋白表達(dá)增多,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與模型組比較,電針組eNOS蛋白表達(dá)顯著增多,p0.01,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:電針MCAO大鼠水溝穴通過調(diào)節(jié)miR-221的表達(dá)水平,影響eNOS的表達(dá),促進(jìn)缺血半暗帶區(qū)血管新生的表達(dá),降低神經(jīng)缺損程度,此通路可能是參與血管新生的機(jī)制之一。
[Abstract]:Objective : To observe the effect of electroacupuncture ( EA ) on the angiogenesis of cerebral ischemic stroke in rats with cerebral ischemia in rats . The effect of electroacupuncture on the angiogenesis of rats with cerebral ischemia was studied . The results showed that : 1 . The results showed that the rats with cerebral ischemic stroke had no signs of nerve defect after cerebral ischemia in rats . ( 2 ) The results of HE showed that the neural cells in the brain tissues of the normal and sham operation groups were uniform and orderly , the cells were clear , the structure was complete , the staining was uniform , no cell swelling , necrosis and fragmentation were observed . Compared with the sham operation group , the expression level of eNOS mRNA in the model group was significantly increased , and the expression of eNOS mRNA in the model group was significantly increased . Compared with the model group , the expression of eNOS protein in the model group was significantly increased .
【學(xué)位授予單位】:第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R245.97

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2009097

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